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原核增强子样序列及其应用: 本发明涉及具有原核DNA转录增强子活性的DNA片段，其筛选和克隆方法及其在制备重组表达载体中的应用。本发明的新的增强子样序列明显的改善了外源基因的转录速率，进而明显地提高了外源目的基因表达产物的产率。; 吴淑华侯云德何建新秘晓林韩峰曹茹王艳; 文献传递

大肠杆菌C600染色体DNA中原核增强子样序列的克隆和鉴定: 2001年; 采用大肠杆菌trp启动子,氯霉素乙酰转移酶(CAT)作为标记基因,构建了两个应用氯霉素压力筛选增强子序列的检测载体pKT和pKTP。用pKT,pKTP及pKN2从大肠杆菌C600染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列3A,8A和V6S,这3个片段均具有正、反向增强活性,对β-半乳糖苷酶表达的正向增强活性达到7～8倍,反向增强活性2～3倍。RNA斑点杂交实验证明,3A,8A和V6S片段对于基因表达调控的增强作用均发生在转录水平上。; 何建新廖小慧秘晓林韩峰王艳吴淑华; 关键词：大肠杆菌染色体原核增强子样序列基因组克隆

原核增强子样序列3A的克隆及其结构与功能的研究被引量：2: 2001年; 从大肠杆菌 C60 0株染色体基因组中筛选到一个原核增强子样序列 3A,其正、反向增强活性分别能提高 β-半乳糖苷酶活性 7.1 1和 2 .93倍 .采用体内转录 ,RNA斑点印迹杂交的方法 ,证明3A序列对于基因表达的调控发生在转录水平上 . 3A功能区的研究表明 ,3A增强活性主要位于距其正向克隆 5′端 (增强活性较强的方向称为正向 ,反之为反向 ) 30 0～ 540 bp,长约 2 4 0 bp的区段内 ,并证明; 何建新廖小慧秘晓林韩峰王艳吴淑华; 关键词：大肠杆菌原核增强子样序列

流感病毒血凝素基因工程抗体的抗病毒实验效果观察被引量：1: 2002年; 目的　对昆虫细胞系统表达纯化的中和性流感病毒血凝素基因工程全抗体IgG IV 2 ,IgG IV 6进行体外和体内抗病毒效果的研究。方法　对比抗体应用前后病毒在MDCK细胞中的病毒滴度和动物模型中粘膜用药前后鼠肺内病毒滴度的改变 ,验证抗体的粘膜抗感染效果。结果　两株基因工程抗体使 4 .5log1 0 TCID50 滴度的病毒下降 1 2的剂量分别为 0 .8μg和 0 .5 μg ;动物模型的粘膜给药表明使 4 .0log1 0 TCID50 的病毒下降 1 2所需的抗体剂量IgG IV 2为 0 2 5mg kg体重 ,IgG IV 6为0 1mg kg体重 ,联合应用时为 0 .0 8mg kg体重。结论　获得的基因工程抗体具有体内体外的抗病毒效果 ,能够中和病毒毒力。; 杨贵宾王艳赵小东韩峰吴淑华侯云德; 关键词：流感病毒血凝素基因工程抗体流感免疫组织化学

流感病毒中和性基因工程Fab抗体的研制被引量：6: 2001年; 目的　获得基因工程抗流感病毒抗体 ,为检测其粘膜用药在动物模型中的抗病毒效果奠定基础。方法　从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞 ,提取总RNA ,Oligo dT逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgG轻、重链基因 ,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的流感病毒A Sydeny 5 97(H3N2 )为固相抗原筛选抗体Fab段 ,并在大肠埃希菌中进行分泌性表达。通过血凝抑制实验、免疫荧光实验和病毒中和实验选择具有中和作用的Fab抗体。结果　分离到两株Fab克隆 ,IV 2和IV 6 ,流感病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性 ,间接免疫荧光实验呈阳性。它们都具有血凝抑制作用 ,病毒中和实验显示能使病毒滴度下降 30倍和 2 0倍。结论　获得了两株具有病毒中和活性的人源抗流感病毒悉尼株的Fab段抗体 ,为进一步的表达纯化及粘膜给药研究其抗病毒效果提供材料。; 杨贵宾韩峰梁米芳吴淑华王艳侯云德; 关键词：正粘病毒科单克隆抗体重组蛋白质类

新的原核增强子样序列及其应用: 本发明涉及具有原核DNA转录增强子活性的DNA片段,其筛选和克隆方法及其在制备重组表达载体中的应用。本发明的新的增强子样序列明显的改善了外源基因的转录速率,进而明显地提高了外源目的基因表达产物的产率。; 吴淑华何建新秘晓林韩峰曹茹王艳候云德; 文献传递

毒物信息系统的建立: 1994年; 该系统由毒物中毒信息管理系统;中毒信息微机检索系统;RTECS(CD-ROM)光盘检索系统:化学品中文文献题目检索系统四部分组成.系统可提供的毒物信息有化学物质、药物以及有毒动植物等的名称鉴别号、理化特性、毒性毒理等.毒物中毒的信息有中毒症状、临床治疗、解毒药以及毒物分析等,并附有各类信息来源文献.各系统自成为独立的检索系,因此,各系统又可以独立为用户检索服务.; 徐丽娟霍本兴黄巍陈秀芬周铁生王艳王华; 关键词：数据库

毒物中毒信息系统研究: 1994年; 论述了毒物中毒信息系统的组成;毒物的分类、总编码和参考文献代码的编制:信息的收集和处理.整个系统由基础库、参考信息库和管理系统三大部分组成,每一部分又分为若干小块.毒物分为9类.每一类用一个字母代表.每一毒物用十位字母和数字编制的编码表示,编码起到系统主码(skelatal key)作用.参考文献代码是将参考文献用 6位字母、数字、符号编制,主要节省储存空间和提高检索速度.毒物信息包括名称、理化性质、用途、生产厂家、毒性毒理、临床表现、诊断治疗、诊断标准、毒物分析、参考文献.系统还包括了毒物中毒总论、专家名录、医院、中毒文献病例等参考信息.; 霍本兴徐丽娟黄巍陈秀芬周铁生王艳王华宋艳梅李云涛

中和性流行性感冒病毒基因工程抗体在昆虫细胞中的全基因表达、纯化及鉴定被引量：3: 2001年; 将中和性流行性感冒 (流感 )病毒基因工程抗体IV 2、IV 6的轻链和重链Fd段基因 ,分别克隆入全抗体表达载体 pAC L Fc ,构建成杆状病毒表达载体pAC L Fc Ⅳ 2和 pAC L Fc Ⅳ 6 ,转染昆虫Sf9细胞 ,利用杆状病毒 /昆虫细胞系统实现抗体的分泌型表达 ,表达产物进行亲和层析分离纯化。SDS PAGE电泳和Westernblot法证实有完整免疫球蛋白的表达 ,免疫印迹法证实它们能与流感病毒血凝素蛋白特异性结合。经间接竞争性抑制ELISA法测定 ,抗体与流感病毒抗原结合的解离常数KD 值分别为 2 5× 10 -9M和 3 0× 10 -9M。流感病毒基因工程全抗体经在昆虫细胞中的表达、纯化和抗体特性鉴定 ,获得了两株纯化的全抗体 ,可用于以后的动物模型呼吸道粘膜被动免疫抗感染的研究。; 杨贵宾吴淑华梁米芳赵小东王艳侯云德; 关键词：昆虫细胞基因工程抗体分泌性表达纯化

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王艳