孙强强
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因的重组鸭瘟病毒的构建被引量：2
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需区的TK基因(约2.5kb),将其克隆入pUC19载体获得载体puDTK。根据已知载体pcDNA-LacZ的序列设计了一对引物,PCR扩增出pcDNA-LacZ上含CMV启动子、多克隆位点、SV40及LacZ的完整的基因表达盒插入puDTK的TK上,获得质粒puDTCL。根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列,设计引物从T-HA质粒上扩增出HA基因,克隆到puDTCL的表达盒的多克隆位点NheI与ApaI之间,成功构建含LacZ及HA基因的转移载体质粒puDTCL-HA。将这载体质粒与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑克隆筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的表达HA基因的重组鸭瘟病毒。
- 孙强强刘忠琛胡潇左青山吴美芹马晶李明义单虎
- 关键词：禽流感病毒鸭瘟病毒TK基因HA基因
- H9亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒构建
- 2009年
- 本试验构建了H9亚型禽流感病毒HA基因禽痘病毒转移载体,经转染、蓝斑克隆、筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的HA基因重组禽痘病毒。提取感染重组病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA进行PCR扩增,获得1.7kb的携带有外源目的基因片段。收集纯化的重组病毒CEF细胞,用H9亚型禽流感病毒多克隆血清作一抗,碱性磷酸酶标记的鸡IgG为二抗进行Western blot检测,结果表明重组痘病毒能在体外的CEF细胞表达HA糖蛋白。
- 吴美芹杨宾宾孙强强单虎李明义
- 关键词：禽流感病毒禽痘病毒HA基因重组禽痘病毒
- 表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组鸭瘟病毒的构建
- 禽流感(Avian influenza virus)是由禽流感病毒(AIV)引起的一种高度接触性传染病，几乎所有的野生及家养禽类都可感染，该病经常给养禽业造成严重的经济损失。安全有效的抗AIV疫苗一直是AIV研究的重点。...
- 孙强强
- 关键词：禽流感病毒鸭瘟病毒HA基因免疫反应
- 文献传递
