肖云晓
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 螺旋藻激酶分离提纯方法初探被引量：9
- 2011年
- 目的研究螺旋藻激酶的分离纯化方法,为工业化放大生产螺旋藻激酶药物提供一定的实验依据,为后续的酶学性质研究打下基础。方法配制螺旋藻激酶粗酶液,通过离心沉淀,饱和硫酸铵分级盐析,透析,凝胶层析来分离提纯螺旋藻激酶,最后用SDS-PAGE电泳法验证螺旋藻激酶纯度,测定分子量。结果通过一系列的分离提纯得到了较纯的蛋白,酶回收率达到42.3%,纯化倍数达到6.1。所得螺旋藻激酶的分子量为40 KD。结论初步探索出较为优化的螺旋藻激酶的分离纯化方法。
- 肖云晓陈高斯庞辉
- 关键词：分离纯化凝胶层析
- 螺旋藻激酶的酶学性质研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究螺旋藻激酶的酶学性质。方法螺旋藻激酶通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、冷冻干燥法从螺旋藻激酶发酵粗提物中纯化而来,用纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,研究螺旋藻激酶的作用方式及温度、pH和抑制剂对其纤溶活性的影响。结果螺旋藻激酶能直接溶解纤维蛋白;它在45℃时活性最高,最适反应温度范围为45～55℃;最适反应pH为8,pH6～10内稳定性较强;EDTA和DTT对螺旋藻激酶活力无明显影响,而PMSF能完全抑制其活性。结论螺旋藻激酶热稳定性强,适宜碱性的环境。螺旋藻激酶是一种丝氨酸蛋白酶,结构中不含二硫键。
- 蒋皓陈高斯庞辉肖云晓
- 关键词：酶学性质
- 螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞活力及分泌t-PA、PAI-1和vWF的影响
- 目的:通过体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，建立肾上腺素(Adr)损伤模型，并以肝素(Hep)为阳性对照，探讨螺旋藻激酶CSPK)对HUVEC活力的影响，以及对HUVEC分泌人血管假血友病因子(vWF)，组织型纤溶...
- 肖云晓
- 关键词：组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制剂
- 文献传递
- 螺旋藻激酶对肾上腺素损伤内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的影响被引量：4
- 2016年
- 研究不同浓度螺旋藻激酶(spirulina kinase,SPK)对肾上腺素(Adr)损伤血管内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。采用不同浓度SPK处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测不同浓度SPK对HUVEC活力影响;建立Adr损伤模型,酶联免疫吸附法检测细胞培养液中t-PA和PAI-1含量的变化。结果显示SPK浓度在10μg/mL^2 mg/mL范围内,细胞活力明显升高且不影响细胞分泌t-PA和PAI-1的量;SPK作用于Adr损伤模型,各剂量组均可降低Adr损伤下HUVEC分泌PAI-1的量,提高t-PA/PAI-1比值。本研究揭示了SPK可通过降低PAI-1、提高t-PA/PAI-1比值来实现保护Adr损伤的血管内皮细胞。
- 王慧杰肖云晓庞辉陈萌蒋皓
- 关键词：组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制剂肾上腺素
- 螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的研究螺旋藻激酶(Spirulina kinase,SPK)对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响,探讨其抗血栓作用机制,为开发新型溶栓药物提供理论依据。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立肾上腺素(Adr)损伤模型加入不同浓度的SPK,并以肝素(Hep)为阳性对照,与空白组对照,经过12,24,48 h后,逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经凝胶电泳分离后,凝胶图像分析仪照相和扫描,测定各组t-PAmRNA、PAI-1mRNA与内参基因三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA的相对表达量。结果在Adr损伤模型中,2 mg/ml SPK可以上调t-PAmRNA表达,超大剂量SPK降低t-PAmRNA表达。SPK还可以随着剂量的增加明显的抑制PAI-1mRNA的表达,效果强于大剂量的肝素。结论 SPK可能通过小部分活化t-PAmRNA的表达,抑制PAI-1mRNA的表达,从而达到抗血栓的作用。
- 赵杰肖云晓蒋浩庞辉
- 关键词：组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制物逆转录多聚酶链式反应
- 螺旋藻激酶对内皮细胞分泌vWF的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨螺旋藻激酶(SPK)对肾上腺素损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌人血管性假血友病因子(vWF)的影响,推测SPK抗血栓作用机制。方法:用不同浓度SPK对HUVEC预孵育后进行肾上腺素损伤,取细胞培养上清液,用酶联免疫吸附法检测vWF的含量。结果:与空白对照组相比,肾上腺素刺激的HUVEC分泌vWF明显增加,与肾上腺素模型组相比,SPK可剂量依赖性抑制损伤细胞分泌vWF,并随时间延长而逐渐明显。结论:SPK可以减少肾上腺素刺激下HUVEC分泌vWF,增强抗血栓作用。
- 陈萌肖云晓庞辉王慧杰
- 关键词：人脐静脉内皮细胞VWF肾上腺素
