周永静
- 作品数：31 被引量：84H指数：5
- 供职机构：江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰下调促肝细胞再生磷酸酶3基因表达对卵巢癌SKOV3细胞侵袭的影响被引量：2
- 2011年
- 卵巢癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一，病死率居妇科恶性肿瘤之首，严重威胁妇女的生命和健康。因卵巢癌发病比较隐蔽，诊断时多已有转移，导致患者生存率较低。因此，从分子水平寻找预测卵巢癌转移的生物学标志物，对采取有效的预防措施、选择新的治疗靶点、制定合理有效的综合治疗方案具有重要意义。
- 周永静龚丹丹陈琳赵松兰范钰
- 关键词：卵巢癌SKOV3RNA干扰细胞侵袭基因表达磷酸酶
- RNA干扰下调midkine基因表达对人乳腺癌细胞粘附和侵袭力的影响
- 2011年
- 目的探讨中期因子（midkine，MK）基因siRNA对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA—MB-231、MDA—MB-435、MDA—MB-468及ZR75—1细胞株，以荧光实时定量PCR方法检测MK基因mRNA表达；筛选出MK表达最高者。采用MK siRNA转染乳腺癌细胞株，分别以荧光实时定量RT—PCR和免疫荧光方法观察MK基因mRNA和蛋白水平，然后以四唑蓝（MTT）比色法检测细胞粘附性，以Boyden小室方法检测癌细胞侵袭能力。结果7株乳腺癌细胞中，MK均有不同程度的表达，以MCF-7细胞最高；以MKsiRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后，癌细胞MK基因mRNA和蛋白水平明显下降，且呈浓度依赖性；siRNA转染组细胞粘附数量明显下降，细胞侵袭力明显下降，均呈浓度依赖性（P〈0．01；P〈0．01）。结论MK基因在乳腺癌细胞粘附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染乳腺癌细胞，可抑制乳腺癌细胞粘附和侵袭能力。
- 俞力范钰邱志远周永静龚丹丹肖秀娣武正炎
- 关键词：乳腺癌RNA干扰
- rmhTNF腹腔灌注治疗恶性腹腔积液的临床观察
- 目的:观察重组人改构肿瘤坏死因子腹腔灌注治疗恶性腹腔积液的疗效及安全性。方法:117例晚期肿瘤恶性腹腔积液患者按血检结果分为四组,血红蛋白65—95g/l(A组):33例、胆红素2.5—10N(B组):28例,肌酐清除率...
- 周永静范钰满昌峰胡迎
- 关键词：腹腔灌注恶性腹腔积液
- 文献传递
- 上调人滋养层细胞表面抗原-2基因对人前列腺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化的影响
- 2015年
- 目的 观察过表达人滋养层细胞表面抗原-2（TROP-2）基因对人前列腺癌细胞的迁移和侵袭及上皮-间充质转化的影响.方法 将TROP-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建TROP-2基因过表达真核表达质粒.PC-3细胞分为3组：空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达组.转染PC-3细胞后,采用Western blot法观察TROP-2蛋白表达,采用Transwell方法检测癌细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot法检测癌细胞E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达.结果 成功构建TROP-2基因真核表达质粒.与空白对照组和空载对照组比较,TROP-2过表达组TROP-2蛋白明显升高.Transwell迁移实验结果显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为（132.6±2.2）、（130.8±1.8）和（189.6±2.6）个.与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;Transwell侵袭试验显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为（118.16±1.96）、（117.52±1.85）和（166.38±1.65）个.与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.Western blot结果显示,与空白对照组比较,TROP-2过表达细胞组E-钙黏蛋白表达降低,而N-钙黏蛋白表达增高.结论 TROP-2过表达可促进入前列腺癌细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与促进上皮-间充质转化有关.
- 范钰卫菲菲周永静龚丹丹张恒崔飞伦
- 关键词：前列腺癌上皮-间充质转化
- siRNA沉默S100A4基因表达抑制甲状腺癌细胞侵袭的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨S100A4基因对甲状腺癌细胞侵袭的影响和可能机制.方法 采用S100A4基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）转染处理人甲状腺癌ARO细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测S100A4基因和基质金属蛋白酶-2mRNA和蛋白水平;分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力.结果 siRNA转染组S100A4基因mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.000 1）.siRNA转染组软琼脂集落形成数和穿过滤膜的细胞数均明显下降,且呈浓度依赖性（P＜0.005;P＜0.005）.S100A4转染组MMP-2基因mRNA和蛋白水平明显下调.结论 采用S100A4 siRNA转染可抑制甲状腺癌细胞侵袭转移,其机制可能与下调MMP-2表达有关.
- 蒋鹏程范钰周永静
- 关键词：甲状腺肿瘤小干扰RNAS100A4
- 特异性小干扰RNA下调中期因子基因表达对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨中期因子（midkine，MK）基因小干扰RNA（siRNA）对黑素瘤细胞侵袭的影响。方法根据MK基因mRNA序列特点，设计并用化学方法合成3个siRNA，转染人黑素瘤A375细胞后，以荧光实时定量PCR方法筛选出效果最好的siRNA，以此siRNA转染人黑素瘤A375细胞。同时设空白对照组（不予任何处理）和空载对照组（仅用脂质体转染）。分别以荧光实时定量PCR和Western印迹方法观察MK基因mRNA和蛋白水平，然后以噻唑蓝法检测细胞黏附率，以Boyden小室模型方法检测细胞侵袭力。结果所设计的siRNA均能有效下调MK基因mRNA表达水平，以s3号作用最强。以该siRNA转染A375细胞后，荧光实时定量PCR结果显示，转染组A375细胞MK基因mRNA水平明显下降，且呈浓度（24h时r=-0．906；48h时r=-0．922；72h时r=-0．939，P均〈0．01）和时间（3．125nmol／L r：-0．889；6．25nmol／L r=-0．935；12．5nmol／L r=-0．928，P均〈0．01）依赖性。细胞黏附试验显示，3．125、6．25和12．5nmol／L siRNA组黏附率分别为73．66％±2．25％、49．36％±2．16％和28．35％±1．68％，呈浓度依赖性下降（r=一0．936，P〈0．01）。Boyden小室试验结果显示，3．125、6．25和12．5nmol／LsiRNA组穿过滤膜的细胞数分别为23．9±1．6、12．1±1．5、5．6±1．2，而空白对照组为36．8±1．5，穿膜细胞数呈浓度依赖性下降（r=-0．915，P〈0．05）。结论MK基因在黑素瘤细胞黏附、侵袭中发挥重要作用；以siRNA转染黑素瘤细胞抑制该基因表达可抑制黑素瘤细胞黏附、侵袭能力。
- 周永静龚丹丹邱志远彭辉勇范钰
- 关键词：黑色素瘤细胞系小分子干扰
- 长链非编码RNA LINCO1207在人胃癌组织的表达及其临床意义被引量：1
- 2019年
- 目的探讨长链非编码RNA LINC01207在人胃癌组织表达及临床意义。方法收集人胃癌和配对正常胃黏膜组织,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测组织中LINCO1207表达水平,分析其表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及癌胚抗原水平、是否幽门螺杆菌感染等临床病理因素的关系,应用SPSS 17.0统计软件分析。结果LINCO1207表达量与患者性别(χ2=0.333,P>0.05)、年龄(χ2=0.034,P>0.05)、肿瘤位置(χ2=3.782,P>0.05)、肿瘤直径(χ2=1.185,P>0.05)、组织分化程度(χ2=1.663,P>0.05)、癌胚抗原水平(χ2=0.310,P>0.05)及幽门螺杆菌感染(χ2=0.874,P>0.05)均无明显相关,但与肿瘤浸润深度(χ2=19.642,P<0.01)、淋巴结转移(χ2=20.055,P<0.01)、远处转移(χ2=10.506,P<0.01)、TNM分期(χ2=18.281,P<0.01)均显著相关。ROC曲线显示,LINC01207敏感度和特异度分别为0.783和0.850。结论LINCO1207在胃癌组织中呈高表达,有助于胃癌基因诊断和治疗。
- 范钰谷旭宇郎亚昆何莲龚丹丹周永静邹晨
- 关键词：实时定量聚合酶链反应肿瘤直径胃癌组织ROC曲线肿瘤位置
- VEGF基因沉默对胰腺癌细胞化疗敏感性和Akt信号通路的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 观察靶向血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）对胰腺癌BxPC3细胞化疗药物敏感性的影响,并探讨其可能机制.方法 将培养后的BxPC3细胞分为单纯BxPC3细胞组、脂质体处理组、错配siRNA转染组和VEGFsiRNA转染组.以5、10、20、100、200 nmol/L的VEGF siRNA转染BxPC3细胞.采用实时定量RT-PCR和ELASA法检测细胞VEGF mRNA和蛋白的表达;MTT法检测吉西他滨对各组细胞生长的影响;蛋白质印迹法检测BxPC3细胞Akt蛋白的磷酸化.结果 VEGF siRNA转染后,BxPC3细胞VEGF mRNA和蛋白呈浓度和时间依赖性明显下调,但对BxPC3细胞的增殖无明显影响.用0.2 μmol/L吉西他滨处理细胞48 h后,BxPC3细胞组、错配siRNA组及5、10、20 nmol/L siRNA组细胞的生长抑制率分别为（16.9±0.3）%、（17.3±0.3）%、（28.8±0.4）%、（52.2±0.3）%、（75.4±0.4）%,抑制率与siRNA浓度相关（r=0.928）.同时,siRNA转染后细胞Akt蛋白的磷酸化被明显抑制.结论 VEGF基因在胰腺癌BxPC3细胞耐药中起着重要的作用,其机制可能与Akt蛋白磷酸化有关.
- 王晓燕周永静龚丹丹徐军徐岷范钰
- 关键词：胰腺肿瘤化疗敏感性AKT
- RNA干扰下调人滋养层细胞表面抗原-2基因表达对前列腺细胞侵袭及尿激酶纤溶酶原激活物蛋白的影响被引量：4
- 2013年
- 目的 观察人滋养层细胞表面抗原-2（Trop-2）基因对人前列腺细胞侵袭的影响,并探讨其分子机制.方法 采用TROP-2基因小于扰RNA（siRNA）转染处理人前列腺PC-3细胞后,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot检测TROP-2基因mRNA和蛋白水平;采用Transwell小室法试验检测癌细胞侵袭能力;采用Western blot法检测癌细胞尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）蛋白变化.结果 siRNA转染组细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.01）.siRNA转染组穿过滤膜的细胞数明显下降,且呈浓度依赖性（P＜0.01）.Transwell小室试验结果显示,Con-A、Con-B、siRNA（5nmol/L）、siRNA（10 nmol/L）、siRNA（20 nmol/L）组穿膜细胞数分别为（128.16 ±3.89）、（127.58 ±3.56）、（102.56 ±3.28）、（76.38 ±3.25）和（39.89±3.18）个.Western blot结果显示,TROP-2 siRNA转染组uPA蛋白表达明显下调,且与浓度相关.结论 TROP-2基因在人前列腺癌细胞侵袭中发挥重要的作用,采用siRNA转染可抑制前列腺细胞侵袭,下调uPA表达,是其重要机制之一.
- 崔飞伦满昌峰周永静范钰
- 关键词：前列腺肿瘤尿激酶纤溶酶原激活物
- 特异性siRNA沉默TDGF-1基因表达对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响
- 2010年
- 目的 探讨RNA干扰（RNA interference,RNAi）沉默TDGF-1基因表达对乳腺癌细胞侵袭的影响.方法 根据TDGF-1基因序列特点设计3个小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）后,转染人乳腺癌MDA-MB-468细胞,用荧光实时定量RT-PCR筛选出效果最好的siRNA.以该siRNA转染处理乳腺癌MDA-MB-468细胞后,分别采用实时定量RT-PCR和western blot检测TDGF-1基因mRNA和蛋白水平,以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力.结果 根据TDGF-1基因序列特点设计的3个siRNA均能抑制TDGF-1基因mRNA水平,以S1效果最好.S1 siRNA转染组TDGF-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性（P＜0.001,P＜0.001）.体外试验发现,TDGF-1 siRNA转染可有效抑制乳腺癌细胞集落生长、侵袭和迁移能力,且与浓度相关（P＜0.005,P＜0.005,P＜0.005）.结论 TDGF-1在乳腺癌细胞迁移、侵袭中起着重要的作用;采用TDGF-1 siRNA转染可抑制乳腺癌细胞侵袭.
- 蒋鹏程范钰周永静武正炎
- 关键词：乳腺肿瘤小干扰RNA
