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孙红颖

作品数:26 被引量:29H指数:3
供职机构:浙江大学药学院更多>>
发文基金:浙江省科技攻关计划浙江省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 17篇期刊文章
  • 5篇会议论文
  • 2篇专利
  • 1篇学位论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 15篇医药卫生
  • 9篇生物学

主题

  • 7篇抗原
  • 7篇肠毒素
  • 7篇超抗原
  • 4篇蛋白
  • 4篇生物学
  • 4篇生物学活性
  • 4篇葡萄球菌
  • 4篇球菌
  • 4篇细胞
  • 4篇克隆表达
  • 3篇毒素
  • 3篇毒素类
  • 3篇葡萄球菌肠毒...
  • 3篇金黄色葡萄球...
  • 3篇金黄色葡萄球...
  • 3篇金葡菌
  • 3篇金葡菌肠毒素
  • 3篇克隆
  • 3篇黄色葡萄球菌
  • 3篇基质

机构

  • 26篇浙江大学
  • 2篇第二军医大学
  • 1篇北京中医药大...

作者

  • 26篇孙红颖
  • 18篇陈枢青
  • 9篇丁丁
  • 7篇薛乔
  • 7篇潘映秋
  • 6篇应跃斌
  • 6篇陈静
  • 5篇李丹曦
  • 3篇王光柱
  • 3篇李楠
  • 2篇曹雪涛
  • 1篇万涛
  • 1篇李楠
  • 1篇姚彤炜
  • 1篇马丽
  • 1篇叶姗姗
  • 1篇史丽云
  • 1篇方多凤
  • 1篇黄鹏
  • 1篇张立煌

传媒

  • 5篇浙江大学学报...
  • 4篇药学学报
  • 3篇中国药学杂志
  • 2篇浙江省生物化...
  • 2篇中国免疫学会...
  • 1篇分析化学
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中国高等医学...

年份

  • 2篇2013
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 2篇2009
  • 4篇2008
  • 2篇2007
  • 5篇2006
  • 5篇2005
  • 2篇2004
  • 2篇2002
26 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
新型人半胱氨酸蛋白酶抑制物样分子,其编码序列及用途
本发明涉及了一种半胱氨酸蛋白酶抑制物样分子(cystatin like molecular,CLM)。本发明提供编码此蛋白分子的多核苷酸和经重组技术产生这种蛋白分子的方法。本发明还公开了这种半胱氨酸蛋白酶抑制物样分子及其...
孙红颖李楠曹雪涛
文献传递
小鼠肝脏内组成型雄烷受体基因表达剪切突变体的研究
2008年
目的:研究组成型雄烷受体(CAR)在小鼠肝脏内是否存在剪切突变体。方法:以小鼠的肝脏为原料提取核酸,采用逆转录的方法获得小鼠的组成型雄烷受体的cDNA序列,并将其构建到T载体中进行测序分析。结果:实验发现CAR在小鼠肝脏内有不同的剪切体存在。结论:剪切体的不同主要集中在受体结合部位,估计这种不同与不同外源性物质对受体的调节功能不同有关。
孙红颖陈静姜凯陈枢青
关键词:突变受体基因表达
人胸腺基质淋巴生成素基因重组腺病毒载体的构建及表达被引量:2
2005年
目的: 构建含人胸腺基质淋巴生成素基因(TSLP)的重组腺病毒载体并表达, 以研究其免疫学功能。方法: 将由人胚肺细胞扩增得到的TSLP基因, 克隆于真核表达载体pcDNA3. 1中, 再亚克隆至穿梭质粒pShuttle中, 并与腺病毒骨架载体pAdEasy -1共同转化大肠杆菌。以获得的重组质粒线性化后转染HEK293细胞, 并包装成病毒颗粒。采用PCR法对重组腺病毒基因进行鉴定, 并以Westernblot检测TSLP蛋白的表达。结果: 通过细菌内同源重组, 成功构建带有人胸腺基质淋巴生成素基因的重组腺病毒质粒, 转染 293细胞后, 包装的重组病毒经PCR检测表明, 基因组含有目的基因,病毒的滴度可达 1×1011pfu/L。Westernblot证实, 感染的肿瘤细胞中有相应基因产物的表达。结论: 通过菌内重组可高效制备带有特定基因的重组病毒。所制备的Ad -TSLP可成功表达相应基因产物, 为进一步研究这一新型细胞因子的功能奠定了基础。
史丽云孙红颖张立煌
关键词:基因重组腺病毒载体真核表达
金黄色葡萄球菌肠毒素C2中缺口的形成及影响因素的研究被引量:2
2009年
目的:探索影响金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)断裂的因素。方法:将纯化的肠毒素在不同条件下处理,观察环境因素对其断裂程度的影响。结果:重组SEC2断裂的位置可能位于其分子93位半胱氨酸与110位半胱氨酸之间。重组SEC2在37℃下、24 h内会完全产生断裂,在碱性条件下则加速其断裂的形成;H2O2会导致重组SEC2产生非特异性降解。当溶液中有β-巯基乙醇(2%)、苯甲基磺酰胺(5-10 mmol/L)、咪唑(1 mol/L)或大肠杆菌粗提物时,重组SEC2的断裂可被有效抑制。结论:肠毒素C2容易在特定位点发生断裂,可能与蛋白质本身结构有关。
应跃斌孙红颖丁丁李丹曦薛乔陈枢青
关键词:肠毒素类超抗原重组融合蛋白质类氢离子浓度蛋白酶抑制药
两种新型肠毒素SEG、SEI的融合表达、纯化及活性研究
目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素SEG与SEI全长基因,构建SEG与SEI的GST融合表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的重组SEG-GST与SEI-GST融合蛋白的生物学活性进行研究.方法通过聚合酶链式反应(Polyme...
李丹曦潘映秋丁丁孙红颖陈枢青
关键词:超抗原MTT法
文献传递
密码子优化提高重组金葡菌肠毒素O在大肠杆菌中的表达水平
2011年
目的:优化稀有密码子提高重组肠毒素O的表达量。方法:将带H is标签的肠毒素O成熟肽克隆至pET28a质粒上,采用PCR方法对15个稀有密码子进行突变,将突变后的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),并进行蛋白表达及活性鉴定。结果:通过稀有密码子优化,重组肠毒素O的表达量由菌液总蛋白的7.49%提高至19.8%;小鼠淋巴细胞增殖试验表明,通过密码子优化的肠毒素O具有刺激淋巴细胞增殖的作用,并且其增殖作用与未优化前的肠毒素O相当。结论:稀有密码子优化能够有效增加肠毒素O的表达量。
黄鹏孙红颖陈枢青
关键词:密码子质粒淋巴细胞
重组金葡菌肠毒素O的克隆表达及生物学活性分析被引量:3
2007年
克隆金葡菌肠毒素O(SEO)的全长基因,实现其可溶性表达,并对纯化的表达产物进行生物学活性分析。从金葡菌FRI 100菌株基因组中得到SEO基因,克隆至谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌,获高效表达。融合蛋白GST-SEO经Glutathione Sepharose 4B亲和纯化和凝血酶消化获重组SEO(rSEO)后,MTT法检测脾淋巴细胞的增殖作用,分析纯化后rSEO的生物学活性。测序结果表明,得到正确的肠毒素SEO基因序列,并获高效表达的融合蛋白;MTT结果表明,rSEO具有与SEC相当的显著的促淋巴细胞增殖以及抑制肿瘤细胞生长的能力。本研究成功克隆、表达、纯化了具有抗肿瘤生物学活性的rSEO蛋白,为进一步研究该蛋白的抗肿瘤机制奠定了基础,并有望成为一种新的超抗原制剂用于肿瘤的临床治疗。
潘映秋丁丁孙红颖陈枢青
关键词:肠毒素超抗原重组蛋白
共表达PXRLBD和SRC88以及PXR配体筛选的平衡透析模型的建立被引量:1
2008年
The aim of this study was to obtain the soluble protein of human pregnane X receptor ligand binding domain(PXRLBD) through the coexpression of PXRLBD and 88 amino acids of steroid receptor coactivator-1(SRC88) and apply the protein to constructing a new model of screening PXR ligands.Expression plasmid of pETDuet-1-SRC88-PXRLBD was constructed and transformed into Escherichia coli Rosetta(DE3) to coexpress PXRLBD and SRC88 via induction by IPTG at low temperature.Then an equilibrium dialysis model was constructed to study the interaction between PXRLBD and drugs including clotrimazole and dexamethasone,using HPLC as the analysis method.The results showed that the soluble protein of PXRLBD was obtained and the HPLC data indicated that clotrimazole bound to PXRLBD,while dexamethasone did not bind to PXRLBD,which indicated the successful establishment of a new method for studying the interaction between PXR and drugs.The new method may be useful in the screening of PXR ligands in vitro.
叶姗姗俞春娜陈静孙红颖陈枢青
关键词:孕烷X受体共表达配体高效液相色谱法
葡萄球菌肠毒素C2的克隆表达及其生物学活性
目的克隆金黄色葡萄球茼肠毒素SEC2全长基因,构建SEC2的表达戢体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应 (Polymerase chain reaction,PCR)...
薛乔应跃斌潘映秋李丹曦孙红颖陈枢青
关键词:超抗原大肠杆菌MTT法
文献传递
金葡菌肠毒素C_2的克隆表达及其生物学活性被引量:6
2006年
目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化。通过考察重组SEC2对淋巴细胞的增殖作用及其对肿瘤细胞杀伤活性的影响,对其超抗原活性和免疫学活性进行研究。结果得到正确的肠毒素SEC2基因序列并得到高效表达的融合蛋白,MTT法结果表明,重组SEC2表现出良好的促淋巴细胞增殖活性,且能够增强淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结论本研究成功克隆了SEC2基因,表达并纯化出具有抗肿瘤生物学活性的重组SEC2蛋白,为进一步对其分子抗肿瘤作用机制进行研究以及构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础。
薛乔应跃斌潘映秋李丹曦孙红颖陈枢青
关键词:超抗原大肠杆菌MTT法
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