杨丽萍
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内质网应激反应蛋白在光照损伤诱导视网膜变性中的作用被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨在光照损伤诱导视网膜感光细胞变性凋亡中,内质网应激反应蛋白的表达变化。方法：取4 -5周龄的Balb/cJ雄性小鼠189只,随机分为7组（每组n=27）,其中1组（27只）作为对照组,6组（162只）作为实验组。将实验组Balb/cJ小鼠暗适应48h后暴露于光照损伤（波长490 -580nm,光照度3500lx）24h。分别于暗恢复后0h,3h,6h,24h,3d以及7d处死小鼠,摘取眼球。用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测感光细胞的凋亡;Western blot检验视网膜中内质网应激反应蛋白（GRP78/BiP,procaspase-12和cleaved caspase-12,p-PERK,p-eIF2α）的表达变化;免疫荧光染色共聚焦显微镜观测内质网应激反应蛋白在视网膜中的表达。结果：（1）光照损伤后视网膜外核层中出现TUNEL染色阳性细胞,并且在暗恢复24h后阳性染色细胞数达到高峰;（2）伴随光照损伤诱导的视网膜变性过程,Western blot检测结果显示内质网应激反应蛋白的表达上调,与正常对照组之间的差异具有统计学意义（P〈0.01）;（3）免疫荧光染色结果显示内质网应激反应蛋白主要表达于视网膜感光细胞的内节和感光细胞核中。结论：在光照损伤诱导的视网膜感光细胞变性凋亡中,内质网应激反应蛋白的激活对于感光细胞的变性凋亡可能具有重要作用。应用内质网应激反应调节剂可能对此类疾病起到有效治疗作用。
- 吴乐萌郭秀娟曹安民杨丽萍
- 关键词：视网膜变性内质网细胞凋亡光刺激
- 白细胞介素-1受体拮抗剂对遗传性视网膜变性视细胞凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 背景遗传性视网膜变性是主要致盲性眼病之一，包括一系列以慢性进行性视网膜变性为病理特征的异常；白细胞介素-1（IL-1）参与变性与凋亡过程的调节，而白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）对细胞凋亡的影响了解较少，IL-1ra是否能阻止视网膜变性值得研究。目的研究IL-1ra对自发性遗传性视网膜变性大鼠视细胞凋亡的影响。方法选择SPF级出生后9、15、16、25、30、35、40、50、60d的RCS大鼠各9只9只眼制备视网膜切片，采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测不同年龄大鼠视网膜凋亡细胞。选择出生后15d的RCS大鼠9只，右眼玻璃体腔注射质量浓度1．8g／LIL-1ra 1μl，左眼玻璃体腔注入PBS 1μl作为对照，分别待大鼠20日龄、25日龄时各重复注射药物1次，30日龄时处死实验大鼠并制备视网膜切片，采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测及分析视网膜细胞凋亡情况。采用单因素方差分析比较不同鼠龄视网膜中阳性细胞核面积百分率的差异，采用配对t检验比较大鼠IL-1ra注射组与PBS注射组视网膜各层厚度的差异。结果RCS大鼠视网膜视细胞自出生后第25天出现凋亡，第30～35天达高峰，不同鼠龄间大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核面积百分率的差异有统计学意义（F=28．020，P〈0．01）。TUNEL凋亡图像分析结果显示，30日龄大鼠IL—lra注射眼视网膜TUNEL阳性染色弱于PBS注射眼，且阳性染色细胞数少于PBS注射眼；IL-1ra注射眼大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核总面积及相对面积均明显低于PBS注射眼，差异均有统计学意义[总面积：（223．052±153．092）μm2 VS．（1235．050±359．767）μm2，t=4．370，P〈0．01；相对面积：（2．206±1．531）％VS．（7．269±1．624）％，t=3．250，P〈O．01]。IL-1ra注射组和PBS注射组视锥与视杆细胞层厚度分别为（15．324±9．035）μm和（49．566±4．605）μm，差异有统计学意义（t=22．674
- 李爱军房军朱秀安于文贞狄春辉杨丽萍
- 关键词：遗传性视网膜变性白细胞介素白细胞介素-1受体拮抗剂细胞凋亡
- rd小鼠遗传性视网膜变性中内质网应激蛋白的激活
- 2008年
- 目的探讨rd小鼠遗传性视网膜变性光感受器细胞变性凋亡中内质网应激反应蛋白的表达变化。方法实验研究。取出生后8、10、12、14、24d的rd小鼠和同年龄段的正常对照C3B小鼠。免疫印迹法检验视网膜中GRP78／BiP、半胱天冬酶-12酶原（procaspase-12）和活性caspase-12、p-PERK、p-eIF2a蛋白表达变化。免疫荧光染色共聚焦显微镜观测GRP78／BiP、caspase-12、p-PERK和p-eIF2a的表达部位及表达量的变化。用SPSS单因素方差分析对数据进行统计学分析，以P〈0．01为差异有统计学意义。结果伴随rd小鼠遗传性视网膜变性过程免疫印迹结果显示GRP78／Bip、半胱天冬酶-12酶原和活性caspase-12、p-PERK、P—eIF2a蛋白的表达上调，与正常对照组之间的差异具有统计学意义（F=65．82，55．76，152．29，50．54，20．91；P〈0．05）；免疫荧光染色结果显示GRP78／Bip、caspase-12、p-PERK和p-eIF2a主要表达于视网膜光感受器细胞的内节和光感受器细胞核中。结论在rd小鼠遗传性视网膜变性光感受器细胞变性凋亡中，内质网应激反应蛋白的激活对于光感受器细胞的凋亡具有重要作用。应用内质网应激反应调节剂可能对此类疾病起到有效治疗作用。
- 吴乐萌曹安民朱秀安郭秀娟杨丽萍
- 关键词：视网膜变性细胞凋亡内质网热休克蛋白质类小鼠
- 青光眼动物模型DBA/2J小鼠的眼部特征及组织学观察被引量：9
- 2010年
- 目的评价不同月龄DBA/2J小鼠的眼压、眼部特征及组织学变化。方法清洁级DBA/2J小鼠36只,3、5、7、9、11、14月龄各6只,3、9、14月龄的C57BL/6J小鼠各6只为对照。分别对实验鼠行眼前节照相,前房微管法眼压测量。用尼氏染色法对鼠视网膜切片进行染色并在光学显微镜下行视网膜神经节细胞(RGCs)计数,光学显微镜下对视网膜冰冻切片行视盘的形态学观察。结果鼠眼前节检查表明,DBA/2J小鼠从5月龄始逐渐发生虹膜色素播散、虹膜萎缩,虹膜透照可见瞳孔变形。眼压从7月龄开始升高,9月龄眼压升至高峰,14月龄降至对照组水平。各月龄DBA/2J小鼠眼压间的差异有统计学意义(F=27.600,P<0.05),各月龄C57BL/6J小鼠眼压间的差异无统计学意义(F=0.249,P=0.781)。DBA/2J鼠RGCs数量从7月龄开始减少,9～11月龄减少明显,各月龄DBA/2J鼠RGCs计数间的差异有统计学意义(F=23.594,P=0.000),各月龄C57BL/6J小鼠RGCs计数的差异无统计学意义(F=1.816,P=0.211)。DBA/2J小鼠视盘凹陷于9～14月龄开始逐渐加深,而各月龄C57BL/6J小鼠的视盘形态无明显变化。结论随月龄的增长,DBA/2J小鼠眼前节病变逐渐加重,表现出继发性青光眼的相关形态学改变。DBA/2J小鼠是研究青光眼发病机制和视神经保护较好的动物模型。
- 杨帆吴玲玲郭秀娟杨丽萍李颖吴乐萌王冬梅
- 关键词：高眼压视网膜神经节细胞
