李琦
- 作品数：114 被引量：490H指数：13
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- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析被引量：1
- 2003年
- 目的 确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法 应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 6截短体重组真核细胞表达载体pcDNA3 PTA1T1和pcDNA3 PTA1T2。测序正确后 ,转染COS7细胞 ,抗CD2 2 6分子多克隆抗体间接免疫荧光染色 ,流式细胞术检测CD2 2 6分子截短体的表达。表达成功后 ,采用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析 ,用一套CD2 2 6McAb检测与截短突变体的免疫反应性 ,从而确定CD2 2 6McAb识别CD2 2 6分子结构域的部位。结果 PCR扩增出CD2 2 6分子相应目的片段序列 ,定向克隆入pcDNA3真核表达载体 ,DNA序列测定正确。转染COS7细胞后 ,流式细胞术检测CD2 2 6截短体分子有较高水平的表达。CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1和FMU1～ 7均可识别CD2 2 6全长分子 ;LeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU4和FMU5与截短突变体PTA1T1和PTA1T2均无反应性 ;FMU3可结合PTA1T1分子 ,不结合PTA1T2分子 ;FMU6和FMU7均可结合PTA1T1及PTA1T2分子。结论 CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU3、FMU4和FMU5识别CD2 2 6分子胞膜外区D1结构域 ,其中FMU3识别的位点位于V1和V2环之间 ;FMU6?
- 贾卫刘雪松张新海朱勇张贇李琦杨琨欧阳为明宁双飞金伯泉
- 关键词：CD226PTA1基因表达
- 酶联免疫化学发光法检测SEB方法的建立
- 目的：建立测定SEB的酶联免疫化学发光法(CLIA),使其敏感性达到国外同类方法的检测水平.意义：金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)是一组可溶性单肽链蛋白,经典的SE分为SEA、SEB、SEC、SED、SEE五型.SE引起的食...
- 刘飞李永明董邦权宋朝君李琦李娜杨琨金伯泉
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B
- 硕士研究生《医学免疫学》教学初探被引量：9
- 2000年
- 金伯泉朱勇张新海杨琨李德敏刘雪松李琦张建平
- 关键词：医学免疫学教学方法硕士研究生
- 蓖麻毒素及其修饰物对U937细胞IL-1β和TNF-α的诱导作用被引量：5
- 1999年
- 蓖麻毒素（ｒｉｃｉｎ） 的抗癌作用是，借助于其抑制细胞的蛋白质合成而导致细胞死亡的毒性作用，但其缺点是其分子中的Ｂ 链含有半乳糖结合位点， 可非特异性的与真核细胞结合。本研究通过采用双功能剂ＳＰＤＰ 修饰ｒｉｃｉｎ 后，可达到部分或完全破坏ｒｉｃｉｎ 分子结构中的半乳糖结合位点。另外，用ＭＴＴ 法比较了修饰后的ｒｉｃｉｎ 与未修饰ｒｉｃｉｎ的细胞毒性，同时检测并比较了两者对细胞因子ＴＮＦα和ＩＬ１β的诱生作用。结果表明，修饰后的ｒｉｃｉｎ 与未修饰的ｒｉｃｉｎ 相比较，两者对Ｕ９３７ 细胞的毒性在时间效应和剂量效应上没有显著性差异。修饰后的ｒｉｃｉｎ 诱生ＴＮＦα的量比未修饰的ｒｉｃｉｎ 多，且时间早；而对于诱生ＩＬ１β来说，在２４ｈ 前两者差别不大，在４８ｈ 时，修饰的ｒｉｃｉｎ 则明显高于未修饰的ｒｉｃｉｎ 。提示ｒｉｃｉｎ 经ＳＰＤＰ 修饰后，毒性改变不大，但其诱生细胞因子ＴＮＦα和ＩＬ１β的量则高于未修饰的ｒｉｃｉｎ 。
- 董巨莹李琦王文学药立波苏成芝
- 关键词：蓖麻毒素修饰物IL-1Β抗癌作用
- 抗FITC单克隆抗体的制备及初步应用被引量：13
- 2003年
- 李琦朱勇贾卫刘雪松欧阳为明金伯泉
- 关键词：单克隆抗体
- 过敏性紫癜患儿血清白细胞介素-4-、6-、8及肿瘤坏死因子-α表达的意义被引量：27
- 2007年
- 目的探讨血清白细胞介素(IL)-4、-6、-8及肿瘤坏死因子α(TNF-α)在过敏性紫癜(HSP)患儿中表达及其临床意义。方法采用ELISA检测45例HSP患儿(其中20例并肾脏损害)及43例健康儿童血清IL-4、-6、-8及TNF-α水平,比较有和无并肾损害HSP患儿及HSP患儿与健康儿童细胞因子水平;分析IL-4、-6、-8与TNF-α是否存在相关关系。结果1.HSP患儿血清IL-4、-6、-8及TNF-α水平高于健康对照组(P<0.01);2.无肾损害HSP与紫癜性肾炎(HSPN)组血清IL-4、-6、-8水平均无统计学差异;HSPN组TNF-α水平高于无肾损害HSP组;3.HSP血清TNF-α水平与IL-4无相关(r=0.278 P>0.05);HSP患儿血清TNF-α水平与IL-8正相关(r=0.524 P<0.01)。HSP患儿血清TNF-α水平与IL-6正相关(r=0.670 P<0.01)。结论细胞因子IL-4、-6、-8和TNF-α可能参与HSP/HSPN发病过程。
- 潘凯丽白庆峰黄莹李琦
- 关键词：紫癜性肾炎白细胞介素-4白细胞介素-6白细胞介素-8肿瘤坏死因子-Α
- 凋亡诱导配体TRAIL与细胞膜脂筏形成的关系被引量：1
- 2005年
- 目的: 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与细胞膜微结构域脂筏的关系。方法: 采用间接免疫荧光流式细胞术, 分析K562细胞表面TRAIL分子的表达。用FITC标记的霍乱毒素B亚单位 (CTx)对K562细胞的脂筏进行染色; 用抗FITC单克隆抗体(mAb)交联脂筏后, 以兔抗TRAIL分子抗体及Cy3标记的羊抗兔抗体进行间接免疫荧光染色, 激光共聚焦显微镜分析TRAIL分子与脂筏微结构域的关系。结果: FITC -CTx和抗FITCmAb可使脂筏发生交联。脂筏交联的同时TRAIL分子发生聚集。动态观察表明, 抗FITC抗体作用 20min后, 脂筏发生交联, 作用 30min时交联最明显; 随着脂筏的交联, TRAIL分子发生聚集。抗FITC抗体作用 40min后, 脂筏交联程度减弱, 且TRAIL分子逐渐被排除于脂筏之外。结论: 抗FITC抗体可用于CTx-FITC脂筏染色后脂筏交联的研究。TRAIL分子可能与细胞膜脂筏微结构域有关。
- 贾卫庄然李琦曹云新刘雪松宋朝君金伯泉
- 关键词：脂筏TRAIL交联
- 含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用被引量：2
- 2003年
- 目的 :构建含 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区Ig融合蛋白编码基因的真核表达载体 ,并进行表达和初步鉴定。方法 :将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因 ,克隆入含 3C蛋白酶靶序列的Ig真核表达载体 p 3C Ig中。测序证实后 ,转染COS7细胞并进行瞬时表达。表达产物经亲和层析柱纯化 ,并通过免疫荧光染色及 3C蛋白酶酶切反应进行鉴定。结果 :经表达和纯化获得CD2 2 6胞膜外区的Ig融合蛋白。该融合蛋白可与表达于ECV30 4细胞表面的CD2 2 6配体有效结合。同时 ,融合蛋白的Fc段亦经 3C蛋白酶切除 ,从而获得CD2 2 6胞膜外区的真核表达分子。结论 :成功地获得了含有 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6分子胞膜外区Ig真核表达产物 ,为进一步对CD2 2 6分子进行结构和功能研究 。
- 张新海杨琨贾卫欧阳为明刘莹许晓光李琦金伯泉
- 关键词：真核表达融合蛋白
- 不同活化系统对CD4^+T细胞凋亡诱导配体表达的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨不同活化系统对CD4 + T细胞凋亡诱导配体在细胞内和膜表面表达的影响 .方法 :分别以PMA、PHA、SEB和单向混合淋巴细胞反应 (MLR)刺激PBMC ,以免疫荧光染色结合三色流式细胞术分析比较刺激前后的CD4 + T细胞中 ,3种主要的凋亡诱导配体TRAIL、FasL和TNF α在细胞内和膜表面表达的变化 .结果 :①FasL在静止CD4 + T细胞表面的表达基本为阴性 ,PMA和PHA上调其表达 ;FasL在静止CD4 + T细胞内有一定程度表达 ,PMA、PHA和MLR下调其在胞内的表达 .②TRAIL在静止CD4 + T细胞表面几乎不表达 ,SEB微弱上调其表达 ;TRAIL在静止CD4 + T细胞胞内有低水平表达 ,SEB和MLR微弱上调其表达 ,PHA则下调其表达 .③TNF α在静止CD4 + T细胞表面几乎不表达 ,PMA和PHA对其表达有一定上调作用 ;TNF α静止CD4 + T细胞胞内有一定水平表达 ,SEB和MLR明显上调其表达 .结论 :FasL、TRAIL和TNF α都是Th细胞重要的效应分子 。
- 韩卫宁曹云新张赟李琦刘雪松金伯泉
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞TRAILFASL
- 可溶型AXL检测试剂盒的建立及初步应用
- 2017年
- 目的制备酪氨酸激酶受体anexelekto(AXL)单克隆抗体(mAb),建立可溶型AXL(sAXL)的ELISA试剂盒并对肾综合征出血热患者血浆sAXL含量进行检测。方法采用商品化的AXL抗原作为免疫原,常规方法制备小鼠源性mAb,间接ELISA检测小鼠腹水效价,阵距法配对建立sAXL夹心ELISA试剂盒。结果成功制备了检测sAXL的ELISA试剂盒,肾综合征出血热患者血浆中sAXL水平明显高于正常人水平。结论制备了酪氨酸激酶受体AXL的mAb并成功制备了sAXL的ELISA试剂盒,适用于人血浆中sAXL的定量检测。
- 张春梅宋朝君李娜董芸田莹张赟金伯泉李琦
- 关键词：酪氨酸激酶受体单克隆抗体ELISA
