于娜
- 作品数：11 被引量：31H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国际科技合作与交流专项项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新生牛睾丸支持细胞的体外培养及鉴定分析被引量：16
- 2013年
- 为探究支持细胞的体外培养特性,以新生牛睾丸组织为试验材料,利用组合酶消化法将其解离成单细胞悬液,并采用差速贴壁法纯化支持细胞后进行体外培养与鉴定。结果表明:支持细胞体外培养能够传至第20代,并且随着传代次数的增加,支持细胞的增殖速度越来越慢;添加2%血清浓度的DMEM/F-12的培养基即可用于支持细胞的体外培养;免疫组化染色显示,所培养的细胞内波形蛋白呈阳性;RT-PCR检测结果可见支持细胞标志基因SCF和GDNF的表达;第15代的支持细胞内含有正常的二倍体核型。
- 于磊郑鹏荣恩光于娜田亚光张贵学
- 关键词：睾丸支持细胞体外培养
- 基于AKP、OCT-4染色技术的新生牛精原干细胞多能性的确定被引量：4
- 2013年
- 用AKP、OCT-4染色技术鉴定精原干细胞的多能性,以期为牛精原干细胞的深入研究奠定基础。将新生牛睾丸解离成单细胞悬液,差速贴壁法纯化精原干细胞,并用RT-PCR和免疫组化的方法鉴定分离的细胞;分离后的精原干细胞进行体外培养,形成集落后转移到支持细胞饲养层上继续培养,形成集落后进行AKP、OCT-4染色鉴定多能性。结果表明:分离纯化后的精原干细胞表达精原干细胞的标志基因PGP9.5,不表达GDNF的受体基因GFRa1,精原干细胞的AKP、OCT-4染色呈阳性;精原干细胞体外培养可形成葡萄串状细胞集落和类ES细胞集落,葡萄串状细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在GDNF培养液中增殖,类ES细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在LIF培养液中增殖,细胞集落AKP、OCT-4染色呈阳性。
- 郑鹏于娜田亚光黄贺张贵学
- 关键词：OCT-4精原干细胞体外培养
- 犊牛睾丸支持细胞的培养及不同浓度pEGFP-N3载体瞬时转染被引量：1
- 2014年
- 为了研究支持细胞的分离、纯化、鉴定、传代培养及pEGFP-N3载体转染,试验以新生牛睾丸组织为材料,以脂质体介导转染支持细胞。结果表明:支持细胞的纯度达95%,可传至20代;细胞密度为2.5×105个/孔时,3.0μL的脂质体、2.4μg的pEGFP-N3质粒为最佳组合,转染72 h后效率可达36.03%。
- 时宇于娜刘欣AHMED KHALID林旭李玉龙张贵学
- 关键词：支持细胞转染睾丸
- HNP1对牛支持细胞中细胞周期因子的影响
- 2018年
- 为了探讨异源蛋白侵入支持细胞的细胞反应,试验采用体外模拟血睾-屏障和支持细胞受损的方法,即用载体pEGFP-N3和pEGFP-N3-HNP1转染牛睾丸支持细胞,通过细胞内产生的异源蛋白,检测支持细胞的反应以及周期蛋白因子(P53、CDC25A)的表达变化。结果表明:转染48 h和96h后HNP1可下调支持细胞P53、CDC25A基因的表达。说明异源蛋白作用于支持细胞,可抑制或降低周期蛋白P53、CDC25A的表达,导致细胞分裂停止或降低。
- 王晨王皓于娜王雪张晗许钟峯张贵学
- 关键词：犊牛支持细胞P53CDC25A
- 影响奶牛超数排卵和胚胎移植的因素被引量：6
- 2014年
- 为了进一步提高奶牛胚胎移植技术的效率,试验分别对超数排卵、胚胎移植的各个环节及其影响因素进行探讨与优化。结果表明:同期发情与自然发情处理后供体牛超数排卵,每头牛获得的可用胚胎数差异不显著(P>0.05);秋季时进行超数排卵,每头牛的可用胚胎数显著高于夏季(P<0.05);注射口蹄疫疫苗,使用性控精液输精能显著降低超数排卵后的可用胚胎数(P<0.05);31头供体牛经处理后,再次发情受胎的情期受胎率与大群的情期受胎率差异不显著(P>0.05),双胎率显著提高(P<0.05)。
- 武浩楠郑鹏黄贺田亚光于娜
- 关键词：同期发情超数排卵供体牛胚胎奶牛
- 牛支持细胞和成纤维细胞体外培养及pEGFP-N3转染被引量：4
- 2014年
- 试验以新生牛睾丸组织、牛胎儿皮肤组织为材料,进行支持细胞、成纤维细胞的分离、纯化、鉴定及pEGFP-N3载体转染。结果表明,完善犊牛支持细胞、胎牛皮肤成纤维细胞体外培养体系,细胞纯度可达95%。支持细胞在相同密度下较成纤维细胞能更快完成细胞生长指数期,生长迅速。转染pEGFP-N3载体后,初期EGFP均匀充满胞浆,后期EGFP向细胞核聚集,荧光强度明显高于细胞质中。转染后24、48、72 h,成纤维细胞转染效率高于支持细胞,转染pEGFP-N3的成纤维细胞和支持细胞在转染48 h后达到最大转染效率。转染后成纤维细胞的存活时间明显高于支持细胞,这与支持细胞生物学性质有关。
- 于娜杨泽宇林旭李玉龙赵洵武张贵学
- 关键词：支持细胞成纤维细胞体外培养
- 人α防御素基因1(HNP-1)真核表达载体的构建及初步表达
- 在前期实验室建立的细胞培养体系的基础上，通过提取人α防御素HNP1基因RNA，运用RT-PCR的方法扩增得到相应基因并进行测序与鉴定。以EGFP-N3为骨架构建带有人防御素基因的表达载体pEGFP-N3-HNP1,通过转...
- 于娜郑鹏于磊AHMED田亚光黄贺刘欣时宇张责学
- 关键词：防御素基因真核表达载体外源基因转基因技术核移植
- 猪睾丸内雄性生殖细胞的迁移被引量：3
- 2013年
- 为了解猪睾丸发育过程中生殖细胞增殖和发育规律，确定猪性原细胞、精原干细胞分离的适宜时间。试验以7，30，60，90，1501日龄猪睾丸为研究对象，制作石蜡切片和电镜切片，探讨猪睾丸发育过程中生殖细胞增殖和发育规律。结果表明：7～30日龄的猪睾丸适合用于分离性原细胞，30～60日龄的猪睾丸适合用于分离精原干细胞，90日龄的猪睾丸内出现分化的A型精原干细胞。
- 田亚光于磊于娜黄贺郑鹏
- 关键词：睾丸生殖细胞迁移
- 牛输卵管上皮细胞系的建立被引量：1
- 2015年
- 分离牛输卵管上皮细胞、培养、鉴定、核型分析和冷冻保存。第1代分离的上皮细胞（7±1）d时开始贴壁生长,（14.0±0.9）d后铺满培养瓶底部,第2代以后贴壁时间缩短为（1.0~1.5）d,体外培养至7代后逐渐衰老。第2代以后细胞贴壁性质发生了变化。解冻后细胞活率〉78%,输卵管上皮细胞呈角蛋白阳性,第5代细胞具有正常的二倍体核型,转染p EGFP-N3载体的效率较低。
- 刘欣于娜时宇林旭李玉龙张贵学
- 关键词：输卵管上皮细胞体外培养
- 新生牛睾丸雄性生殖干细胞的体外增殖与分化
- 本研究以新生犊牛睾丸为实验对象，探讨新生牛睾丸雄性生殖干细胞体外增殖与分化的相关影响因素和技术体系，以期为建立稳定、高效的家畜雄性生殖干细胞体外增殖与分化体系提供理论和实践依据。
- 郑鹏于磊于娜刘欣时宇张贵学
- 关键词：犊牛生殖干细胞体外培养细胞增殖
