殷学梅
- 作品数：17 被引量：74H指数：3
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省科技支撑计划项目国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- FBXL5基因在不同鸡品种中的组织表达谱及表达规律研究
- 课题组前期采用简化基因组测序的方法,发现了与生长性状显著相关的SNPs位点,并定位到包括FBXL5在内的9个基因。本试验旨在研究与生长性状显著相关并参与生长发育调控的可能基因,因此选择FBXL5基因作为候选基因,深入研究...
- 袁曼曼吴鹏飞殷学梅李婷婷王金玉
- 关键词：京海黄鸡基因表达谱
- 文献传递
- FUT1和FUT2基因在大白猪、梅山猪和苏太猪E.coli F18抗性型群体中组织表达谱及差异表达分析
- 引言产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic,Escherichia coli是初生和断奶仔猪腹泻病最常见和最重要的病原菌,研究发现,FUT1和FUT2基因是E.coli F18受体形成的关键基因,因此,本试验选...
- 夏日炜殷学梅戴超辉包文斌吴圣龙
- 胎次对杜洛克、长白和大白母猪繁殖性能的影响被引量：41
- 2014年
- 为了研究胎次对杜洛克、长白和大白母猪繁殖性能的影响,根据江苏省某国家级生猪核心育种场2009—2011年出生的繁殖母猪资料,分别选取128头杜洛克、681头长白和610头大白母猪共7280窝生产数据,统计分析不同胎次母猪的总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生窝重及校正21日龄窝重。此外,依据胎次将母猪分为3个繁殖阶段（1-2胎、3-6胎及7-8胎）来探究品种差异对母猪繁殖性能的影响。结果表明：胎次对母猪繁殖性能有显著影响（P〈0.05）,母猪1-4胎的总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数及初生窝重随胎次呈增加趋势,第4胎达到高峰,且显著高于其他胎次（P〈0.05）;3-6胎繁殖性能较好,7胎之后出现迅速下降趋势;除在第4胎略有下降外,其他胎次的校正21日龄窝重随胎次递增。品种对母猪繁殖性能的影响显著（P〈0.05）,长白和大白母猪的繁殖性能均极显著高于杜洛克母猪（P〈0.01）;长白母猪的产活仔数和校正21日龄窝重显著高于大白母猪（P〈0.05）,2个品种其他繁殖性能无显著差异（P〉0.05）。综上所述,杜洛克、长白和大白母猪的最佳繁殖胎次为3-6胎,长白猪的繁殖性能总体上优于大白猪,就本试验所在的育种场而言,长白猪可能更适合作为二元母猪生产中的母本。
- 朱世平孙丽殷学梅侯小亮包文斌吴圣龙
- 关键词：胎次母猪繁殖性能
- 猪杀菌/通透性增加蛋白基因siRNA载体构建及干扰效果评价被引量：3
- 2015年
- 本研究旨在构建并筛选猪(Sus scrofa)BPI基因的高效siRNA干扰载体,为在细胞水平上研究猪BPI基因的功能和作用机制提供基础。参照猪BPI基因(GenBank登录号:EF436278)全长编码区序列,设计其特异性发夹siRNA干扰片段,并将其克隆插入pcDNA 6.2-GW/EmGFPmiR干扰载体中,构建猪BPI基因4个干扰siRNA表达载体RB1、RB2、RB3和RB4,1个阴性对照NC,并通过PCR和测序进行验证,构建成功后转染猪小肠上皮细胞IPEC-J2并检测其干扰效率。结果发现,所构建的4个特异性siRNA载体均可显著降低猪BPI基因mRNA表达(P<0.05),其中RB4载体干扰效果最好,其干扰效率达到69%。本研究成功筛选可靶向干扰猪BPI基因的高效siRNA,为今后在细胞水平进一步研究BPI基因对猪肠道革兰阴性菌感染抗性的作用及其机制奠定了试验基础。
- 吴正常殷学梅夏日炜孙寿永朱国强吴圣龙包文斌
- 关键词：RNA干扰
- LPS诱导条件下猪小肠上皮细胞TLR4及其信号通路基因表达变化分析被引量：16
- 2015年
- 本试验通过0.1和1μg·mL-1浓度的LPS诱导处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),分别在2、4、6h时利用实时荧光定量PCR方法检测TLR4及其信号通路相关基因(CD14、MyD88、TNF-α、IL-1β和IFN-α)mRNA水平相对表达量,初步探讨猪小肠上皮细胞受到产肠毒素大肠杆菌侵扰发生炎症反应的相关分子反应机理。结果发现,两种浓度的LPS均使得所检测的TLR4及其信号通路相关基因表达量上调,诱导后4~6h的表达量急速上升,且高浓度的LPS诱导处理后各基因表达量上调倍数明显高于低浓度LPS诱导时各基因表达量上调倍数,高浓度的LPS对机体肠道的刺激引起了更为强烈的免疫反应,使正常机体更快地产生炎症反应。由此推测,大肠杆菌侵染猪肠道后将释放LPS,TLR4作为LPS的受体,受LPS诱导其表达量上调,进而引起TLR4信号途径的信号传递,传递过程中由于MyD88的依赖机制,MyD88表达量上调相对稳定,再经过级联免疫放大效应,大量的促炎细胞因子释放,导致炎症及腹泻水肿病的产生。
- 孙丽夏日炜殷学梅喻礼怀朱国强吴圣龙包文斌
- 关键词：信号通路细胞因子
- 猪miR-192/-215的组织表达谱及其关键靶基因分析被引量：5
- 2015年
- 【目的】在前期通过Illumina Solexa高通量测序技术并结合荧光定量验证筛选出断奶仔猪E.coliF18菌株感染下表达量极显著上调的micro RNAs—miR-192和miR-215的基础上,为了解miR-192和miR-215的组织表达情况,进一步筛选确定miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染的关键靶基因,为探讨miR-192和miR-215调控断奶仔猪E.coli F18感染的分子调控机制奠定基础。【方法】试验采用Real-time PCR方法检测miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪各个组织中的分布情况,同时利用MEGA 5.0分析了其保守性,Target Scan预测miR-192和miR-215的靶基因,并对靶基因分别进行Gene Ontology和Pathway通路的富集分析,进一步利用DAVID对靶基因蛋白进行功能分类,最后将预测的靶基因与课题组前期筛选出的断奶仔猪E.coli F18感染抗性相关的调控基因取交集。【结果】miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪十二指肠和空肠中均高度表达,二者成熟序列在脊椎动物中高度保守。miR-192和miR-215对应的靶基因相同,具有156个靶基因,只在轴突导向通路(axon guidance pathway)显著富集(P-value<0.05)以及25个GO功能中显著富集(P-value<0.05)。靶基因蛋白按功能分为12类,其中信号转导功能的磷蛋白(phosphoprotein)和DNA结合蛋白(dna-binding)占主要部分。靶基因与前期筛选的E.coli F18感染抗性相关的调控基因(GEO登录号:GSE26854)取交集,发现DLG5、ALCAM、FRMD4B、MIPOL1和ZFHX3等5个基因为miR-192和miR-215的重要靶基因,其中DLG5为维持小肠上皮细胞结构完整性的重要因子。【结论】miR-192与miR-215是参与维持断奶仔猪肠道正常功能与抗F18大肠杆菌感染的重要因子,DLG5可能是miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染中关键的靶基因,今后需要进一步验证其能否作为梅山猪抗F18大肠杆菌的有效遗传标记。
- 吴正常殷学梅孙丽夏日炜霍永久吴圣龙包文斌
- 关键词：组织表达谱靶基因E.COLI
- 猪LTβR基因克隆、结构功能预测、组织表达谱分析及真核表达载体构建
- 2015年
- 为了进一步探究猪LTβR基因的生物学功能,本研究以猪淋巴组织cDNA为模板扩增LTβR基因CDS区,进一步利用生物信息学对猪LTβR蛋白结构与功能以及参与的GO和Pathway通路进行分析,利用Real-time PCR检测LTβR基因在大白猪不同组织中的表达水平,同时将LTβR基因扩增产物克隆至真核表达载体pEGFPC1中,并分别转染猪HEK293和IPEC-J2小肠上皮细胞系,通过显微镜观察其表达情况。结果表明,克隆获得猪LTβR基因CDS区全长为1 209bp,编码402个氨基酸,发现LTβR为脂溶亲水性的不稳定蛋白,存在1个跨膜结构(205~227aa),不存在信号肽,亚细胞定位表明LTβR为非分泌型蛋白。LTβR蛋白具有2个糖基化位点,18个潜在的磷酸化位点,其中包括PKC、CKI、CDC2、GSK3、CDK5、INSR等10种保守的特异性蛋白质激酶的结合位点。该蛋白保守区域为2个TNFR superfamily,分别位于32~125和128~192位氨基酸,并发现C422T>A141V突变位于该区域内。KEGG和GO分析发现,LTβR基因共参与12项GO功能分类,同时还参与NF-kappa B信号通路、IgA合成的肠道免疫网络等5项调控通路。定量检测发现,LTβR基因在大白猪肺中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01),在肾和脾等免疫器官,十二指肠和空肠等肠道组织中也均有较高的表达水平。细胞水平转染试验及显微镜观察发现其在猪HEK293和IPEC-J2两种细胞中均表达。本研究为猪LTβR基因及其介导的信号通路的功能分析提供了材料和依据,今后有必要在细胞水平上进一步验证分析猪LTβR基因及其介导的信号通路在猪抵抗细菌感染过程中发挥的重要作用,同时将C422T突变作为猪抗病育种的一个潜在遗传标记进行系统分析。
- 吴正常戴超辉殷学梅孙寿永包文斌包文斌
- 关键词：克隆真核表达载体
- 猪FUT1和FUT2基因在大白猪、梅山猪和苏太猪E.coli F18抗性型群体中组织表达谱及差异表达分析
- 引言产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic,Escherichia coli)是初生和断奶仔猪腹泻病最常见和最重要的病原菌,研究发现,FUT1和FUT2基因是E.coliF18受体形成的关键基因,因此,本试验选...
- 夏日炜殷学梅戴超辉包文斌吴圣龙
- 文献传递
- 京海黄鸡FSHR基因组织表达谱及表达规律的研究被引量：3
- 2019年
- 为探讨促卵泡素受体(FSHR)基因mRNA在不同组织中的相对表达量和表达规律,探究其调控机制,根据原鸡FSHR基因的编码序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用qRT-PCR技术检测,研究组织表达谱及其在性腺轴中的表达规律。结果表明:FSHR基因在卵巢和睾丸中高表达,极显著高于其他组织。FSHR基因的表达呈不断变化的趋势,在母鸡卵巢中出壳时最高,持续下降至16周龄时最低,20周龄稍有回升;FSHR表达量在公鸡睾丸中也于出壳时最高,持续下降至16周龄时表达量最低。在公母鸡的垂体组织中,FSHR基因表达呈小幅上升,母鸡较公鸡上升幅度稍大,卵巢中的表达量略高于睾丸。这一研究为进一步研究FSHR基因的作用机制和表达调控提供了素材。
- 陈兰王亚男张涛殷学梅娄秋宏陈福祥吴鹏飞张跟喜谢恺舟王金玉
- 关键词：京海黄鸡FSHR基因表达谱
- 京海黄鸡MyoD基因外显子1多态性对生长和繁殖性状的遗传效应被引量：3
- 2019年
- 研究运用PCR-SSCP技术对京海黄鸡MyoD基因外显子1的多态性进行检测,进而与生长性状和繁殖性状进行关联分析。结果显示:外显子1的136 bp处存在1个突变位点(C136T),该突变位点为首次发现;该突变位点对开产日龄、300日龄产蛋数等6个繁殖性状指标都没有产生显著影响;AA基因型8周龄体重显著高于AB基因型个体的8周龄体重(P<0.05),同时AA基因型也是优势基因型,AA基因型的频率为0.842;除8周龄体重之外,该位点对其余周龄体重没有显著影响,但纯合型个体体重指标高于杂合型个体。结果表明,MyoD基因外显子1的突变位点对京海黄鸡的生长性状具有一定的影响。
- 何明亮张欣超陈福祥吴鹏飞张闪闪陈兰殷学梅张涛张跟喜
- 关键词：MYODPCR-SSCP多态性京海黄鸡生长性状繁殖性状
