- 前房插管技术测量小鼠眼压被引量：4
- 2008年
- 目的评价前房插管法测量小鼠眼压的准确性并测量5种不同品系小鼠的眼压。方法选择3个月龄清洁级C3H/HeJ、C57BL/6J、BALB/CJ和ICR小鼠各20只,3、6、9、11个月龄DBA/2J小鼠各7只,用调整与小鼠玻璃体腔相连的水柱高度来检测前房插管测量系统眼压测量的准确性,将连接于前房插管测量系统的玻璃微管插入小鼠前房,测量小鼠的眼压。结果前房插管系统测得的眼压值和实际眼压值之间有很好的相关性(r=0·99,P=0·000);使用该技术测得C3H/HeJ、C57BL6J、BALB/CJ和ICR小鼠的眼压分别为(10·64±1·92)、(10·81±1·84)、(10·98±1·3)和(11·60±1·29)mmHg;3、6、9和11个月龄DBA/2J小鼠的眼压分别为(11·43±1·84)、(10·54±2·49)、(19·35±7·49)和(26·76±4·4)mmHg。结论前房插管技术可以准确地测量小鼠的眼压,3个月龄5种小鼠眼压相似,DBA/2J小鼠眼压在9个月龄和11个月龄时增高。
- 郭秀娟李颖吴乐萌胡运涛吴玲玲
- 关键词：小鼠眼压
- 胶质细胞在DBA/2J小鼠继发性青光眼模型中的反应
- 目的：观察星型胶质细胞和 M(?)ller 细胞在 DBA/2J 小鼠继发性青光眼模型中的反应。方法：选择3月龄、5月龄和7 月龄的 DBA/2J 小鼠。前房插管法测定眼内压后,小鼠断颈处死迅速摘取眼球。尼氏染色法检测视...
- 郭秀娟杨丽萍李颖吴乐萌
- 文献传递
- 三种体外培养法比较兔角膜缘上皮细胞生物学特性
- ＜正＞目的:对单纯消化法,消化、冷藏、复苏法和组织块法传代培养的角膜缘上皮细胞生物学活性进行对比分析,以期确定最佳角膜缘上皮细胞体外传代培养法。方法:采用3T3成纤维细胞滋养层体系,分别用单纯消化法,消化、冷藏、复苏法及...
- 许永根王薇张弛吴乐萌
- 文献传递
- 内质网应激反应蛋白在光照损伤诱导视网膜变性中的作用被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨在光照损伤诱导视网膜感光细胞变性凋亡中,内质网应激反应蛋白的表达变化。方法：取4 -5周龄的Balb/cJ雄性小鼠189只,随机分为7组（每组n=27）,其中1组（27只）作为对照组,6组（162只）作为实验组。将实验组Balb/cJ小鼠暗适应48h后暴露于光照损伤（波长490 -580nm,光照度3500lx）24h。分别于暗恢复后0h,3h,6h,24h,3d以及7d处死小鼠,摘取眼球。用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测感光细胞的凋亡;Western blot检验视网膜中内质网应激反应蛋白（GRP78/BiP,procaspase-12和cleaved caspase-12,p-PERK,p-eIF2α）的表达变化;免疫荧光染色共聚焦显微镜观测内质网应激反应蛋白在视网膜中的表达。结果：（1）光照损伤后视网膜外核层中出现TUNEL染色阳性细胞,并且在暗恢复24h后阳性染色细胞数达到高峰;（2）伴随光照损伤诱导的视网膜变性过程,Western blot检测结果显示内质网应激反应蛋白的表达上调,与正常对照组之间的差异具有统计学意义（P〈0.01）;（3）免疫荧光染色结果显示内质网应激反应蛋白主要表达于视网膜感光细胞的内节和感光细胞核中。结论：在光照损伤诱导的视网膜感光细胞变性凋亡中,内质网应激反应蛋白的激活对于感光细胞的变性凋亡可能具有重要作用。应用内质网应激反应调节剂可能对此类疾病起到有效治疗作用。
- 吴乐萌郭秀娟曹安民杨丽萍
- 关键词：视网膜变性内质网细胞凋亡光刺激
- 青光眼动物模型DBA/2J小鼠的眼部特征及组织学观察被引量：9
- 2010年
- 目的评价不同月龄DBA/2J小鼠的眼压、眼部特征及组织学变化。方法清洁级DBA/2J小鼠36只,3、5、7、9、11、14月龄各6只,3、9、14月龄的C57BL/6J小鼠各6只为对照。分别对实验鼠行眼前节照相,前房微管法眼压测量。用尼氏染色法对鼠视网膜切片进行染色并在光学显微镜下行视网膜神经节细胞(RGCs)计数,光学显微镜下对视网膜冰冻切片行视盘的形态学观察。结果鼠眼前节检查表明,DBA/2J小鼠从5月龄始逐渐发生虹膜色素播散、虹膜萎缩,虹膜透照可见瞳孔变形。眼压从7月龄开始升高,9月龄眼压升至高峰,14月龄降至对照组水平。各月龄DBA/2J小鼠眼压间的差异有统计学意义(F=27.600,P<0.05),各月龄C57BL/6J小鼠眼压间的差异无统计学意义(F=0.249,P=0.781)。DBA/2J鼠RGCs数量从7月龄开始减少,9～11月龄减少明显,各月龄DBA/2J鼠RGCs计数间的差异有统计学意义(F=23.594,P=0.000),各月龄C57BL/6J小鼠RGCs计数的差异无统计学意义(F=1.816,P=0.211)。DBA/2J小鼠视盘凹陷于9～14月龄开始逐渐加深,而各月龄C57BL/6J小鼠的视盘形态无明显变化。结论随月龄的增长,DBA/2J小鼠眼前节病变逐渐加重,表现出继发性青光眼的相关形态学改变。DBA/2J小鼠是研究青光眼发病机制和视神经保护较好的动物模型。
- 杨帆吴玲玲郭秀娟杨丽萍李颖吴乐萌王冬梅
- 关键词：高眼压视网膜神经节细胞
- 雷公藤甲素在慢性青光眼大鼠模型中对视网膜神经节细胞的保护被引量：3
- 2011年
- 背景青光眼是一种以视神经损害为病理特点的常见致盲性眼病。目前，通过延缓或阻止病程的进展而保护视神经是青光眼研究的热点。目的研究中药雷公藤的有效提取成分雷公藤甲素对慢性青光眼大鼠模型视网膜神经节细胞（RGCs）的保护作用。方法选用清洁级Wistar雌性大鼠80只，采用房水释放联合激光房角光凝法建立慢性青光眼大鼠模型。右眼为激光眼，左眼为对照眼。激光光凝前3d起每日雷公藤甲素组大鼠腹腔给予雷公藤甲素5μg／kg直至处死，生理盐水组以同样的方式给予等量生理盐水。于术前，术后1、3、5d，1周及此后每周用Tono—PenXL眼压计监测眼压。激光光凝术后1、2、4、8周制作大鼠眼球视网膜铺片并行Nissl染色，对RGCs进行定量检测。结果激光眼术后1d眼压较术前增高，术后1周达高峰，持续约3周，4周时眼压恢复正常；对照眼各时间点眼压值与术前相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。术后各时间点雷公藤甲素组激光眼与生理盐水组激光眼间眼压的差异无统计学意义（P〉0．05）。生理盐水组激光眼术后1周RGCs数量开始减少，术后4～8周RGCs存活数量明显下降；与生理盐水组激光眼相比，各时间点雷公藤甲素组激光眼RGCs数量明显增多，差异均有统计学意义（P〈0．05）。雷公藤甲素组激光眼与其对照眼相比，各时间点RGCs数目的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论雷公藤甲素能防止慢性青光眼大鼠模型的RGCs损伤，对RGCs具有保护作用，该作用并不依赖于眼压的下降，这可能为青光眼的治疗提出新思路。
- 王冬梅吴玲玲王艺吴乐萌
- 关键词：青光眼眼压雷公藤甲素视网膜神经节细胞
- rd小鼠遗传性视网膜变性中内质网应激蛋白的激活
- 2008年
- 目的探讨rd小鼠遗传性视网膜变性光感受器细胞变性凋亡中内质网应激反应蛋白的表达变化。方法实验研究。取出生后8、10、12、14、24d的rd小鼠和同年龄段的正常对照C3B小鼠。免疫印迹法检验视网膜中GRP78／BiP、半胱天冬酶-12酶原（procaspase-12）和活性caspase-12、p-PERK、p-eIF2a蛋白表达变化。免疫荧光染色共聚焦显微镜观测GRP78／BiP、caspase-12、p-PERK和p-eIF2a的表达部位及表达量的变化。用SPSS单因素方差分析对数据进行统计学分析，以P〈0．01为差异有统计学意义。结果伴随rd小鼠遗传性视网膜变性过程免疫印迹结果显示GRP78／Bip、半胱天冬酶-12酶原和活性caspase-12、p-PERK、P—eIF2a蛋白的表达上调，与正常对照组之间的差异具有统计学意义（F=65．82，55．76，152．29，50．54，20．91；P〈0．05）；免疫荧光染色结果显示GRP78／Bip、caspase-12、p-PERK和p-eIF2a主要表达于视网膜光感受器细胞的内节和光感受器细胞核中。结论在rd小鼠遗传性视网膜变性光感受器细胞变性凋亡中，内质网应激反应蛋白的激活对于光感受器细胞的凋亡具有重要作用。应用内质网应激反应调节剂可能对此类疾病起到有效治疗作用。
- 吴乐萌曹安民朱秀安郭秀娟杨丽萍
- 关键词：视网膜变性细胞凋亡内质网热休克蛋白质类小鼠
- 不同体外方法培养兔角膜缘上皮细胞作用的研究被引量：1
- 2007年
- 自从1986年Schermer等发现角膜缘干细胞位于角膜缘基底Vogt栅栏内后，对角膜缘干细胞缺失和角膜上皮病变治疗有了许多新的疗法，其中以角膜缘上皮细胞体外培养法治疗上述疾病比较有效。目前，多数学者采用组织块法进行角膜缘上皮细胞体外培养，但在培养系中干细胞能否从组织块中迁移出来尚有争议。另外，最近角膜缘上皮单细胞悬浮液超低温冷藏、复苏以及体外培养技术越来越受到人们的关注，成为角膜缘干细胞研究中的一项重要的课题。此种培养方法既可以将角膜缘干细胞和其他角膜上皮细胞长期保存在超低温状态下，减少细胞传代培养次数，
- 许永根王薇张弛吴乐萌
- 关键词：角膜缘上皮细胞培养法角膜缘干细胞角膜上皮病变细胞体外培养体外培养技术
- 脱细胞角膜基质的制备及其超微结构
- 2009年
- 目的探讨异种角膜脱细胞基质的制备方法,观察异种脱细胞角膜基质的超微结构。方法取新鲜狗角膜进行脱细胞处理,用光学显微镜和扫描电镜观察植片的形态学改变。从一脱细胞狗角膜基质取1mm厚组织片,植入兔角膜囊袋中,分别于术后不同时间点对其进行临床观察及组织切片看形态学改变,及其与受体组织融合情况。结果脱细胞后的狗角膜组织呈现无细胞的三维网状,肉眼观察为灰白色半透明组织,经脱水处理后呈透明状,组织切片中未见蓝染的细胞核结构,扫描电镜示基质纤维完好,呈有序的平行结构排列的透明结构。植入囊袋中可见局部水肿不明显,呈半透明状,术后1个月可见有新生血管长入。结论脱细胞处理方法可以有效的脱净细胞,并保持角膜三维结构和透明性,宿主细胞可以长入异种脱细胞角膜基质植片中并在植片中增殖,与其他方法处理的脱细胞基质相比,组织的生物相容性更好。
- 冯云许永根张弛李颖吴乐萌王薇
- 关键词：相容性异种脱细胞基质细胞外基质
- 内质网应激反应在遗传性视网膜变性中的作用
- 目的：探讨内质网应激反应在 rd 小鼠遗传性视网膜变性中对感光细胞凋亡的作用。方法：Western Blotting 检验 GRP78/BiP、procaspase-12和 cleaved caspase—12、p— P...
- 吴乐萌杨丽萍
- 文献传递
