张葵
- 作品数：16 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 小鼠抗兔IgG单克隆抗体的制备与应用被引量：2
- 2008年
- 制备小鼠抗兔IgG的mAb,经标记HRP和FITC后,应用于ELISA、Western blot、免疫组织化学染色试验以及FCM。以正常兔IgG为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过常规B淋巴细胞融合技术,获得两株分泌抗兔IgG mAb的杂交瘤细胞株,间接ELISA腹水效价均达1×10-7,且亚类均为IgG1(κ)。抗体经鉴定、纯化后,以改良的过碘酸钠法标记HRP,本室常规方法标记FITC。FITC标记的2A1 mAb的F/P值为4.1,2F11的F/P值为2.7。HRP标记抗体的效价和工作浓度分别:2A1为1:25600和1:3200,2F11为1:102400和1:25600。在相同工作浓度条件下,ELISA、Western blot的实验结果,HRP标记的2F11 mAb明显优于商品化抗兔pAb,而且,2A1和2F11 mAb经标记后还可用于免疫组化和FCM,显示出很好的应用前景。
- 张葵汪涛李琦庄然宋朝君李永明金伯泉
- 关键词：单克隆抗体兔IGG辣根过氧化物酶
- Triton X-100洗涤剂对抗原包被效率的影响及其对策被引量：3
- 2008年
- 目的:观察抗原中残留的洗涤剂成分在间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆时,对抗原包被效率的影响以及相应的对策。方法:以卵白蛋白(OVA)、卵运铁蛋白(OT)和本室制备的相应的单克隆抗体(mAb)作为实验模型,在抗原中加入不同浓度梯度的Triton X-100包被ELISA板,用相应的mAb细胞株培养上清做间接ELISA,确定Triton X-100对包被效率的影响。结果:当包被抗原中Triton X-100的浓度为3×10-6(v/v)时,可以明显抑制包被效率,当TritonX-100的浓度为1.6×10-4(v/v)时几乎可以完全抑制抗原的包被;在含有一定浓度Triton X-100的条件下,提高抗原的浓度,或适当增大包被过程中的稀释倍数,可以明显提高包被效率。结论:洗涤剂对抗原包被有较强的影响,在抗体制备过程中,应尽量提高抗原的初始浓度,降低洗涤剂的浓度,设计合理的针对含有洗涤剂抗原的ELISA筛选方案,是mAb制备成功的关键之一。
- 李永明宋朝君张葵李琦田莹金伯泉
- 关键词：抗体ELISA洗涤剂
- 接触抑制下调CD112和CD155在ECV304细胞上的表达伴有对NK细胞杀伤的抵抗
- 2007年
- 目的:研究细胞培养接触抑制条件下,ECV304细胞表面CD112和CD155表达的变化及其对NK细胞杀伤敏感性的变化。方法:以ECV304细胞接触抑制为模型,应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察CD112和CD155分子在对数生长状态和发生接触抑制状态ECV304细胞上表达情况的变化;采用51Cr-4 h释放试验,观察NK细胞对2种状态ECV304细胞杀伤活性的改变。结果:CD112和CD155分子在ECV304细胞发生接触抑制时表达水平明显低于对数生长期细胞。NK细胞对发生接触抑制的ECV304细胞的杀伤率比对数生长期的细胞有所下降。结论:接触抑制会使ECV304细胞对NK细胞杀伤有一定抵抗,同时伴有CD112和CD155分子表达的下调,两者间是否存在因果关系值得进一步深入探讨。
- 张葵陈丽华贾卫庄然金伯泉
- 关键词：ECV304细胞
- 抗AFP单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制及应用被引量：1
- 2011年
- 甲胎蛋白（alpha fetoprotein,AFP）是一种癌胚抗原,在胚胎期由肝细胞和卵黄囊合成并出现在胎儿血清中,出生后血清中AFP的含量很低,正常人血清中的AFP浓度在20μg/L以下。当机体发生原发性肝癌时,肝癌细胞可合成和分泌大量AFP,在癌组织提取液、血清及腹水中均可检出高水平的AFP,现已作为肝癌的标志物,广泛应用于肝癌的普查、诊断、
- 李琦徐竹蔚宋朝君田莹陈丽华李永明张葵金伯泉
- 关键词：甲胎蛋白ELISA单克隆抗体
- 抗人EpCAM单链抗体的制备及其应用研究
- 上皮细胞黏附分子/(Epithelial cell adhesion molecule,EpCAM/)是一种I型跨膜蛋白,分子量约为40kDa,在第八届人类白细胞分化抗原专题会议中,被命名为CD326。EpCAM的胞膜外...
- 张葵
- 关键词：单克隆抗体单链抗体免疫毒素上皮细胞黏附分子胰腺癌
- 文献传递
- Th亚群(Th17、Treg、Tfh)与RA
- <正>近年研究表明, RA炎症病灶中Th17细胞过度表达IL-17并通过其上调多种促炎因子TNF-α、IL-1、-6、-8等以及基质金属蛋白酶(MMPs),在 RA病程的各个阶段都发挥着重要的作用。多种效应细胞表达IL-...
- 朱平吴振彪冷南李学义陈丽娜缪金林张葵
- 文献传递
- 巨噬细胞M1亚类的CD147分子诱导肺间质纤维化过程中Th17细胞的分化
- 内容:巨噬细胞M1亚类的CD147分子诱导肺间质纤维化过程中Th17细胞的分化背景:肺间质纤维化属于慢性肺病,目前尚没有明确有效的治疗措施可以阻止或是逆转病情进展.研究中发现在肺间质纤维化发生过程中,Th17细胞起到重要...
- 张葵耿杰杰陈丽娜缪金林孟瑶任英付之光陈志南朱平
- 关键词：TH17巨噬细胞
- DNAM-1介导静止NK细胞对新分离的卵巢癌细胞的识别杀伤被引量：1
- 2007年
- 马克强张悦鸣潘文党军张葵
- 关键词：卵巢癌细胞NK细胞杀伤肿瘤介导
- 截短型BAP31/GST基因重组质粒的构建及融合蛋白的表达、纯化和鉴定
- 2011年
- 目的构建编码截短型肿瘤抗原BAP31(△BAP31)与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(△BAP31/GST)进行纯化和初步鉴定。方法 PCR扩增编码△BAP31的基因片段,上下游分别引入EcoR I及Xho I酶切位点,亚克隆至含有GST标签的原核表达载体pGEX4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T1-△BAP31,将该载体转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达△BAP31/GST,用GST亲和层析分离纯化原核表达的△BAP31/GST,表达产物分别用SDS-PAGE和West-ern blot进行鉴定。结果重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达△BAP31/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量为40 000,与理论值相符,并主要以可溶性蛋白形式存在;经过对融合蛋白表达条件的优化,在IPTG浓度为1 mmol/L,诱导6 h目的蛋白表达量最高;灰度扫描分析发现,融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的70.6%,纯化产物的纯度最高可达94.5%,Western blot证实该△BAP31/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,分子量为△BAP31与GST分子量之和,提示为融合蛋白。结论成功构建了编码△BAP31基因原核表达载体pGEX4T1-△BAP31,利用大肠杆菌表达系统和GST亲和层析,获得了较高纯度的△BAP31/GST融合蛋白,为进一步研究肿瘤抗原BAP31的功能及开发以BAP31作为靶点的肿瘤疫苗提供了试验基础。
- 李海涛宋朝君孙元杰魏玉英李永明刘飞刘志佳张葵金伯泉杨琨
- 关键词：GST融合蛋白蛋白表达
- 肿瘤标志物CEA夹心ELISA检测试剂盒的建立及初步应用
- 2009年
- 李琦宋朝君田莹陈丽华李永明张葵金伯泉
- 关键词：肿瘤ELISA单克隆抗体
