包文斌 作品数:225 被引量:1,016 H指数:16 供职机构: 扬州大学动物科学与技术学院 更多>> 发文基金: 江苏省科技支撑计划项目 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
F18大肠杆菌黏附素受体结合域鉴定新方法 被引量:4 2010年 运用DNA重组技术将F18ab和F18ac大肠杆菌黏附素fedF亚单位内的第60~109位氨基酸残基区段(fedF1)和fedF全基因克隆入V型分泌系统MisL的载客结构域上,经DNA测序确证其正确阅读框后,含重组菌质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1经厌氧诱导后,与断奶仔猪小肠上皮细胞进行体外黏附试验。结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述重组菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。上述重组菌均能与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子高免血清发生玻板凝集反应。而FedF突变体FedF(M)的重组质粒菌则失去上述凝集和黏附特性。证明F18大肠杆菌黏附素fedF基因及其基因片段fedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,F18ab和F18ac黏附素FedF直接介导F18大肠杆菌与易感仔猪小肠上皮细胞表面大分子受体黏附结合,fedF1为黏附素FedF的受体主要结合域,其His88、His99是FedF黏附素受体结合域的重要氨基酸残基。 葛兆宏 陆广富 朱军 郁磊 羊扬 原志伟 朱吕昌 吴圣龙 包文斌 朱国强关键词:F18大肠杆菌 生态草鸡不同饲养方式的生长性能比较 2008年 随着经济的不断发展和人们生活水平的普遍提高,生态环境和食品安全倍受人们关注和重视,大力发展无公害、绿色、有机食品的生产,促进畜牧业向优质、高产、高效、安全、生态方向发展成为未来的趋势。在家禽生产中,生态草鸡以其优美的外型、独特的风味、丰富的营养、无药残、无污染等优点深受消费者青睐,成为行业新的增长点。但是生态草鸡的发展也存在诸多问题:目前还没有专门的配套系以及饲养管理体系,生长速度慢,饲料消耗多等。 侯庆文 胡锦农 顾健 吴信生 赵文明 包文斌 常国斌关键词:性能比较 饲养方式 草鸡 饲养管理体系 家禽生产 RNAi猪MyD88基因及其对TLR4通路相关基因表达和促炎细胞因子水平的影响 引言髓性分化因子88(MyD88)是TLRs/IL-1R信号通路中重要的接头蛋白,在传递炎症信号和增强炎症强度,引发肠道炎症介质的释放中具有重要的作用。本试验通过构建靶向猪MyD88基因shRNA表达载体,筛选高效的干扰... 孙丽 戴超辉 甘丽娜 吴圣龙 包文斌文献传递 野猪和17个家猪群体SLA-DRB基因外显子2的多态性分析 被引量:4 2009年 采用PCR-RFLP方法对野猪和国内外17个家猪品种SLA-DRB基因第2外显子的多态性进行分析,进一步分析SLA-DRB基因与疾病抗性的关系。结果表明:经限制性内切酶RsaⅠ酶切后,共检测到4个等位基因和10种基因型。在野猪中仅存在BB基因型和B等位基因,而在家猪群体中出现了野猪群体中所没有的9种基因型和3个等位基因。五指山猪、临高猪、荣昌猪和藏猪的多态性较为丰富,且具有全部4个等位基因。A等位基因在大多数家猪群体中为优势等位基因,B等位基因在梅山猪、五指山猪、藏猪、荣昌猪中为优势等位基因;BB基因型仅在五指山猪、临高猪、藏猪、荣昌猪和太湖猪群体中分布,地方猪品种中梅山猪BB基因型和B等位基因的频率最高。野猪及17个家猪群体间SLA-DRB基因第2外显子遗传多态性可能是由生态环境差异及自然和人工选择所致,这些遗传差异性可能与抗病力有关。 包文斌 叶兰 鞠慧萍 朱国强 黄小国 吴圣龙关键词:野猪 地方猪品种 CRISPR/Cas9介导TLR5敲除猪肺泡巨噬细胞系建立及对革兰阴性菌黏附能力的影响 被引量:2 2021年 Toll样受体5 (TLR5)是Toll-like受体家族中的重要成员,在革兰阴性菌引起的炎症反应中发挥着重要的调控作用。通过CRISPR/Cas9基因敲除技术对猪肺泡巨噬细胞(PAMS)的TLR5基因进行敲除,然后经菌落计数,检测TLR5基因敲除后对大肠埃希菌F18ab和F18ac以及沙门菌黏附能力的影响。结果表明:设计的2条sgRNAs成功插入CRISPR/Cas9载体中,序列正确,转染猪肺泡巨噬细胞后均能稳定表达,且PCR测序峰图出现套峰,表明敲除载体具有切割活性。利用有限稀释法,最终获得1株缺失15个碱基的单克隆细胞系TLR5-sg1。对TLR5敲除细胞进行qPCR和Western blot验证,结果显示TLR5基因的转录水平极显著下调,其蛋白质水平也明显降低。细菌黏附试验结果显示,TLR5敲除细胞中黏附的大肠埃希菌F18ab、F18ac和沙门菌(ATCC13312)的数量均极显著低于对照组。这一研究成功建立了猪TLR5基因敲除的3D4/21细胞系,且TLR5基因的敲除会降低大肠埃希菌和沙门菌对3D4/21细胞的黏附能力,为进一步探究TLR5基因的生物学功能建立了细胞模型,为深入探讨TLR5基因在炎症反应中的免疫调控作用提供了试验素材。 许超 郜重丞 毕祯彬 吴圣龙 包文斌关键词:细菌黏附 革兰阴性菌 杜洛克FUT1基因多态性及其与产仔性能的关联分析 被引量:9 2009年 采用PCR-RFLP方法对杜洛克FUT1基因多态性进行分析。结果发现:杜洛克FUT1基因开放阅读框307位点经Hin6Ⅰ酶切后,检测到AA、AG和GG3种基因型,AA基因型的频率为0.157,A基因的频率为0.353。分析这3种基因型与杜洛克产仔性能间的关联性。结果表明:抗性纯合子AA基因型的个体1~5胎每个胎次的产仔数均值均高于AG和GG基因型,且第1胎和第4胎的产仔数均值显著高于AG和GG基因型(P<0.05),AA基因型对产仔性能而言是有益基因型。 包文斌 吴圣龙 曹晶晶 黄小国 陈国宏关键词:FUT1基因 产仔性能 猪α1岩藻糖转移酶基因点突变的PCR-SSCP检测 被引量:3 2006年 猪α1岩藻糖转移酶基因(FUT 1)位于猪第6号染色体上,是猪肠毒素大肠杆菌F 18受体(ETEC F 18R)理想的候选基因。采用PCR-SSCP法共检测外来猪种、国内地方猪种和培育猪种3个类型9个猪种共计255个个体FUT 1基因M 857位点的多态性,所检测的3个外来猪种均存在GG和AG两种基因型,而国内地方猪种中除临高猪外均表现为极端的单态分布,只存在GG基因型。采用PCR-SSCP方法对FUT 1基因点突变进行检测,具有试验成本低、操作简便和灵敏度高等优点,可望在育种实践中得到更广泛的应用。 吴圣龙 鞠慧萍 包文斌 陈国宏 朱国强 黄雪根 华金弟 李碧春 原志伟关键词:点突变 苏太猪SLA-DQA基因多态性及其与生产性能的关联分析 被引量:9 2007年 本研究采用PCR-RFLP方法对苏太猪SLA-DQA基因多态性进行分析,结果表明,苏太猪SLA-DQA基因开放阅读框第722个碱基存在1个A→G突变,从而导致了氨基酸Gly到Arg的转变,并产生了TaqⅠ酶切位点。当扩增产物被限制性内切酶TaqⅠ消化后,检测到AA和AG基因型。分析这2种基因型与苏太猪生产性能间的相关性,结果表明:SLA-DQA基因与生产性能不存在相关性。 吴圣龙 鞠慧萍 包文斌 李碧春 陈国宏 杨建生 黄雪根 华金弟关键词:SLA-DQA基因 大白猪和长白猪妊娠周期内背膘厚对繁殖性能的影响 被引量:25 2014年 本试验使用B超仪分别对大白猪、长白猪一个妊娠周期内不同时期的背膘厚进行跟踪测定,分析不同时期的背膘厚对繁殖性能的影响,以期在不同妊娠时期中确定有利于繁殖性能的背膘厚范围,为指导母猪妊娠期的饲养管理提供依据。结果表明:在大白猪妊娠60日龄之前高背膘厚(>18.41 mm)对所测定的繁殖性能具有有利作用,但在妊娠60日龄之后则要控制背膘厚,使背膘厚处在中等水平(13.26 mm 赵乔辉 朱世平 刘颖 候小亮 吴圣龙 包文斌关键词:背膘厚 妊娠 繁殖性能 14个鸡品种和红色原鸡TLR4基因外显子2多态性分析 <正>引言Toll-like受体(Toll-like receptors,TLRs)在机体激活固有免疫和诱导适应性免疫的防御机制,特别是在先天性固有免疫中起着重要作用,在人类和多种动物病原菌的PAMP(病原相关分子模式)... 刘艳 包文斌 常国斌 陈国宏关键词:多态性 文献传递