崔延伟
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DNA-EGS1386胞内诱导核酶P抑制人巨细胞病毒UL49基因的表达被引量：1
- 2009年
- 外部引导序列(EGSs)是一类与mRNA靶序列互补并能引导核酶P切割靶mRNA的小分子RNA。本实验构建稳定表达UL49基因的HeLa细胞系,设计合成了针对于人巨细胞病毒(HCMV)UL49基因的12ntDNA性质的EGS1386,通过转染稳定表达UL49基因的细胞系,荧光定量PCR和Western blotting检测细胞内目的基因UL49的表达情况。结果显示在DNA-EGS1386作用下UL49基因的表达量降低了50%,表明DNA-EGS1386可以有效引导人的核酶P切割目标mRNA。因此,DNA-EGS可以发展成为一种新的基因沉默技术和潜在的抗病毒试剂。
- 崔延伟曾志锋李弘剑李月琴周琪杨丹邹奕杨光周天鸿
- 关键词：基因沉默
- 腺病毒介导的人巨细胞病毒UL49基因小鼠模型的建立被引量：1
- 2010年
- 建立表达HCMVUL49基因的转基因小鼠,为抗病毒药物研究提供有效的实验动物模型。将UL49-GFP基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316中,构建重组质粒pDC316-UL49-GFP,与腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre通过脂质体介导共转染293细胞,重组产生腺病毒Ad-UL49-GFP,经PCR和Western blot鉴定正确后,大量扩增、纯化,制备高滴度重组腺病毒。纯化腺病毒经尾静脉注射感染小鼠,通过荧光定量PCR和Western blot方法,检测UL49基因在小鼠体内组织分布和表达时相。结果显示UL49基因在小鼠的心、肝、脾、肺、肾组织均有表达,并且表达量由高到低顺序依次是:肝、脾、肾、心、肺,在腺病毒感染第3天在各靶器官表达水平较高,此后逐渐下降,第14天时仅存在肝和脾中。表明表达UL49基因的小鼠模型构建成功。小鼠模型的成功建立为下一步筛选以UL49基因为靶的抗病毒药物奠定了基础。
- 杨丹崔延伟李弘剑李月琴周琪曾志锋张欣杨光周天鸿
- 关键词：人类巨细胞病毒腺病毒载体动物模型
- 改进型外部引导序列抑制人巨细胞病毒UL49基因的表达(英文)被引量：1
- 2009年
- 外部引导序列(EGS)技术(The EGS-based technology)是一种新型的基因沉默技术,能诱导内源性的核酶P(RNase P)对靶mRNA进行有效切割.以人类巨细胞病毒(HCMV)UL49基因mRNA片段为靶序列,基于前人实验基础上设计出更为精简与高效的改进型EGS(miniEGS),DNA片段长度仅为12bp.构建稳定表达HCMVUL49的细胞系,通过应用荧光定量PCR及Western印迹分别鉴定miniEGS对内源性UL49的抑制效率.结果显示,miniEGS能在HeLa细胞中能达到很高的转染效率(97.9%),并且在转染稳定表达UL49的HeLa细胞系后,发现UL49基因的mRNA与蛋白表达水平都出现明显下降(50%).研究表明,改进型的EGS序列不仅能有效抑制目的基因的表达,同时因其序列设计的精简性与高效性,可更好地应用到以后的抗病毒研究中.
- 周琪曾志锋李弘剑李月琴崔延伟杨丹邹奕杨光周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒基因沉默
- 腺病毒介导的HCMV UL49基因小鼠模型的建立
- 目的：建立表达人巨细胞病毒UL49基因的小鼠模型,为筛选以人巨细胞病毒UL49基因为靶的抗病毒药物奠定基础。 方法：（1）构建重组腺病毒穿梭质粒pDC316-UL49-GFP和阳性对照pDC316-GFP,分别...
- 崔延伟
- 关键词：人类巨细胞病毒腺病毒荧光定量PCR
- 文献传递
