龚丹丹
- 作品数：24 被引量：56H指数：4
- 供职机构：江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 特异性小干扰RNA下调中期因子基因表达对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨中期因子（midkine，MK）基因小干扰RNA（siRNA）对黑素瘤细胞侵袭的影响。方法根据MK基因mRNA序列特点，设计并用化学方法合成3个siRNA，转染人黑素瘤A375细胞后，以荧光实时定量PCR方法筛选出效果最好的siRNA，以此siRNA转染人黑素瘤A375细胞。同时设空白对照组（不予任何处理）和空载对照组（仅用脂质体转染）。分别以荧光实时定量PCR和Western印迹方法观察MK基因mRNA和蛋白水平，然后以噻唑蓝法检测细胞黏附率，以Boyden小室模型方法检测细胞侵袭力。结果所设计的siRNA均能有效下调MK基因mRNA表达水平，以s3号作用最强。以该siRNA转染A375细胞后，荧光实时定量PCR结果显示，转染组A375细胞MK基因mRNA水平明显下降，且呈浓度（24h时r=-0．906；48h时r=-0．922；72h时r=-0．939，P均〈0．01）和时间（3．125nmol／L r：-0．889；6．25nmol／L r=-0．935；12．5nmol／L r=-0．928，P均〈0．01）依赖性。细胞黏附试验显示，3．125、6．25和12．5nmol／L siRNA组黏附率分别为73．66％±2．25％、49．36％±2．16％和28．35％±1．68％，呈浓度依赖性下降（r=一0．936，P〈0．01）。Boyden小室试验结果显示，3．125、6．25和12．5nmol／LsiRNA组穿过滤膜的细胞数分别为23．9±1．6、12．1±1．5、5．6±1．2，而空白对照组为36．8±1．5，穿膜细胞数呈浓度依赖性下降（r=-0．915，P〈0．05）。结论MK基因在黑素瘤细胞黏附、侵袭中发挥重要作用；以siRNA转染黑素瘤细胞抑制该基因表达可抑制黑素瘤细胞黏附、侵袭能力。
- 周永静龚丹丹邱志远彭辉勇范钰
- 关键词：黑色素瘤细胞系小分子干扰
- 树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗联合化疗对转移性结直肠癌患者血清微小RNA-21和微小RNA-106a的影响被引量：9
- 2015年
- 目的 观察树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）联合化疗对转移性大肠癌患者外周血微小RNA（miRNA,miR）-21和miR-106a表达的影响.方法 将39例转移性大肠癌患者随机分为两组,DC-CIK组23例采用XELOX方案＋DC-CIK进行治疗,对照组16例采用XELOX方案进行治疗,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测治疗前及治疗3个周期后两组患者外周血miR-21和miR-106a mRNA表达的水平,并观察患者的疗效及评分.结果 经治疗3个周期后,DC-CIK组、对照组miR-21和miR-106a mRNA相对表达量均下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;与对照组比较,DC-CIK组下降更明显（P＜0.05）.DC-CIK组有效率（73.9％）明显高于对照组（31.3％,P＜0.05）.两组Ⅲ＋Ⅳ度白细胞减少率的比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 DC-CIK细胞可有效提高结直肠癌整体治疗疗效.下调miR-21和miR-106a是其重要机制之一.
- 范钰卫菲菲方娜龚丹丹张恒徐永中
- 关键词：树突状细胞结直肠癌微小RNA微小RNA-21
- 长链非编码RNA LINCO1207在人胃癌组织的表达及其临床意义被引量：1
- 2019年
- 目的探讨长链非编码RNA LINC01207在人胃癌组织表达及临床意义。方法收集人胃癌和配对正常胃黏膜组织,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测组织中LINCO1207表达水平,分析其表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及癌胚抗原水平、是否幽门螺杆菌感染等临床病理因素的关系,应用SPSS 17.0统计软件分析。结果LINCO1207表达量与患者性别(χ2=0.333,P>0.05)、年龄(χ2=0.034,P>0.05)、肿瘤位置(χ2=3.782,P>0.05)、肿瘤直径(χ2=1.185,P>0.05)、组织分化程度(χ2=1.663,P>0.05)、癌胚抗原水平(χ2=0.310,P>0.05)及幽门螺杆菌感染(χ2=0.874,P>0.05)均无明显相关,但与肿瘤浸润深度(χ2=19.642,P<0.01)、淋巴结转移(χ2=20.055,P<0.01)、远处转移(χ2=10.506,P<0.01)、TNM分期(χ2=18.281,P<0.01)均显著相关。ROC曲线显示,LINC01207敏感度和特异度分别为0.783和0.850。结论LINCO1207在胃癌组织中呈高表达,有助于胃癌基因诊断和治疗。
- 范钰谷旭宇郎亚昆何莲龚丹丹周永静邹晨
- 关键词：实时定量聚合酶链反应肿瘤直径胃癌组织ROC曲线肿瘤位置
- VEGF基因沉默对胰腺癌细胞化疗敏感性和Akt信号通路的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 观察靶向血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）对胰腺癌BxPC3细胞化疗药物敏感性的影响,并探讨其可能机制.方法 将培养后的BxPC3细胞分为单纯BxPC3细胞组、脂质体处理组、错配siRNA转染组和VEGFsiRNA转染组.以5、10、20、100、200 nmol/L的VEGF siRNA转染BxPC3细胞.采用实时定量RT-PCR和ELASA法检测细胞VEGF mRNA和蛋白的表达;MTT法检测吉西他滨对各组细胞生长的影响;蛋白质印迹法检测BxPC3细胞Akt蛋白的磷酸化.结果 VEGF siRNA转染后,BxPC3细胞VEGF mRNA和蛋白呈浓度和时间依赖性明显下调,但对BxPC3细胞的增殖无明显影响.用0.2 μmol/L吉西他滨处理细胞48 h后,BxPC3细胞组、错配siRNA组及5、10、20 nmol/L siRNA组细胞的生长抑制率分别为（16.9±0.3）%、（17.3±0.3）%、（28.8±0.4）%、（52.2±0.3）%、（75.4±0.4）%,抑制率与siRNA浓度相关（r=0.928）.同时,siRNA转染后细胞Akt蛋白的磷酸化被明显抑制.结论 VEGF基因在胰腺癌BxPC3细胞耐药中起着重要的作用,其机制可能与Akt蛋白磷酸化有关.
- 王晓燕周永静龚丹丹徐军徐岷范钰
- 关键词：胰腺肿瘤化疗敏感性AKT
- 长链非编码RNA牛磺酸上调基因1在人胃癌组织的表达及临床意义被引量：1
- 2016年
- 目的探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1（TUG1）在人胃癌组织表达及临床意义。方法收集人胃癌和配对正常胃黏膜组织，采用荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测组织中TUG1表达水平，分析其表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、Lauren分型、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、是否印戒细胞以及脉管内有无癌栓等临床病理因素的关系，并作统计学分析。结果结果显示TUG1表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤直径、Lanren分型、组织分化程度、是否印戒细胞均元明显相关，但与肿瘤浸润深度（P〈0．01）、淋巴结转移（P〈0．05）、远处转移（P〈0.05）、TNM分期（P〈0．05）以及脉管内有无癌栓（P〈0．01）均显著相关。进一步研究结果显示，TUG1表达水平为影响胃癌患者预后的重要独立危险因素之一。结论TUG1可能是胃癌基因诊断和治疗中重要靶点之一。
- 范钰金鑫蒋孟林卫菲菲邹晨龚丹丹
- 关键词：胃肿瘤长链非编码RNA
- RNA干扰下调促肝细胞再生磷酸酶3基因表达对卵巢癌SKOV3细胞侵袭的影响被引量：2
- 2011年
- 卵巢癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一，病死率居妇科恶性肿瘤之首，严重威胁妇女的生命和健康。因卵巢癌发病比较隐蔽，诊断时多已有转移，导致患者生存率较低。因此，从分子水平寻找预测卵巢癌转移的生物学标志物，对采取有效的预防措施、选择新的治疗靶点、制定合理有效的综合治疗方案具有重要意义。
- 周永静龚丹丹陈琳赵松兰范钰
- 关键词：卵巢癌SKOV3RNA干扰细胞侵袭基因表达磷酸酶
- RNA干扰下调midkine基因表达对人乳腺癌细胞粘附和侵袭力的影响
- 2011年
- 目的探讨中期因子（midkine，MK）基因siRNA对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA—MB-231、MDA—MB-435、MDA—MB-468及ZR75—1细胞株，以荧光实时定量PCR方法检测MK基因mRNA表达；筛选出MK表达最高者。采用MK siRNA转染乳腺癌细胞株，分别以荧光实时定量RT—PCR和免疫荧光方法观察MK基因mRNA和蛋白水平，然后以四唑蓝（MTT）比色法检测细胞粘附性，以Boyden小室方法检测癌细胞侵袭能力。结果7株乳腺癌细胞中，MK均有不同程度的表达，以MCF-7细胞最高；以MKsiRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后，癌细胞MK基因mRNA和蛋白水平明显下降，且呈浓度依赖性；siRNA转染组细胞粘附数量明显下降，细胞侵袭力明显下降，均呈浓度依赖性（P〈0．01；P〈0．01）。结论MK基因在乳腺癌细胞粘附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染乳腺癌细胞，可抑制乳腺癌细胞粘附和侵袭能力。
- 俞力范钰邱志远周永静龚丹丹肖秀娣武正炎
- 关键词：乳腺癌RNA干扰
- 上调人滋养层细胞表面抗原-2基因对人前列腺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化的影响
- 2015年
- 目的 观察过表达人滋养层细胞表面抗原-2（TROP-2）基因对人前列腺癌细胞的迁移和侵袭及上皮-间充质转化的影响.方法 将TROP-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建TROP-2基因过表达真核表达质粒.PC-3细胞分为3组：空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达组.转染PC-3细胞后,采用Western blot法观察TROP-2蛋白表达,采用Transwell方法检测癌细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot法检测癌细胞E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达.结果 成功构建TROP-2基因真核表达质粒.与空白对照组和空载对照组比较,TROP-2过表达组TROP-2蛋白明显升高.Transwell迁移实验结果显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为（132.6±2.2）、（130.8±1.8）和（189.6±2.6）个.与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;Transwell侵袭试验显示,空白对照组、空载对照组和TROP-2过表达迁移细胞数分别为（118.16±1.96）、（117.52±1.85）和（166.38±1.65）个.与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.Western blot结果显示,与空白对照组比较,TROP-2过表达细胞组E-钙黏蛋白表达降低,而N-钙黏蛋白表达增高.结论 TROP-2过表达可促进入前列腺癌细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与促进上皮-间充质转化有关.
- 范钰卫菲菲周永静龚丹丹张恒崔飞伦
- 关键词：前列腺癌上皮-间充质转化
- 基于分子标志群的胃癌转化医学应用研究
- 范钰邹晨方娜徐同鹏崔飞伦龚丹丹郎亚昆陆上苏蒋孟林
- 该项目主要来自于江苏省重大临床专项基金（BE2015666）和国家自然科学基金（81672896、30840095）等课题支持，主要应用于针对胃癌转化医学应用领域；但在科研设计、思路和方法上对其他医学应用基础具有重要的借...
- 关键词：
- 关键词：胃癌肿瘤诊断肿瘤药物
- TDGF-1基因下调对人鼻咽癌细胞生长迁移侵袭的影响
- 2011年
- 目的探讨TDGF-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响。方法根据TDGF-1基因序列特点设计了siRNA,转染人鼻咽癌CNE-2细胞,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TDGF-1基因的mRNA和蛋白水平,以软琼脂集落形成试验观察癌细胞锚着不依赖性增殖能力,以划痕试验方法评测癌细胞的迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。结果 TDGF-1基因siRNA转染组TDGF-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(均P<0.001)。体外试验发现,TDGF-1 siRNA转染可有效抑制鼻咽癌细胞集落生长、侵袭和迁移能力,且与浓度相关(均P<0.005)。结论 TDGF-1在鼻咽癌细胞生长、迁移、侵袭中起着重要的作用;采用TDGF-1 siRNA转染可抑制鼻咽癌细胞侵袭。
- 沈荣范钰龚丹丹
- 关键词：鼻咽癌癌细胞侵袭癌细胞生长小干扰RNA
