吴美芹
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：招远市畜牧局更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- H9亚型禽流感病毒HA基因重组禽痘病毒的构建
- 禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类烈性传染病，高致病性禽流感已被世界动物卫生组织(OIE)列为急烈性传染病，近些年低致病性禽流感也大范围流行，尤其是H9亚型禽流感不仅给养禽业带来重大的经济损失，而且开始威胁人类健康。基...
- 吴美芹
- 关键词：HA基因传染机制禽痘病毒
- 文献传递
- 表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因的重组鸭瘟病毒的构建被引量：2
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需区的TK基因(约2.5kb),将其克隆入pUC19载体获得载体puDTK。根据已知载体pcDNA-LacZ的序列设计了一对引物,PCR扩增出pcDNA-LacZ上含CMV启动子、多克隆位点、SV40及LacZ的完整的基因表达盒插入puDTK的TK上,获得质粒puDTCL。根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列,设计引物从T-HA质粒上扩增出HA基因,克隆到puDTCL的表达盒的多克隆位点NheI与ApaI之间,成功构建含LacZ及HA基因的转移载体质粒puDTCL-HA。将这载体质粒与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑克隆筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的表达HA基因的重组鸭瘟病毒。
- 孙强强刘忠琛胡潇左青山吴美芹马晶李明义单虎
- 关键词：禽流感病毒鸭瘟病毒TK基因HA基因
- H9亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒构建
- 2009年
- 本试验构建了H9亚型禽流感病毒HA基因禽痘病毒转移载体,经转染、蓝斑克隆、筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的HA基因重组禽痘病毒。提取感染重组病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA进行PCR扩增,获得1.7kb的携带有外源目的基因片段。收集纯化的重组病毒CEF细胞,用H9亚型禽流感病毒多克隆血清作一抗,碱性磷酸酶标记的鸡IgG为二抗进行Western blot检测,结果表明重组痘病毒能在体外的CEF细胞表达HA糖蛋白。
- 吴美芹杨宾宾孙强强单虎李明义
- 关键词：禽流感病毒禽痘病毒HA基因重组禽痘病毒
- PRRSV和PCV-2二重PCR检测方法的建立及初步应用被引量：7
- 2010年
- 参考GenBank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因序列和猪圆环病毒2型ORF1基因序列,分别设计并合成了可用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的2对引物,扩增目的片段大小分别为421 bp和714 bp。在建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的单项PCR检测方法并优化单项PCR条件的基础上,建立了针对两种病毒的二重PCR检测方法。通过检测143份临床病料对二重PCR方法和单项PCR/RT-PCR方法进行了对比验证。结果显示,两者的总符合率在92.6%以上,表明该二重PCR检测方法可以用于临床病料的检测。
- 王林吴发兴吴美芹高许雷李平朱紫祥张燕霞张志李晓成单虎
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型二重PCR
