杨红彦
- 作品数：10 被引量：24H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一株新轮状病毒引起河北省石家庄市成人腹泻爆发流行被引量：5
- 1998年
- 1997年 4月 10～ 2 8日 ,在河北省石家庄市某高校发生一起成人急性腹泻的爆发流行 ,累积10 0 0多名大学生发病。经不连续聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳检查腹泻病人粪便标本核酸图谱一致呈4 - 2 - 1- 1- 1- 1- 1排列的新轮状病毒 (新RV) 14份 ,阳性率占 4 7% (共检标本 30份 ) ,且未见其它带型的轮状病毒。提示该核酸图谱的轮状病毒是此次成人急性腹泻爆发流行的主要病原。用已知ADRV第 5及第 9基因片段末端引物进行逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR) ,结果阳性对照ADRV的扩增结果都为阳性 ,而新RV的扩增结果都为阴性。这些结果表明该新RV不属于B组轮状病毒 ,是与成人腹泻轮状病毒 (ADRV)完全不同的新RV。非ADRV的轮状病毒引起成人腹泻爆发流行在河北省尚属首次。
- 杨红彦陈淑芬纪绍忠孟宗达康志刚张忠齐顺祥
- 关键词：成人腹泻RT-PCR
- 丙型肝炎病毒分子生物学研究进展
- 1994年
- 丙型肝炎病毒分子生物学研究进展中国预防医学科学院流行病学与微生物学研究所（１０２２０６）杨红彦综述范明远审１９８９年美国Ｃｈｉｒｏｎ公司Ｈｏｕｇｈｔｏｎ研究小组用重组ＣＤＮＡ的方法首次发现引起非甲非乙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的基因组［１］，进而克隆并生产...
- 杨红彦范明远
- 关键词：丙型肝炎病毒分子生物学
- 全文增补中
- B 组轮状病毒ADRV 与RDRV 主要基因的克隆及其相关性的初步研究被引量：4
- 1999年
- 目的 对２ 株 Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 图型相似的 Ｂ 组轮状病毒———成人腹泻轮状病毒（ａｄｕｌｔ ｄｉａｒｒｈｅａｒｏｔａｖｉｒｕｓ， Ａ Ｄ Ｒ Ｖ） 和大白鼠乳鼠腹泻轮状病毒（ｒａｔ ｄｉａｒｒｈｅａ ｒｏｔａｖｉｒｕｓ， Ｒ Ｄ Ｒ Ｖ） 主要基因的相关性进行研究。方法 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ 第４ 、５ 、９ 三个基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 全长拷贝，并获其ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆。用 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ第９ 基因末端引物 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 成功扩增了 Ｒ Ｄ Ｒ Ｖｄｓ Ｒ Ｎ Ａ，获得相对分子质量与 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ 第９ 基因 Ｐ Ｃ Ｒ产物８１４ｂｐ 相等条带（ 暂称该 Ｒ Ｎ Ａ 模板为 Ｒ Ｄ Ｒ Ｖ 第９ 片段） 及其克隆。经 Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ 标记制备 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ 第４ 、５ 、９ 及 Ｒ Ｄ Ｒ Ｖ 第９ 基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针。用核酸点杂交、 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交进行同源性比较。结果 获得 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ 第４ 、５ 、９ 三个基因及 Ｒ Ｄ Ｒ Ｖ 第９ 基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆；用 Ａ Ｄ Ｒ Ｖ 第４ 、５ 、９ 及 Ｒ Ｄ Ｒ Ｖ第９ 基因４ 个ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针进行的点杂交和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交结果显示，在两病毒 Ｒ Ｎ Ａ 相应点和相应片段的位置上杂交信号都为阳性，阴性对照都为阴性。
- 杨红彦纪绍忠康志刚宋俊其崔晓英
- 关键词：病毒基因
- 新的成人腹泻轮状病毒J19株NSP4和NSP5基因克隆和序列分析
- 2006年
- 目的克隆新的成人腹泻轮状病毒J19株NSP4和NSP5基因,并分析其基因序列。方法利用一种改进的非依赖核酸序列的单引物扩增方法扩增J19株NSP4和NSP5基因,克隆到 pMD18-T载体中并进行测序。在此基础上,将J19株NSP4和NSP5的蛋白序列与其他轮状病毒蛋白序列进行比较分析和种系进化分析。结果J19株NSP4和NSP5基因为基因10和11,全长为739 bp 和649 bp,它们分别编码213个和176个氨基酸。与J19株NSP4和NSP5蛋白序列一致性较高的分别是B组成人腹泻轮状病毒Bang373株(20．3％)和B组猪轮状病毒db101株(29．5％)。对J19株的 NSP4和NSP5的遗传进化分析表明,J19株在进化树上的位置都靠近A、B和C组轮状病毒分支的根部,而且它比较偏向B组轮状病毒的分支。结论J19株的NSP4和NSP5与其他轮状病毒的相应蛋白序列存在显著差异。J19株NSP4和NSP5的蛋白序列比较和遗传进化分析表明新的成人腹泻轮状病毒与成人腹泻轮状病毒可能有共同起源;但是新的成人腹泻轮状病毒与成人腹泻轮状病毒存在显著差异。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：基因克隆
- 引起成人腹泻的新轮状病毒在原代人胚肾细胞上的培养和传代被引量：15
- 2002年
- 目的 探讨用细胞培养系统在体外培养新轮状病毒 (RV)。方法 含新RV的病人粪便标本经高浓度胰蛋白酶 (10 0 μg/ml) 37℃作用 1h ,接种于原代人胚肾 (PHEK)细胞 ,37℃吸附 1h后 ,补加无血清含胰蛋白酶 (10 0 μg/ml)的DMEM ,37℃转鼓培养 3d ,收获细胞培养液 ,冻融 1次 ,作为下一代培养的接种物 ,培养传代。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫荧光 (IF)、电镜 (EM)、免疫电镜 (IEM)等方法对细胞培养液进行病毒核酸、抗原及形态检查。结果 从 10份粪便标本中培养分离到 1株病毒 ,定名为J19。该病毒在PHEK细胞上稳定培养传代 (2 8代 ) ,其病毒核酸 (dsRNA)电泳图型与初始用于接种细胞的粪便标本中的dsRNA电泳图型完全一致 ,而与A、B、C组RVdsRNA电泳图型明显不同。J19株感染的细胞与病人恢复期血清呈IF阳性反应 ,与成人腹泻轮状病毒 (ADRV)腹泻病人恢复期血清、兔抗A组RV和兔抗ADRV血清均为IF阴性 ;EM和IEM在该病毒的细胞培养液中观察到 ,在形态上与初始接种物中病毒一样的轮状病毒颗粒 ,而且可被新RV腹泻病人恢复期血清凝集。结论 成功地从含新RV的成人腹泻粪便标本中分离培养出 1株轮状病毒———J19,并能在细胞稳定传代。J19株不属于A、B、C组RV ,而是一种新RV。关于新RV在细胞上培养传代 ,本文是第一次报?
- 纪绍忠毕烨杨红彦杨凤蓉宋俊其陶小霞崔晓英
- 关键词：轮状病毒属体外培养
- 成人腹泻轮状病毒J19株依赖RNA的RNA聚合酶基因序列分析被引量：1
- 2006年
- 目的进一步了解新的成人腹泻轮状病毒J19株依赖RNA的RNA聚合酶基因特征。方法利用一种改良的非依赖核酸序列的单引物扩增方法扩增新的成人腹泻轮状病毒J19株的VP1基因,克隆至pMD18-T中并进行测序。利用DNAStar和PHYLIP软件包进行序列之间的比较分析并绘制系统发生树。结果J19株的VP1基因为基因1,全长3538个核苷酸,编码1167个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明J19株的VP1蛋白序列对B组轮状病毒IDIR株的一致性为55．7％,对A组轮状病毒SA11株和C组轮状病毒Bristol株的一致性分别为20．4％、19．2％。对J19株的VP1蛋白序列的遗传进化分析表明,J19株在系统发生树上的位置是靠近外群蛋白并靠近A、B和C组轮状病毒分支的根部,而且它比较偏向于B组轮状病毒的分支。结论J19株的VP1蛋白序列与其他轮状病毒的VP1蛋白序列存在显著差异。J19株可能是一个与B组轮状病毒的起源和进化密切相关的毒株之一。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：基因克隆
- 新成人腹泻轮状病毒J19株NSP1、NSP2和NSP3基因序列分析
- 2006年
- 目的克隆新成人腹泻轮状病毒J19株三个非结构蛋白NSP1、NSP2和NSP3基因,并分析其基因序列。方法利用一种改进的非依赖核酸序列的单引物扩增方法扩增J19株三个基因,克隆到pMD18-T载体中并进行测序。在此基础上,将J19株的NSP1、NSP2和NSP3的蛋白序列与其他轮状病毒蛋白序列进行比较分析和种系进化分析。结果J19株的NSP1、NSP2和NSP3基因为基因5、7和8,它们的全长1307个、1004个和932个核苷酸,编码395个、297个和262个氨基酸。与J19株的NSP1、NSP2和NSP3蛋白序列一致性较高的分别是B组轮状病毒KB63株(26.3%)、WH1株(46.6%)和IDIR株(29.6%)。对J19株的NSP1、NSP2和NSP3的遗传进化分析表明,J19株在进化树上的位置都靠近A、B和C组轮状病毒分支的根部,而且它比较偏向于B组轮状病毒的分支。结论J19株的NSP1、NSP2和NSP3与其他轮状病毒的相应蛋白序列存在显著差异。J19株NSP1、NSP2、NSP3的蛋白序列比较和遗传进化分析表明新成人腹泻轮状病毒与成人腹泻轮状病毒可能有共同起源;但是新成人腹泻轮状病毒与成人腹泻轮状病毒存在显著差异。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：轮状病毒基因克隆分子
- 新成人腹泻轮状病毒J19株的全基因组克隆和VP4、VP6和VP7基因序列分析被引量：4
- 2006年
- 为了进一步了解新成人腹泻轮状病毒J19株的基因和蛋白特征,利用一种改良的非依赖核酸序列的单引物扩增方法扩增J19株的11个基因,克隆到pMD18-T载体中并进行测序。在此基础上,将主要抗原蛋白VP4、VP6和VP7的蛋白序列与其它轮状病毒的相关蛋白序列进行比较分析并对VP6蛋白序列做遗传进化分析。结果获得J19株11个基因的全长基因序列。基因序列分析表明J19株的第3、6和第9基因分别长2 512bp、1 287bp和820bp,它们分别预测编码抗原蛋白VP4(823aa)、VP6(396aa)和VP7(258aa)。组成J19株的VP4、VP6和VP7蛋白序列对B组轮状病毒的CAL株、IDIR株以及ADRV株的相关蛋白序列的一致性分别是27.6%、38.5%和22.3%。对分组抗原蛋白VP6的遗传进化分析表明,J19株在进化树上的位置靠近外群蛋白分支以及A、B和C组轮状病毒分支的根部,而且它比较偏向于B组轮状病毒的分支。J19株的VP4、VP6和VP7蛋白序列与其它轮状病毒的相应蛋白序列存在显著差异。VP6蛋白序列的遗传进化分析表明J19株可能是一个新组轮状病毒的代表性毒株;同时,它也可能是一个与B组轮状病毒的起源和进化密切相关的毒株之一。关于新成人腹泻轮状病毒J19株11个基因的克隆及VP4、VP6和VP7基因的序列分析,这是第一次报道。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：基因克隆
- 一种改良方法克隆新的成人腹泻轮状病毒J19株的大片段基因
- 2006年
- 目的扩增、克隆新的成人腹泻轮状病毒J19株的大片段基因。方法以新成人腹泻轮状病毒J19株的病毒核酸为材料,利用非依赖核酸序列的单引物扩增方法,扩增新的成人腹泻轮状病毒J19株的第5-11基因;根据第5-11基因序列设计7对抑制性引物,通过在PCR扩增体系中添加小片段基因的抑制性引物来提高大片段基因的PCR产量。结果当在PCR反应体系中添加2对抑制性引物时,大于2kd的大片段基因的PCR产量得到显著提高。将扩增的基因片段克隆至pMD18- T后进行测序,最后得到J19株第2、3、4基因的全长eDNA克隆。结论这种改良的非依赖核酸序列的单引物扩增方法可以用于对轮状病毒大片段基因的扩增和克隆。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：基因克隆
- 新成人腹泻轮状病毒J19株VP2、VP3的编码基因序列分析被引量：1
- 2006年
- 利用一种改良的非依赖核酸序列的单引物扩增方法,从新成人腹泻轮状病毒J19株的核酸中扩增基因,克隆至pMD18-T中并进行测序和基因序列分析。J19株的VP2、VP3的编码基因为基因2、4,分别长2 969bp、2 204bp,它们分别编码973个氨基酸和719个氨基酸。J19株的VP2蛋白序列对B组人轮状病毒IDIR株的一致性为47.2%;J19株的VP3蛋白序列对C组人轮状病毒Cowden株一致性为25.1%。对J19株VP2的遗传进化分析表明,J19株在进化树上的位置靠近外群蛋白以及A、B和C组轮状病毒分枝的根部,并且它比较偏向于B组轮状病毒的分枝。这与VP6的遗传进化分析结果相一致。根据上述结果推测J19株可能是一个与B组轮状病毒的起源和进化密切相关的毒株之一;同时,这表明VP2在研究轮状病毒的遗传进化上具有重要价值。关于新成人腹泻轮状病毒J19株VP2、VP3的编码基因的序列分析,这是首次报道。
- 蒋盛军纪绍忠唐青杨红彦崔晓英毕烨阚飙高守一
- 关键词：基因克隆
