谢坤 作品数:58 被引量:431 H指数:12 供职机构: 安徽医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 安徽省科技攻关计划 安徽省自然科学基金 安徽省卫生厅医学科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
P38MAPK信号通路抑制剂SB203580对肝细胞缺氧再灌注影响的实验研究 被引量:1 2013年 目的观察P38MAPK抑制剂SB203580在人肝癌细胞系HepG2细胞和人正常细胞系LO2细胞缺氧再灌注过程中的作用。方法实验分为正常对照组、缺氧对照组、SB203580+正常培养组、SB203580+缺氧培养组,缺氧培养24 h、复氧1 h后,分别应用Western Blot、MTT、划痕实验、Transwell实验、AnnexinV-FITC/PI双染实验检测细胞中P38蛋白表达情况和细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的变化。结果与正常对照组相比,缺氧培养组HepG2细胞的凋亡率、P38MAPK磷酸化水平增加;SB203580+缺氧培养组HepG2细胞的凋亡率相对于缺氧培养组增加,P38MAPK磷酸化水平降低;划痕实验48 h后,缺氧对照组HepG2细胞明显向划痕的中央迁移,而SB203580+缺氧培养组HepG2细胞迁移受到抑制;侵袭实验24 h后,SB203580+缺氧培养组HepG2细胞的侵袭能力较缺氧对照组降低(P<0.05);AnnexinV-FITC/PI双染实验显示与缺氧对照组相比,LO2细胞SB203580+缺氧培养组凋亡率降低,而HepG2细胞SB203580+缺氧培养组凋亡率则增加(P<0.01);MTT结果显示实验组HepG2细胞和LO2细胞增殖抑制率受到影响,并出现时间浓度依赖关系。结论 SB203580通过特异性阻断P38MAPK信号转导通路,对缺氧培养的正常肝细胞LO2细胞产生保护作用,同时对缺氧培养的肝癌细胞HepG2具有促进凋亡、抑制增殖以及抑制细胞迁移和降低侵袭能力的作用。 毛长坤 刘付宝 朱立新 张志功 谢坤 赵义军 赵红川 王国斌 黄帆 耿小平关键词:P38MAPK SB203580 肝细胞 缺氧再灌注 门静脉栓塞在肝切除术前的临床运用 被引量:1 2013年 门静脉栓塞(PortalVeinEmbolization,PVE)通过栓塞患侧肝脏门静脉,使其萎缩而对侧肝叶增生,从而增加术后残肝体积(remnantlivervolume,RLV),扩大肝切除手术的适应证,提高了手术的安全性。目前临床主要应用于RLV过小而无法耐受肝叶切除术的肝肿瘤患者,现就PVE在肝癌治疗中的临床应用做一综述。 谢坤 耿小平关键词:门静脉 栓塞 肝脏切除 外科手术治疗胰管结石46例分析 被引量:4 2015年 目的探讨外科手术在胰管结石治疗中的价值。方法回顾性分析2008年1月至2013年12月间安徽医科大学第一附属医院普外科手术治疗46例胰管结石的临床资料。结果46例胰管结石患者中上腹痛42例,脂肪泻4例,合并糖尿病6例,血、尿淀粉酶升高4例,CAl9-9升高9例,胰腺癌5例,急性胰腺炎病史4例。所有患者术前均经影像学检查确诊为胰管结石。结石分布于胰头部21例,胰体(尾)部17例,充满型全胰管结石8例。7例患者为单发结石,28例为2~3枚,11例为3枚以上。2l例患者的结石最大直径〉1.0cm,25例的结石最大直径≤1.0am。手术方式:33例患者行胰管切开取石+胰管空肠侧侧吻合术,8例行胰十二指肠切除术,5例行胰体尾联合脾脏切除术。6例患者术后出现并发症,并发症发生率13.0%(6/46)。全组无死亡病例。术后残石率为6.5%(3/46)。39例获得随访,随访率为87.5%(39/46),随访时间为3~57个月。疼痛缓解率为85.7%(36/42),结石复发率为4.3%(2/46)。结论外科手术是治疗胰管结石的重要方式;根据患者胰管结石的具体情况采用个体化手术治疗是取得良好疗效的关键。 赵红川 耿小平 刘付宝 潘树波 谢坤 王国斌 黄帆关键词:结石 胰腺疾病 外科手术 VCC-1在肝癌患者血、尿和癌组织中的表达及其意义 被引量:2 2014年 目的检测VCC-1及VEGF在原发性肝癌患者血、尿和癌组织中的表达情况,并探讨它们在乙肝相关性肝癌发生、发展中的作用及临床意义。方法应用ELISA法检测40例原发性肝癌血、尿标本中VCC-1及VEGF术前及术后第1、5、7天的浓度,并同时检测40例正常人和13例因乙肝后肝硬化、门静脉高压、脾功能亢进行脾切除+贲门周围血管离断+肝活检患者术前血、尿标本中VCC-1及VEGF的浓度。应用免疫组化的方法检测40例肝癌术后癌组织及癌旁组织和13例肝硬化活检组织中VCC-1及VGGF的表达情况。结果肝癌组术前血、尿中VCC-1和血清中VEGF的浓度高于正常对照组和肝硬化组(P<0.05),肝硬化组与正常组血、尿VCC-1及血清中VEGF无明显差异(P>0.05)。肝癌组术后1、5、7天血、尿中VCC-1及血清VEGF浓度明显高于术前。肝癌组织VCC-1、VEGF免疫组化阳性率高于癌旁组和肝硬化组织(P<0.05),癌旁组织和肝硬化组织之间无明显差异。肝癌组织中VCC-1的阳性表达与肿瘤存在脉管癌栓、TNM分期具正相关性(P<0.05);肝癌组织中VEGF的阳性表达与肝癌的TNM分期及肿瘤直径具有相关性。结论肝癌患者血、尿及癌组织中VCC-1表达增高,且与VEGF的表达具有正相关,提示VCC-1可能参于肝癌的进展及转移。 刘振生 赵红川 黄帆 刘付宝 王国斌 赵义军 谢坤 耿小平关键词:肝癌 血管内皮生长因子 3个VHL综合征家族的基因检测及临床调查 被引量:5 2015年 目的明确von Hippel-Lindau综合征(VHL综合征)家族基因突变及临床表现特点,筛查出家族内基因突变携带者行临床筛查,综合家族发病特点行家族健康指导。方法通过流行病学调查,共3例先证者临床诊断VHL综合征。抽取先证者及家族自愿者外周血,应用聚合酶链反应(PCR)体外扩增得到vhl基因片段,通过测序得到基因信息;再对家族内具有vhl基因突变的携带者进行头颅MRI、腹部B超等对全身多系统行临床筛查;综合家族发病特点给出家族健康指导。结果 3例先证者均发现vhl基因发生突变,家族1中5例成员基因阳性,突变方式为外显子1 c.330C>A;家族2先证者外显子3488del C;家族3发现7例基因阳性者,突变方式为外显子1 c.233G>A。其中,家族成员1III3、3III1、3III4、3IV3确定为基因突变携带者,临床检查显示其中3例成员已发病,1III3表现为双肾多发囊肿,胰腺多发囊肿;3III1表现为胰腺多发囊肿;3III4表现为视网膜血管母细胞瘤、胰腺多发囊肿,视网膜血管母细胞瘤接受激光治疗。3IV3由于年龄较小,临床检查未见明显异常。所有基因携带者接受规范化随访。结论基因检测可早期确诊VHL综合征,临床上对vhl基因突变患者需进行严密随访,从而提高患者治疗效果、延长生存期或改善生活质量。 吴鑫尧 陈江明 赵义军 谢坤 刘付宝 耿小平关键词:VHL 综合征 VHL 基因 基因检测 上皮间质转化在肝细胞癌转移中作用的研究进展 被引量:2 2015年 1 EMT的概念及生理作用EMT是指在特定的生理和病理情况下上皮细胞向间质细胞转化的现象[1],是一个短暂且可逆的极化过程:上皮细胞转化为纤维母细胞或间质细胞表型,后者具有高度活性和侵入性能,在多种生理过程中发挥重要作用。经历EMT的细胞,获得了穿透基底膜和间质组织的能力,并可穿过循环系统转移至远处组织。在生理条件下,这个过程是胚胎发育的早期阶段、伤口愈合、 倪卓然 谢坤 耿小平关键词:肝脏 肿瘤 肝内外胆管结石合并CTPV外科治疗策略 被引量:3 2014年 目的研究肝内外胆管结石合并CTPV的外科治疗策略。方法收集我院自2010年1月至2014年3月共收治肝内外胆管结石患者670名,其中肝内外胆管结石患者合并门脉海绵样变性患者9例。分别采用ERCP/EST取石,胆总管切开取石,肝叶部分切除和分期手术方法。结果手术残石率44.4%(4/9),治疗总残石率22.2%(2/9)。ERCP取石成功2例,胆总管探查取石+T管外引流3例,肝叶部分切除3例,分期手术1例,术中输血率33.3%(3/9)。结论完善的术前影像学诊断,个体化的外科治疗方案,精准的外科操作,是诊治此类患者的要点。 黄帆 赵红川 刘付宝 王国斌 赵义军 张志功 谢坤 余孝俊 耿小平关键词:胆管结石 外科手术 肝细胞肝癌中乙肝病毒基因整合位点及临床病理分析 被引量:4 2013年 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)在肝细胞肝癌(HCC)染色体上的整合规律及其与临床病理的关系。方法收集40例HBsAg阳性HCC患者围手术期的一般临床资料和病理学资料,并进行随访。以40例HCC组织的DNA为模板,HBVX基因上游序列和人类基因组Alu重复序列为引物,应用巢式PCR原理,扩增出HBV X基因及其侧翼的人基因组DNA片段。PCR产物割胶回收后以ABI公司3700XL测序仪进行全自动测序。所获结果经美国国家生物技术信息中心(NCBI)BLAST及Mapviwer检索确认HBV整合在染色体上的精确位置。结合临床病理及随访资料分析HBV DNA整合对HCC患者的影响。结果 40份HCC组织中,18例存在HBV整合现象,整合的标本中15例正向插入宿主基因,7例反向插入宿主基因,其中4例既有正向插入,又有反向插入,有2例标本有两个HBV整合位点。从病毒基因分析,整合可发生于X基因的任意长度,且均以截短方式插入宿主细胞DNA。另有22份标本未检测到有整合。HBV整合与HCC患者在性别、年龄、AFP、癌栓及复发等方面无关(P>0.05);而与HBV DNA、肿瘤大小、分化程度呈正相关(P<0.05)。结论 HBV在HCC细胞染色体上的整合呈不均衡分布。HBV整合与HCC患者HBV DNA、肿瘤大小、分化程度呈正相关。 贺良 耿小平 赵红川 赵义军 张志功 刘付宝 王国斌 谢坤关键词:肝肿瘤 病毒整合 早期肠内营养(<72h)与全肠外营养在SAP治疗中的价值评估:荟萃分析 被引量:7 2013年 目的系统评价早期肠内营养(EEN)和全肠外营养(TPN)对重症急性胰腺炎(SAP)患者预后的影响。方法检索Pubmed(1997~2012.1)、EMbase(1984~2012.1)、Cochrane Central Register of Controlled Trials(Cochrane Library,2012.1)、CBM(1975~2012.1),补充检索纳入研究的参考文献;对符合条件的文献进行资料提取及质量评估后,采用RevMan5.1软件进行分析。结果检索文献385篇,严格按照纳入标准并经过文献质量评估,共纳入14个RCT,合计701例患者(338例接受EEN治疗,363例接受TPN治疗),Meta分析结果显示:与TPN相比,EEN既能降低人工营养相关并发症的发生率,又可降低SAP患者的病死率;同时胰腺相关并发症、多器官功能衰竭及需要手术干预的几率均明显下降,但对于非胰腺相关并发症,两组营养支持的作用无显著性差异[OR=0.52,95%CI(0.26,1.04),P=0.06]。结论在SAP治疗过程中,EEN总体效果优于TPN,在无明显禁忌的情况下首先推荐使用EEN。 周鹏 耿小平 赵红川 赵义军 王国斌 张志功 谢坤 周大臣关键词:重症胰腺炎治疗 早期肠内营养 全肠外营养 肝胆管结石胆肠吻合“翻修”手术的临床研究 被引量:6 2016年 目的探讨胆肠侧侧吻合术后再发肝内外胆管结石的有效治疗方式,以及胆肠内引流"翻修"手术的适应症。方法 7例胆肠内引流术后再发结石病人再手术,术中利用纤维胆道镜尽可能取尽结石,同时发现Oddi括约肌功能良好,复原胆道的原有解剖结构,放置胆总管T管引流,若已有肝叶或段积累大量结石或已发生肝纤维化甚至脓肿、癌变者则同时行相应的肝叶或段的切除。术后6周行T管造影,无结石者拔除T管,若有结石残留,则经T管窦道纤维胆道镜多次取石,直至取尽结石为止。电话结合门诊复查的方式随访,随访时间截至2015年07月31日。结果 7例患者均有胆道感染症状,肝内胆管和/或胆总管存在结石;5例联合肝叶切除,其中4例因肝叶萎缩,而1例因癌变;7例均手术复原胆肠吻合,其中4例术后胆道造影未见结石残留,3例均经一次纤维胆道镜取尽结石。结石最终清除率为100%。术后7例患者均出现不同程度的并发症,经过禁食、抗感染、胸腔穿刺、再手术等处理均好转。随访中位数30个月,均无结石复发与胆道感染的症状。结论胆肠内引流术应严格限制在其适应症内;在Oddi括约肌功能良好的情况下,翻修胆肠内吻合后放置胆总管T管联合纤维胆道镜是胆肠侧侧吻合术后再发肝内外胆管结石的有效治疗方法。 谢坤 张雪 年建泽 王国斌 耿小平 刘付宝关键词:肝内胆管结石 胆肠内引流 复发