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于洋

作品数：18 被引量：41H指数：3
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文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 18篇医药卫生

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  • 9篇载脂蛋白
  • 9篇脂蛋白
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  • 3篇聚合酶
  • 3篇聚合酶链反应
  • 3篇合酶
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机构

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  • 4篇瑞典隆德大学
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  • 1篇常州市妇幼保...

作者

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  • 5篇姚霜
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  • 1篇2012
  • 1篇2011
共 18 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
载脂蛋白M调节Ana-1细胞胆固醇的摄取和外流被引量：2
2017年
目的探讨载脂蛋白M（apoM）在胆固醇的摄取和外流中的作用。方法以不同浓度NBD-胆固醇孵育Ana-1细胞。观察胆固醇浓度和孵育时间对Ana-1细胞摄取胆固醇的影响。利用腹腔巨噬细胞富集方法，采集不同基因型小鼠的腹腔巨噬细胞，观察胆固醇摄取的差异。10μmol／LNBD．胆固醇孵育Ana-1细胞4h后，分别用含或不含apoM的诱导外流液干预细胞。用荧光酶标仪检测荧光信号强度以反映胆固醇的摄取和外流。结果在体外，Ana-1细胞对NBD-胆固醇的摄取在2．5～10μmoL／L的浓度范围内具有浓度依赖性。巨噬细胞对胆固醇的摄取在6h达峰值，且达峰时间不受胆固醇孵育液浓度和巨噬细胞基因型的影响。6h达平台期后，apoM／SR—BI基因双敲除小鼠的腹腔巨噬细胞对胆固醇的摄取率明显低于SR—BI基因敲除小鼠和apoM基因敲除小鼠（t=6．8、13．66，P〈0．05）。在体外，apoM^＋HDL诱导组的胆固醇外流率明显大于apoM—HDL组（24．65％±0．93％对10．85％±0．64％，P=0．0003）。与单独apoM—HDL组相比，加入apoM重组蛋白可抑制apoM—HDL组的胆固醇外流。结论在体外，apoM参与了腹腔巨噬细胞对胆固醇的摄取。apoM能调节HDL介导的胆固醇外流。
郑凡罗光华姚霜于洋张俊张晓膺徐宁郑璐
关键词：载脂蛋白类高密度脂蛋白胆固醇B族I型清道夫受体
鉴定载脂蛋白M基因敲除小鼠的实时荧光定量PCR法的建立
2015年
目的建立新型的载脂蛋白M(apolipoprotein M,apo M)基因敲除小鼠的鉴定方法。方法根据荧光PCR原理,分别设计野生型和敲除型apo M基因的引物和探针,并通过6-羧基荧光素(FAM)和3H-吲哚菁染料(CY5)双荧光通道的扩增曲线判断小鼠的基因型。结果野生型小鼠仅在FAM通道有扩增曲线,敲除型小鼠仅在CY5通道有扩增曲线,杂合型小鼠则在FAM及CY5通道均有扩增曲线。结论建立的实时荧光定量PCR法经济、快速、简单、准确、易判断,适用于小鼠apo M基因型的鉴定。
于洋郑璐梁云潘丽莉张俊魏江喻妙梅罗光华
关键词：载脂蛋白M基因型基因敲除实时荧光定量PCR
人锌指蛋白23在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义被引量：3
2011年
目的 分析hZNF23在人HCC组织及HepG2细胞系中的表达情况,以探讨其与HCC临床病理特征和细胞凋亡的关系.方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测37例HCC患者（按Edmondson分为两组,Ⅰ＋Ⅱ级17例,Ⅲ＋Ⅳ级20例;按临床分为3组,HCC合并肝硬化和HBV感染组31例,HCC合并肝硬化和HCC合并HRV感染组各3例）癌组织和其癌旁肝组织标本中hZNF23及内参GAPDH mRNA的表达水平,并分析其与HCC临床病理特征的关系;体外培养HepG2细胞后,分为4组（对照组、1.25、2.5和5 μg/ml顺铂组）或6组（对照组、1.25、2.5、5、10和20μg/ml顺铂组）.采用四唑盐比色法（MTT）和流式细胞仪膜联蛋白V/碘化丙啶染色法检测与观察HepG2细胞的增殖及凋亡情况;实时荧光定量RT-PCR法检测HepG2细胞在不同浓度的顺铂诱导凋亡后,hZNF23及内参GAPDH mRNA的表达水平.结果 37例HCC患者癌组织及其癌旁组织标本中hZNF23相对表达量分别为8.84（3.59～15.05）和22.20（13.85～42.90）,差异有统计学意义（U=259.5,P＜0.01）.Edmondson Ⅰ＋Ⅱ级HCC组织hZNF23 mRNA相对表达量为12.80（4.80～19.50）,高于Ⅲ＋Ⅳ级的5.01（2.88～11.68）,且差异有统计学意义（U=99.00,P＜0.05）;合并肝硬化组为9.92（3.80～15.25）,未合并肝硬化组为3.21（2.78～3.60）、合并HBV感染组为9.09（3.72～15.25）,无HBV感染组为2.48（1.79～12.10）,合并肝硬化组与未合并肝硬化组、合并HBV感染组与未合并HBV感染组比较,其hZNF23 mRNA表达量差异均无统计学意义（U值分别为16.00和24.00,P均＞0.05）.顺铂作用于HepG2细胞24 h后,用MTT检测,顺铂明显抑制HepG2细胞增殖;膜联蛋白V/碘化丙啶染色法检测细胞凋亡率依次为（0.9±0.2）%、（4.2±0.3）%、（9.8±4.3）%、（23.0±6.0）%,顺铂显著诱导HepG2细胞凋亡,且呈剂量依赖性（F=27.890,P＜0.01）.实时荧光定量RT-PCR法检测1.25、2.5、5μg顺铂诱导的HepGR细胞组hZNF23 mRNA相对表达量依次为�
施媛萍郑璐罗光华魏江张俊于洋
关键词：原发性肝细胞肝癌锌指蛋白逆转录-聚合酶链反应凋亡
红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤被引量：23
2015年
目的研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)预处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再使用1 mmol/L Hcy与不同浓度红景天苷共同作用HUVEC。24 h后,MTT法检测细胞存活率。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的基因表达水平,Western blot检测Bip、CHOP蛋白表达水平、PKR内质网激酶(PERK)及内质网核信号转导蛋白1α(IRE1α)磷酸化水平。结果与正常对照组比较,Hcy组细胞存活率降低,Bip和CHOP的基因和蛋白水平升高,PERK和IRE1α的磷酸化水平升高(P<0.05)。与Hcy组比较,高浓度红景天苷(300μmol/L)与Hcy共同作用后细胞存活率升高,Bip和CHOP的基因和蛋白表达水平下降,PERK和IRE1α的磷酸化水平下降(P<0.05)。结论红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。
朱琳王彦军俞天虹罗光华魏江于洋贾方孙建辉
关键词：人脐静脉内皮细胞高同型半胱氨酸血症红景天苷内质网应激
基于二维PCR技术的高危型人乳头瘤病毒及相关肿瘤抑制基因 p53和 RB1的分型检测方法
2024年
目的应用高通量二维PCR技术(2D-PCR), 建立一种单管一步法检测和鉴定宫颈细胞中16种高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)亚型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、73、82)、p53(rs1042522)和RB1(rs3092905)基因型的方法。方法根据16种不同亚型HR-HPV、p53及RB1基因DNA序列设计特异性引物, 同时将待测靶基因p53及RB1基因作为评判标本取样及PCR扩增成功与否的内参基因。在3个荧光检测通道中, 采用相应标签标记不同亚型HR-HPV、p53及RB1的上游引物, 并构建完善的2D-PCR检测体系。应用该方法检测804份来源于常州市第一人民医院2022年12月至2023年8月妇科门诊的宫颈刷样本, 将检测结果与PCR-反向点杂交法、流式荧光杂交法、单重实时荧光定量PCR法分别进行一致性比较;同时采用Sanger测序法检测p53和RB1的基因型。采用Kappa检验评价2D-PCR法和其他方法间的一致性。结果 2D-PCR可通过FAM、HEX和Alexa Fluor568通道的特征性熔解谷对16种HR-HPV型别和p53、RB1的基因型进行准确区分和鉴定。2D-PCR法与PCR-反向点杂交法具有较高的一致性(Kappa=0.699), 与流式荧光杂交法具有更高的一致性(Kappa=0.793), 和单重荧光定量PCR法的一致性Kappa=0.880(95%CI 0.862~0.907)。以Sanger测序法为金标准, 2D-PCR法检测p53、RB1基因型的准确度为100%。p53 rs1042522 位点3种基因型(G/G型、G/C型和C/C型)的分布频率为32.09%(258/804)、49.88%(401/804)和18.03%(145/804), RB1 rs3092905位点检出基因型均为A/A型。结论成功开发了一种2D-PCR方法, 用于高危型HR-HPV型别鉴定与宫颈癌相关肿瘤抑制基因p53和RB1的基因分型。
张俊姚霜于洋喻妙梅罗光华
关键词：人乳头瘤病毒基因P53
游离脂肪酸下调载脂蛋白M的表达及其机制被引量：1
2013年
游离脂肪酸（FFA）是构成人体的重要成分,参与血脂代谢.研究表明,FFA水平升高可导致外周胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗的个体载脂蛋白M（ApoM）水平下降[1].本研究旨在观察FFA水平升高是否会直接下调ApoM并探讨其机制.一、材料和方法大鼠血浆FFA浓度检测、肝脏组织中mRNA的提取、逆转录、实时定量聚合酶链反应和PCR芯片（Qiagen公司）反应严格参照试剂盒说明书操作.大鼠ApoM和内参照基因β-肌动蛋白的引物和探针由上海生工生物工程有限公司合成.统计学分析参照文献[2].
施媛萍冯悦华牟琴峰张俊于洋张晓膺徐宁罗光华
关键词：载脂蛋白M游离脂肪酸实时定量聚合酶链反应Β-肌动蛋白APOM大鼠血浆
载脂蛋白M基因rs707921位点多态性与冠心病易感性的关系被引量：4
2017年
目的检测载脂蛋白M(ApoM)基因rs707921位点的基因多态性,探讨其与冠心病(CHD)的相关性。方法采用单荧光标记探针技术检测111例CHD患者及248例对照组的ApoM rs707921位点单核苷酸多态性,分析其基因型和等位基因频率的分布情况。结果 ApoM rs707921位点3种基因型(AA型、AC型和CC型)在CHD组中分布频率为1.8%、13.5%和84.7%,在对照组中分布频率为2.0%、25.4%和72.6%,两组差异有统计学意义(P=0.039);ApoM rs707921位点A、C等位基因的频率在CHD组和对照组中分布频率分别为8.6%、91.4%和14.7%、85.3%,两组比较差异有统计学意义(P=0.023)。CHD组中AC+AA基因型者甘油三酯水平显著低于CC基因型者(P=0.043)。CHD组rs707921位点多态性不同基因型间冠状动脉病变严重程度差异无统计学意义(P>0.05)。结论ApoM基因rs707921位点A等位基因可能降低CHD的发病风险,但与CHD的严重程度无关。
俞天虹于洋郑璐柯海燕杨晓宇杨玲孙晋亮邵山罗光华周瑞珏
关键词：载脂蛋白M冠心病单核苷酸多态性
棕榈酸下调载脂蛋白M表达及其机制研究
2014年
目的明确棕榈酸对载脂蛋白M（apolipoproteinM，ApoM）表达的影响及其机制。方法用不同浓度棕榈酸处理人肝癌细胞株（HepG2细胞），采用实时定量PCR及PCR芯片分析棕榈酸对ApoM表达的影响和可能的机制。分别用棕榈酸（1mmol／L）和（或）PI-3K抑制剂LY294002（LY，10μmol／L）、蛋白激酶C抑制剂GFl09203X（GFX，2μmol／L）以及PPARβ／δ的拮抗剂GSK3787（10μmoL／L）处理HepG2细胞，实时定量PCR检测ApoM相关基因表达水平。结果0、0．25、0．5及1mmol／L棕榈酸分别作用于HepG2细胞后，ApoMmRNA表达水平显著下降，且呈剂量依赖性（P〈0．01）。人胰岛素信号通路PCR芯片检测结果显示，棕榈酸通过其中的6条信号途径影响HepG2细胞的增殖。LY对HepG2细胞ApoMmRNA表达的影响差异无统计学意义（P〉0．05），且LY不能逆转棕榈酸下调HepG2细胞ApoMmRNA的表达。GFX明显降低ApoMmRNA的表达水平（P〈0．05），但GFX不影响棕榈酸降低ApoMmRNA的效应。1mmol／L棕榈酸显著升高HepG2细胞PPARp／8mRNA水平（P〈O．001）；PPARB／8拮抗剂GSK3787对ApoMmRNA表达的影响无统计学意义（P〉0．05）；但其能够显著抑制棕榈酸降低HepG2细胞ApoM mRNA的效应（P〈0．05）。结论棕榈酸通过PPARβ／δ途径下调HepG2细胞ApoM基因表达，详细机制还需进一步研究。
施媛萍冯悦华牟琴峰于洋张俊张晓膺徐宁罗光华
关键词：载脂蛋白M棕榈酸实时定量PCR
去甲肾上腺素对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响被引量：1
2017年
目的观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTT法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡情况。结果经0.1、1、10、50μmol/L NE处理24、48 h,HepG2细胞OD值显著下降(P均<0.05),L-02细胞OD值无明显变化。10μmol/L NE作用于HepG2细胞可见典型的凋亡形态学改变,胞质收缩、深染,核染色质浓缩;L-02细胞在NE作用前后形态学均无明显改变。HepG2细胞加入10μmol/L NE后部分细胞呈绿色(为早期凋亡表现),加入50μmol/L NE后部分细胞膜呈绿色,细胞核呈红色(为晚期凋亡表现);L-02细胞均未显示有荧光。0.1、1、10μmol/L NE作用于HepG2细胞24 h后,其凋亡率均显著高于对照组(0μmol/L NE),且呈剂量依赖关系(P均<0.05);而上述浓度NE作用于L-02细胞24 h后,其凋亡率较对照组先增高后降低(P均<0.05)。结论 NE可以抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,而对L-02细胞增殖和凋亡没有影响,提示其在特定类型肝癌临床治疗中具有潜在价值。
施媛萍施媛萍罗光华郑璐魏江
关键词：去甲肾上腺素人肝癌细胞HEPG2
慢性阻塞性肺疾病患者人载脂蛋白M基因单核苷酸多态性检测方法的建立
2017年
人载脂蛋白M（apolipoprotein M,ApoM）基因定位于6号染色体短臂p21.31,其cDNA编码188个氨基酸序列,主要存在于人血浆高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）中,参与前β-HDL的形成,调节胆固醇的逆转运[1-2].另外,ApoM是1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）的生理性载体,ApoM结合S1P后,能够限制单核细胞黏附到血管内皮细胞从而起到抗炎作用[3].
于洋张俊乔莹莹潘丽莉李巨章毛慧慧魏江张晓膺徐宁罗光华
关键词：慢性阻塞性肺疾病患者载脂蛋白M基因6号染色体短臂1-磷酸鞘氨醇高密度脂蛋白
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