于芳
- 作品数：25 被引量：42H指数：4
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队指令性项目国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学机械工程更多>>
- 浅议应用多媒体教学方法的利与弊被引量：6
- 2002年
- 多媒体信息网络及其课件的应用是教学改革的一个重要方面,它以生动多样的形式,从多方面激发了学生的积极性,但也存在一些不利的影响,如青年教师过分依赖多媒体课件、学生的实践机会相对减少、师生之间交流减少等.
- 杨瑞华王枫于芳郑刚
- 关键词：多媒体教学教学改革医学教育
- 荧光内参在校正Caspase-3／7活性检测偏差中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的改进Caspase-3／7活性检测方法。方法在顺铂诱导的HeLa细胞凋亡模型中，分别利用传统的和改良的实验方法检测Caspase-3／7的活性变化，并与Western印迹实验结果进行方法学比较。结果改良的实验方法显示不同剂量顺铂诱导下，HeLa细胞Caspase-3／7活性有剂量依赖性增高，与Western印迹实验结果相一致，但传统实验方法显示HeLa细胞Caspase-3／7活性呈现先增高后降低的趋势。结论由于参测细胞数不同，导致这种Caspase-3／7活性检测方法不能真实反映细胞凋亡程度。本研究成功建立了一种新的改良型Caspase-3／7活性检测方式，这种检测方法可以排除不同凋亡诱导方式诱导细胞凋亡时所产生的因参测细胞数不同所造成的Caspase-3／7活性检测的误差。
- 晋亮杨国栋傅海燕卢晓昭韦梦影于芳卢兹凡
- 关键词：凋亡内参顺铂PARP
- 全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞MAGE家族分子表达的影响被引量：1
- 2006年
- 研究全反式维甲酸(ATRA)在诱导乳腺癌MCF-7细胞分化和凋亡过程中黑色素瘤相关抗原基因(MelanomaAssociatedAntigen,MAGE)家族分子的表达水平的变化,从而为其功能研究提供线索。六孔培养板培养乳腺癌MCF-7细胞至对数生长期,给以终浓度为10-6mol/L的ATRA的刺激,于不同时间点(0h,12h,18h,24h,36h,48h)收集细胞,RT-PCR检测MAGE家族中(MAGE-A1、MAGE-C1、MAGE-D1、Necdin)分子的表达水平。结果ATRA诱导不同时间的MCF-7细胞MAGE家族分子表达水平呈现MAGE酸性亚家族(Ⅰ型抗原)表达逐步下调,而MAGE碱性亚家族(Ⅱ型抗原)表达逐步上升的趋势。说明MAGE家族酸性和碱性分子均参与ATRA诱导MCF-7细胞分化、凋亡,而且可能发挥作用是相反的。
- 姚允怡杨国栋路凡雷初朝于芳黄博卢兹凡药立波
- 关键词：全反式维甲酸乳腺癌MCF-7细胞细胞分化
- MIR-122慢病毒表达载体构建及稳定转染HepG2细胞系
- 2012年
- 目的:构建人mir-122慢病毒表达载体,感染肝癌细胞HepG2,建立稳定表达mir-122的HepG2细胞系。方法:以人has-mir-122成熟序列,设计并合成引物,采用PCR的方法扩增目的基因,并连接到慢病毒表达质粒pGCSIL-GFP(含绿色荧光蛋白GFP基因)中。对重组质粒进行双酶切鉴定后,进行mir-122基因慢病毒(pGCSIL-GFP-miR-122)的包装及病毒滴度测定,用构建好的慢病毒表达载体感染HepG2细胞,qPCR检测感染后细胞中MIR-122的变化。通过流式细胞仪检测荧光蛋白GFP,westernblot检测mir-122靶分子CAT-1,验证pGCSIL-GFP-miR-122在HepG2细胞中的表达效果。结果:pGCSIL-GFP-miR-122经双酶切分析及测序,插入序列正确。qPCR检测显示转入病毒后mir-122在细胞中的表达显著提高。表明mir-122慢病毒表达载体构建成功。流式细胞仪根据GFP荧光筛选纯化感染后细胞,感染率达90%以上。Western blot显示mir-122明显抑制其靶分子表达。进一步验证pGCSIL-GFP-miR-122在细胞中的稳定表达。结论:成功构建mir-122慢病毒表达载体,并建立稳定表达的细胞系,为研究mir-122在人体所起的作用及功能机制打下基础。
- 张旭于芳聂勇战唐红卫梁琳琳陈蕊蕊
- 关键词：MIR-122慢病毒表达载体稳定转染HEPG2细胞
- 共轭亚油酸对乳腺癌细胞系SKBR3增殖的抑制作用被引量：4
- 2004年
- 目的比较共轭亚油酸 (CLA)和亚油酸 (LA)对乳腺癌细胞生长的影响 ,以探讨共轭亚油酸的抗肿瘤作用。方法采用体外培养乳腺癌细胞系SKBR 3,用细胞生长曲线和MTT试验观察细胞的生长状况 ,透射电镜观察细胞形态学变化 ,流式细胞仪检测细胞周期。结果细胞生长曲线和MTT试验均表明 ,CLA对SKBR 3细胞生长有明显的抑制作用 ,且随着作用浓度和作用时间的增加 ,抑制作用增强。细胞生长曲线显示 ,CLA各浓度组 (2 0 0、10 0、5 0 μmol·L 1)作用 5d后抑制率分别为 75 .0 %、5 7.9%、33.1% ;LA各浓度组 (2 0 0、10 0、5 0 μmol·L 1)作用 5d后抑制率分别为 38.4 %、2 5 .4 %、10 .1%。电镜观察可见CLA可以引起细胞凋亡 ,而LA未观察到明显的病理变化。流式细胞仪检测表明 ,2 0 0 μmol·L 1可使细胞周期分布发生明显改变。作用 6d后G1期为 72 .2 % ,并出现凋亡峰 ,而LA组及对照组G1期分别为为 5 6 .6 % ,5 0 .6 %。结论CLA可能通过抑制细胞增殖 ,诱导细胞凋亡等途径抑制癌症的发展。
- 于芳王枫高双斌史永亮季爱玲
- 关键词：共轭亚油酸亚油酸乳腺癌细胞凋亡
- QKI蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:获得原核表达的RNA结合蛋白QKI-7蛋白,并制备其兔抗QKI多克隆抗体。方法:将成功插入QKI-7编码区cDNA的PET32b(+)原核表达载体用热休克法转化BL21(DE3)感受态细菌,以IPTG诱导6×His-QKI-7融合蛋白的表达,分别经金属鳌合柱、反向柱和强阴离子交换柱进行层析纯化。经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,应用纯化的融合蛋白,分别以弗氏佐剂、聚丙烯酰胺凝胶、NC膜作为佐剂免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并以Western blot进行检测。结果:经表达并纯化的QKI-7蛋白纯度达到95%以上,应用纯化的融合蛋白以弗氏佐剂作为佐剂免疫新西兰大白兔后获得高滴度,特异性的抗QKI的多克隆抗体。结论:成功地表达并纯化了QKI-7蛋白,并制备了高滴度、高特异性的抗QKI多克隆抗体。采用弗氏佐剂作为免疫佐剂进行免疫的效果优于聚丙烯酰胺凝胶和NC膜。
- 黄博于芳王孝功白丽圆李华卢兹凡
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 共轭亚油酸对乳腺癌细胞系SKBr3生长与凋亡的作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :比较共轭亚油酸 (conjugatedlinoleicacid ,CLA)和亚油酸 (linoleicacid ,LA)对乳腺癌细胞生长的影响 ,以探讨共轭亚油酸的抗肿瘤机制 .方法 :采用体外培养乳腺癌细胞系SKBr3,细胞计数法测定细胞增殖抑制率 ,检测细胞生长状况 ,透射电镜观察细胞形态学变化 ,流式细胞仪检测细胞周期以及Western杂交检测ERK蛋白活化水平 .结果 :细胞计数法结果显示CLA对SKBr3细胞生长有明显的抑制作用 ,且随着作用浓度和作用时间的增加 ,抑制作用增强 .CLA各浓度组作用 5d后抑制率分别为 75 .2 %、5 7.9%、33.1 % ;LA各浓度组作用 5d后抑制率分别为 38.4 %、2 5 .4 %、1 0 .1 % .电镜观察可见CLA可以引起细胞凋亡 ,而LA组未观察到明显的病理变化 .流式细胞仪检测CLA作用后将细胞阻滞在G1期 ,作用 5d后G1 为 72 .2 % ,并出现凋亡峰 .对照组G1 期为5 0 .6 % .Western杂交显示CLA显著降低ERK1 / 2磷酸化水平 .结论
- 于芳王枫高双斌史永亮季爱玲
- 关键词：ERK
- 共轭亚油酸降血糖作用的实验研究
- 目的: 共轭亚油酸干预实验性Ⅱ型糖尿病大鼠后，观察血糖、胰岛素、C肽表达变化，探讨共轭亚油酸对实验性Ⅱ犁糖尿病大鼠血糖影响作用。
方法: wistarr雌性大鼠35只分成5组，正常对照组、糖尿病对照组、3组共轭...
- 张文斌季爱玲于芳侯祥红王枫
- 关键词：共轭亚油酸糖尿病胰岛素降血糖作用C肽大鼠模型
- 文献传递
- 表柔比星、脂质体多柔比星单药对乳腺癌细胞和树突状细胞生长的抑制作用以及构建CXCR4干扰载体
- 乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。在过去的几十年里,美国乳腺癌的发病率持续上升,但由于乳腺癌的早期发现和有效治疗使死亡率呈下降趋势。在癌症多种治疗中,细胞毒治疗,也就是化学药物治疗是非常重要的手段之一。蒽环类药物是一种具...
- 于芳
- 关键词：乳腺癌阿霉素CXCR4
- 文献传递
- 运铁蛋白受体调节因素的研究进展
- 2000年
- 综述了运铁蛋白受体在铁吸收、利用中的作用及影响运铁蛋白受体的各种因素 。
- 于芳
- 关键词：TFR铁缺乏症
