李玉龙
- 作品数：11 被引量：18H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 犊牛睾丸支持细胞的培养及不同浓度pEGFP-N3载体瞬时转染被引量：1
- 2014年
- 为了研究支持细胞的分离、纯化、鉴定、传代培养及pEGFP-N3载体转染,试验以新生牛睾丸组织为材料,以脂质体介导转染支持细胞。结果表明:支持细胞的纯度达95%,可传至20代;细胞密度为2.5×105个/孔时,3.0μL的脂质体、2.4μg的pEGFP-N3质粒为最佳组合,转染72 h后效率可达36.03%。
- 时宇于娜刘欣AHMED KHALID林旭李玉龙张贵学
- 关键词：支持细胞转染睾丸
- FSH对支持细胞增殖相关基因表达的影响
- 睾丸支持细胞位于曲精细管中，是精子发生的微环境的主要构成。许多激素和影响因子都参与了睾丸支持细胞增殖调控，其中FSH是调节睾丸支持细胞增殖进程的重要激素之一。因此，研究FSH对犊牛睾丸支持细胞增殖的调节机制不仅能为人工调...
- 李玉龙
- 关键词：犊牛睾丸基因表达促卵泡激素
- 文献传递
- 微囊藻毒素对牛子宫内膜上皮细胞中β-防御素表达的影响
- 引言微囊藻毒素(Microcystin,MC)具有很强的生殖毒性。β-防御素(β-defensin)是先天免疫的重要组成部分。牛子宫内膜上皮细胞(BEEC)是牛子宫抵御外部环境病原微生物的第一道屏障,β-防御素在粘膜上皮...
- 黄富硕李晓宇Gooke Jimmy李玉龙黄贺张贵学
- 牛支持细胞和成纤维细胞体外培养及pEGFP-N3转染被引量：4
- 2014年
- 试验以新生牛睾丸组织、牛胎儿皮肤组织为材料,进行支持细胞、成纤维细胞的分离、纯化、鉴定及pEGFP-N3载体转染。结果表明,完善犊牛支持细胞、胎牛皮肤成纤维细胞体外培养体系,细胞纯度可达95%。支持细胞在相同密度下较成纤维细胞能更快完成细胞生长指数期,生长迅速。转染pEGFP-N3载体后,初期EGFP均匀充满胞浆,后期EGFP向细胞核聚集,荧光强度明显高于细胞质中。转染后24、48、72 h,成纤维细胞转染效率高于支持细胞,转染pEGFP-N3的成纤维细胞和支持细胞在转染48 h后达到最大转染效率。转染后成纤维细胞的存活时间明显高于支持细胞,这与支持细胞生物学性质有关。
- 于娜杨泽宇林旭李玉龙赵洵武张贵学
- 关键词：支持细胞成纤维细胞体外培养
- 褪黑素对LPS诱导的犊牛睾丸支持细胞氧化应激和凋亡的影响被引量：1
- 2022年
- 为了探究犊牛睾丸支持细胞(SCs)在血睾屏障形成过程中受到细菌感染的影响以及褪黑素的缓解作用。本试验使用CCK-8试剂盒测定SCs活力,活性氧(ROS)试剂盒、谷胱甘肽(GSH)试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒分别测量ROS、GSH的表达和SOD活性,Western blot和RT-PCR分析Nfr2、HO-1、p53、Caspase3和Connexin43表达量。结果表明,5 mg/L LPS可以激活Nfr2/HO-1信号通路和p53信号转导,从而显著上调ROS和Caspase3的表达量,显著下调SOD和GSH的活性和表达,造成SCs氧化应激和细胞凋亡,进而下调Connexin43蛋白的表达,降低细胞活力。加入50μmol/L褪黑素后,可以显著抑制激活Nfr2/HO-1信号通路和p53信号转导,从而显著下调ROS和Caspase3的表达量,显著上调SOD和GSH的活性和表达,缓解LPS造成SCs氧化应激和细胞凋亡,进而恢复Connexin43蛋白的表达和细胞活力。结果说明,褪黑素可以缓解LPS诱导SCs的氧化应激和细胞凋亡,对Connexin43蛋白表达有保护作用。
- 冯瑞王子铭黄富硕李玉龙张贵学
- 关键词：睾丸支持细胞血睾屏障褪黑素氧化应激
- 牛输卵管上皮细胞系的建立被引量：1
- 2015年
- 分离牛输卵管上皮细胞、培养、鉴定、核型分析和冷冻保存。第1代分离的上皮细胞（7±1）d时开始贴壁生长,（14.0±0.9）d后铺满培养瓶底部,第2代以后贴壁时间缩短为（1.0~1.5）d,体外培养至7代后逐渐衰老。第2代以后细胞贴壁性质发生了变化。解冻后细胞活率〉78%,输卵管上皮细胞呈角蛋白阳性,第5代细胞具有正常的二倍体核型,转染p EGFP-N3载体的效率较低。
- 刘欣于娜时宇林旭李玉龙张贵学
- 关键词：输卵管上皮细胞体外培养
- 牛支持细胞转染HNP-1后的细胞防御反应
- 于娜AHMED林旭李玉龙赵洵武张贵学
- Microcystin-LR对体外牛子宫内膜上皮细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2022年
- 使用Microcystin-LR体外处理牛子宫内膜上皮细胞,探究其对细胞活率影响及分子调控机制,以期为提高牛繁殖效率提供理论基础和实践依据。试验运用CCK-8检测MC-LR处理后细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率;Annexin V-FITC试剂盒检测细胞凋亡;实时荧光定量检测Pi3k、Akt、mTOR、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9和p53基因mRNA表达量。Western blot检测Pi3k、Akt、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量。结果表明,不同浓度和时间处理下细胞存活率出现升高和降低两种相反情况,根据CCK-8检测结果,选择12 h,100μg·L^(-1)和24 h,160μg·L^(-1)两种处理方案开展后续试验。在12 h,100μg·L^(-1)条件下,Pi3k、Akt、mTOR的mRNA表达量升高(P<0.01),Cyt-c、Caspase-3和Caspase-9基因mRNA表达量下降(P<0.05),Pi3k和Akt蛋白表达量升高(P<0.05),Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量降低(P<0.05)。处于G0/G1期细胞数量减少(P<0.01),处于G2/M和S期细胞数量增加(P<0.01);p53基因mRNA表达量升高(P<0.05)。在24 h,160μg·L^(-1)处理条件下,Caspase-3、Caspase-9、Bax/Bcl2基因mRNA表达量升高(P<0.05),Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量升高(P<0.05)。研究表明,100μg·L^(-1)MC-LR处理细胞12 h,细胞通过增强Pi3k-Akt-mTOR信号通路,抑制线粒体凋亡通路促进细胞增殖,同时导致处于G1期细胞数量减少、G2/M期和S期细胞数量增加。160μg·L^(-1)MC-LR处理细胞24 h,细胞通过活化线粒体凋亡通路发生凋亡。
- 张贵学李晓宇黄富硕马铭钧王子铭冯瑞李玉龙许钟峯郑鹏
- 关键词：MC-LRPI3K-AKT线粒体凋亡
- 睾酮对支持细胞增殖、成熟及凋亡几种相关基因的影响
- 引言/目的牛睾丸间质细胞分泌的睾酮,进入曲细精管,与支持细胞分泌的睾酮结合蛋白结合调节精子发生。在曲细精管内,支持细胞形成的血液睾丸屏障是维持精子发生的重要内环境,支持细胞的生长、发育和生理状态是影响精子生成的重要因素。...
- 郑鹏李玉龙赵洵武黄贺田亚光张贵学
- 盐胁迫对5种燕麦种子萌发的影响被引量：8
- 2017年
- 为了解5种引进燕麦[林纳(Avena sativa Lena)、青海444(A.sativa Qinghai No.444)、青引1号(A.sativa Qingyin No.1)、青引2号(A.sativa Qingyin No.2)、甜燕麦(A.sativa Qinghai)]异地自繁后种子对盐胁迫的适应性,采用不同浓度的单盐(NaCl、Na_2CO_3)和混盐(NaCl、Na_2SO_4、Na_2CO_3、NaHCO_3)溶液对5个燕麦品种进行盐胁迫处理,通过培养皿纸上发芽法测定种子发芽率,再根据发芽率的变化得出燕麦品种耐盐适宜范围、耐盐半致死浓度和耐盐极限浓度。结果表明:最耐NaCl盐胁迫的是青引2号和青引1号,极限浓度分别是1.29%、1.18%;最耐Na_2CO_3盐胁迫的是青引1号和青引2号,极限浓度为0.49%;最耐混盐胁迫的是青引2号,极限浓度为1.05%。说明5种燕麦中的青引2号燕麦对轻度盐碱有较强的适应能力。
- 刘国富张宇龙李玉龙霍鹏举孟璐王明君
- 关键词：燕麦种子萌发盐胁迫半致死浓度
