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大肠杆菌麦芽糖结合蛋白增强MUC1多肽的抗肿瘤免疫活性研究: 目的：为开发有效的抗肿瘤疫苗，通过基因工程技术将大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)和肿瘤相关抗原MUC1进行基因融合，制备MUC 1-MBP融合蛋白，与不同佐剂进行联合，探讨MBP增强MUC1多肽的免疫活性及抗肿瘤作用.方...; 谢飞孙霞霞方芳王娟翟瑞萍陈谭秀王芳李琼书台桂香; 关键词：MBP T细胞应答肿瘤疫苗

卡介苗诱导小鼠脾脏树突状细胞分化作用研究被引量：1: 2012年; 目的探讨卡介苗(BCG)诱导小鼠脾脏树突状细胞分化作用。方法分别用PBS和BCG免疫小鼠,收集免疫鼠脾单核细胞培养,通过瑞士-姬姆萨染色观察脾单核细胞形态;流式细胞术分析脾巨噬细胞、树突状细胞表型;MTS法检测小鼠脾淋巴细胞增殖;ELISPOT法检测脾淋巴细胞IFN-γ的分泌;ELISA法测定小鼠脾单核细胞分泌IL-2情况。结果与对照组相比,BCG免疫组镜下可见体积大、带毛刺状突起的细胞较多;CD14(P<0.05)、CD40、CD11C、CD86、CD68表达水平增高;小鼠脾淋巴细胞刺激指数增高(P<0.05);分泌IFN-γ的细胞频数增多(P<0.01);脾单核细胞培养上清中IL-2水平明显增高(P<0.01)。结论 BCG可诱导小鼠树突状细胞分化并活化Th1细胞。; 张淑芳方芳孙霞霞李莹莹台桂香; 关键词：卡介苗树突状细胞细胞分化

双抗体间接夹心ELISA法检测血清MUC1蛋白方法的建立及其在肺癌诊断中的应用: 2013年; 目的:建立双抗体间接夹心酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒,检测血清黏蛋白1(MUC1)水平,探讨其在肺癌诊断中的应用,阐明血清MUC1蛋白检测的临床应用价值。方法:在前期制备的MUC1蛋白和兔抗人MUC1多克隆抗体的基础上,建立以鼠抗人MUC1单克隆抗体为包被抗体,兔抗人MUC1多克隆抗体为检测抗体的双抗体间接夹心ELISA方法,并通过对MUC1蛋白标准品的检测,绘制出标准曲线。临床上收集48例肺癌患者、7例肺良性疾病患者和20例健康人的血清,应用本研究建立的ELISA方法检测各组标本血清MUC1蛋白表达水平,绘制ROC曲线,确定最佳cut-off值,得出双抗体间接夹心ELISA方法检测肺癌的敏感度、特异度及约登指数。同时与临床应用的CA15-3试剂盒检测结果进行比较。结果:应用双抗体间接夹心ELISA法确定血清MUC1的临界值为1.98μg.L-1,检测肺癌的敏感度为62.5%,特异度为100%,约登指数为0.625 0。CA15-3试剂盒检测肺癌的敏感度为18.75%,特异度为100%,约登指数为0.187 5。结论:建立的双抗体间接夹心ELISA试剂盒检测肺癌有更高的敏感度和特异度,优于临床常用的CA15-3试剂盒。; 何秋立张旭王娟翟瑞萍乔彩霞孙霞霞倪维华高素君台桂香; 关键词：黏蛋白1 酶联免疫吸附法

超滤技术去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价被引量：3: 2014年; 目的:评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白(MUC1-MBP)溶液中内毒素的效果,阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法:选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌,分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6FF疏水层析(C6)(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化,并去除内毒素;采用SDS-PAGE分析蛋白纯度;鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果:SDS-PAGE分析,在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带,Quantity One分析纯度>96%;CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高,但2组比较差异无统计学意义(P>0.05);与CM组比较,CM+超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);与CM+C6组比较,CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);CM+超滤组与CM+C6+超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素,其中C6对去除内毒素几乎无作用;CM加超滤可有效去除内毒素,超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。; 王娟谢飞陈潭琇孙霞霞李琼书台桂香; 关键词：离子交换层析疏水层析超滤技术内毒素

表达人全长MUC1降低小鼠黑色素瘤细胞株B16细胞的恶性度: MUC1(Mucin 1)是粘蛋白家族的跨膜糖蛋白,异常过表达在腺癌以及多种血液肿瘤细胞表面,是近年被广泛关注的研究肿瘤疫苗的有效靶点。但对于MUC1过表达的生物学意义还不完全明了。近年来许多研究揭示MUC1除了在润滑、...; 王凤丽李琼书孙霞霞王娟台桂香; 关键词：MUC1 B16

MUC1基因沉默诱导肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用研究: 目的：膜结合型MUC1作为癌基因可导致正常细胞恶性转化，在乳腺癌、肺癌、胰腺癌等多种腺癌和某些血液系统恶性肿瘤的发生发展中起重要作用.最近有研究报道，在肝癌细胞中也发现MUC1异常表达，但对于MUC1在肝癌发生发展中的作...; 李琼书陈谭秀王凤丽孙霞霞倪维华王娟翟瑞萍台桂香; 关键词：MUC1 RNAI 肝癌基因沉默

不同佐剂对重组MUC1-MBP融合蛋白诱导的免疫活性的影响: MUC1粘蛋白是肿瘤相关抗原，由于正常组织和肿瘤组织表达的差异使其成为抗肿瘤治疗的理想靶点。近年本研究组研究发现大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（maltose binding protein, MBP）能够提高融合蛋白的免疫原性...; 孙霞霞; 关键词：佐剂免疫活性 TH1/TH2 肿瘤疫苗; 文献传递

超滤技术在去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价: 目的评价超滤技术在去除重组人MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果.方法采用LB培养基小量培养,经IPTG诱导工程大肠杆菌表达重组MUC1-MBP融合蛋白,分别用超声破碎、等电点沉淀法、CM Sepharose Fa...; 王娟谢飞孙霞霞李琼书王芳翟瑞萍倪维华台桂香; 关键词：超滤技术内毒素鲎试剂

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孙霞霞