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检测水产品食物过敏的免疫胶体金层析方法: 本发明公开了一种检测水产品食物过敏的免疫胶体金层析方法，它包括制备胶体金、蛋白质的胶体金标记、免疫胶体金层析检测等步骤。本发明是利用免疫胶体金层析技术对水产品食物过敏进行检测，该技术既有酶免疫法的特异性强和灵敏度高的优点...; 刘光明曹敏杰沈苑; 文献传递

锯缘青蟹精氨酸激酶的分离纯化、分子克隆及过敏原性研究: 食物过敏是人类常见的一种免疫性疾病,随着社会进步和全球化进程的不断发展,食物过敏的发病率越来越高,成为全球关注的食品安全问题。食物过敏主要由食物中蛋白质引起,主要症状有哮喘、荨麻疹等,严重的甚至会危及到生命。水产品是最常...; 沈苑; 关键词：锯缘青蟹精氨酸激酶克隆表达双向电泳质谱分析; 文献传递

锯缘青蟹精氨酸激酶基因的克隆与表达被引量：4: 2011年; 通过分子生物学方法,克隆得到锯缘青蟹(Scylla serrata)精氨酸激酶(Arginine Kinase,AK)开放阅读框基因序列.测序结果显示:该开放阅读框基因的序列长度为1 071 bp,编码356个氨基酸残基;该序列登录Genbank(GQ:851626),序列比对结果显示,锯缘青蟹精氨酸激酶与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)精氨酸激酶的氨基酸序列同源性高达94%,与岸蟹(Carcinus maenas)、中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)等甲壳类动物的精氨酸激酶也有较高的同源性,均高于90%;将克隆得到的锯缘青蟹精氨酸激酶基因与pGEX-4T-3载体连接,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导得到分子质量为65 ku的融合表达蛋白(GST-AK),经兔抗锯缘青蟹精氨酸激酶多克隆抗体的免疫印迹分析证实,GST-AK具有抗原性.; 阮韦伟沈苑曹敏杰苏文金蔡秋凤刘光明; 关键词：锯缘青蟹精氨酸激酶 CDNA克隆

虾类过敏原的识别、纯化和检测技术研究被引量：15: 2008年; 虾类是人类优质的食用蛋白资源之一,也是联合国粮农组织公布的八大类过敏食物之一。虾类过敏反应严重影响着过敏人群的身体健康和生活质量,为此开展虾类过敏原的识别、纯化和检测技术研究非常必要。通过问卷调查初步了解食物过敏现状,获取自诉虾类过敏患者血清和正常人阴性对照血清,采用特异性IgE检测试剂盒筛选虾类过敏血清。提取南美白对虾蛋白,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹识别虾类过敏蛋白,并对患者识别率最高的虾类的主要过敏原进行分离纯化。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹和酶联免疫吸附测定等方法对纯化虾蛋白进行检测分析。患者识别的南美白对虾致敏原的分子质量依次约为200、175、116、85和36kDa,通过硫酸铵盐析及等电点沉淀等方法可以得到电泳纯的虾主要过敏蛋白。免疫印迹结果证实纯化的虾蛋白是具有过敏原性的原肌球蛋白,在此基础上,建立了虾原肌球蛋白的酶联免疫吸附测定方法。; 刘光明沈苑曹敏杰梁银龙杨景成苏文金; 关键词：南美白对虾纯化免疫检测

虾蟹类食物过敏者血清的筛选与鉴定被引量：1: 2010年; 近年来食物过敏性疾病呈上升趋势,虾蟹等甲壳类动物是联合国粮农组织公布的八大食物过敏原之一,虾蟹类过敏严重影响过敏人群的身体健康和生活质量。通过纯化虾和蟹过敏蛋白对集美大学新生血清进行ELISA筛选分析,以期获得对虾和蟹过敏的阳性血清。结果通过问卷调查收集到了397份自诉虾蟹过敏者血清,用硫酸铵盐析、等电点沉淀和沸水浴加热的方法从南美白对虾中纯化到了电泳纯的原肌球蛋白,并用兔抗锯缘青蟹原肌球蛋白的Western-blot进行了检测确认;用硫酸铵盐析和High-Q柱层析方法从锯缘青蟹中纯化到了电泳纯的精氨酸激酶,并用鼠抗白虾精氨酸激酶的Western-blot进行了检测确认;然后利用2种纯化蛋白的ELISA分析397份自诉虾蟹过敏者血清,从中筛选获得28份对原肌球蛋白呈阳性反应的血清,21份对精氨酸激酶呈阳性反应的血清,最后采用Dot-blot实验对筛选阳性反应的血清进行了确认。; 沈苑饶世涛曹敏杰李兵蔡秋凤刘光明; 关键词：原肌球蛋白锯缘青蟹精氨酸激酶免疫检测

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沈苑