于洋
- 作品数：54 被引量：55H指数：4
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目国家自然科学基金辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学政治法律更多>>
- 绿色荧光蛋白转基因小鼠模型的建立及胚胎冷冻保种被引量：3
- 2007年
- 目的建立绿色荧光蛋白转基因小鼠模型,并采取胚胎冷冻的方法进行保种。方法通过原核显微注射法,把线性化、纯化后的外源基因pEGFP注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠。经鉴定对有表达的转基因鼠进行胚胎冷冻保种。结果移植注射胚胎385枚给30只假孕小鼠共出生了306只后代鼠,经PCR和southern blot检测得到5只阳性小鼠。F2代转基因鼠胚胎冷冻240枚胚胎。结论通过显微注射法使外源基因pEGFP在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP的转基因小鼠模型。
- 汪瑛杨葳郑志红王惟于洋董婉维张梅英王禄增
- 关键词：GFP显微注射法转基因小鼠胚胎冷冻
- 改良次全弓置换加支架象鼻技术治疗Stanford A型主动脉夹层
- 目的:
总结和评价通过“改良”次全弓置换加支架象鼻技术治疗Stanford A型主动脉夹层患者的临床疗效。
方法:
2009年12月至2011年1月,我科接收的47例Stanford A型主动脉夹层患者...
- 于洋
- 关键词：主动脉夹层临床疗效
- 文献传递
- 5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备
- 目的建立5-脂氧化酶转基因小鼠,用于动脉粥样硬化的发病机制的研究。方法通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段(6.8kb)导入BDF1受精卵雄原核中,共注射166枚受精卵,然后将90枚受精卵细胞植入同期受孕的受体母鼠...
- 张梅英杨葳李兆阳周生来于洋王惟秦英郑志红王禄增
- 关键词：潮霉素饲养层转基因
- 文献传递
- FVB小鼠超排卵及胚胎冷冻技术的研究被引量：7
- 2006年
- 目的为制备FVB转基因小鼠及保种繁殖提供最佳超排周龄及胚胎冷冻方法。方法对4—6周、6．8周、8．10周FVB小鼠进行超数排卵效果的比较及采用体外培养受精卵至2-cell法和输卵管吹卵法两种不同方法收集2-cell受精卵进行胚胎冷冻。结果4．6周雌鼠经超排后回收的受精卵（24．6个）明显高于6—8周龄、8—10周龄的FVB雌鼠（14．5个、16．2个），差异有显著性；两种方法回收的2-cell受精卵经冷冻保存后，Ⅱ组受精卵解冻后2-cell形态正常的胚数（106个）高于I组解冻后2-cell形态正常的胚数（90个），但两者无显著性差异。结论本研究将为制备FVB转基因小鼠及转基因动物的种系保存和繁殖提供了基础。
- 董婉维周生来杨葳于洋张梅英史晓萍王禄增
- 关键词：小鼠超排卵胚胎冷冻
- TNNT3^(R69H)突变转基因小鼠模型的建立
- 2012年
- 目的建立TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型。方法构建pEGFP-TNNT3(R69H)转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pEGFP-TNNT3(R69H)注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR和Southern blot方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western blot的方法检测TNNT3基因表达。结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎82枚,出生40只子代鼠,经PCR和Southern方法检测得到5只转基因阳性小鼠。对其子代小鼠进行RT-PCR、Western blot检测结果显示,TNNT3在转基因小鼠心脏和骨骼肌中表达量明显增多。结论通过显微注射法使外源基因pEGFP-TNNT3(R69H)在小鼠基因组中整合,成功建立了TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型。
- 李兆阳吕相川汪瑛杨葳于洋周生来王惟张梅英郑志红
- 关键词：转基因小鼠显微注射
- SD大鼠超数排卵的优化被引量：1
- 2015年
- 目的通过对鼠龄及激素剂量的控制研究其对SD大鼠排卵的影响。方法分别采用三种不同剂量PMSG／hCG组合（PMSG／hCG：20IU／20IU、25IU／25IU、30IU／30IU）对4、5、6周龄的SD大鼠进行超数排卵处理，以超数排卵总卵数、正常受精卵数、异型卵数作为评判标准，确定最佳超排剂量及鼠龄。结果20IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎24．72枚、33．12枚、15．22枚，其中正常受精卵：21．58枚、29．1枚、13．1枚，异型卵：2．01枚、1．01枚、2．12枚；25IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎37．63枚、43．62枚、20．78枚，其中正常受精卵22．67枚、38．6枚、18．5枚，异型卵：2．82枚、1．23枚、2．28枚；30IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎51．69枚、61．36枚、30．2枚，其中正常受精卵47．2枚、60．8枚、25．6枚，异型卵：1．23枚、0．56枚、1．3枚。结论5周龄，激素剂量30Iu为大鼠超排的最适周龄及最佳激素剂量，为基因工程动物制备及胚胎冷冻实验提供技术保障。
- 张婀娜郎雪楠赵文陈雪婷董婉维周生来于洋王惟张梅英郑志红
- 关键词：超数排卵激素周龄SD大鼠
- WNK4转基因小鼠的建立
- 2007年
- 目的制备WNK4转基因小鼠模型。方法通过显微注射法把线状WNK4基因注射入FVB小鼠受精卵雄原核中,然后将受精卵细胞移植于受体假孕母鼠输卵管内,发育产生子代小鼠。结果产生出112只F0代小鼠。鼠尾基因组DNA经PCR法检测1只阳性,并进行测序。结论通过显微注射法,外源基因WNK4在FVB小鼠基因组中得到整合,将对研究WNK4基因功能和与高血压疾病发病机制的作用和关系提供了有效的动物模型。
- 董婉维张梅英郑志红王唯于洋吕晶玉史晓萍王禄增赵彦艳
- 关键词：小鼠转基因
- 乙醇干预对新生SD大鼠原代心房肌细胞乙酰胆碱敏感性钾通道组成性激活电流和配体激活电流的影响
- 目的： 急性乙醇中毒可能导致既往无心脏病史的健康人出现严重的急性心律失常，其中以房颤最为常见。研究表明房颤心房肌细胞中乙酰胆碱敏感性钾通道的组成性激活电流显著增大，此效应与PKCε蛋白表达上调相关。我们的先前研究证实:...
- 于洋
- 关键词：心房肌细胞
- 具潮霉素B抗性的NIH3T3细胞饲养层的制备
- 2005年
- [目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增
- 关键词：转染ES细胞
- MnTBAP对鼠面神经元损伤后凋亡的抑制作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨外源性药物锰卟啉(MnTBAP)对面神经元凋亡的抑制作用。方法:制作大鼠面神经切断伤模型,分别于术后1d、3d、7d、14d、28d和42d时,利用免疫组织化学技术检测面神经元cyto-c、caspase-9和caspase-3的表达;利用原位末端标记法(TUNEL法)检测面神经元的凋亡情况。采用SPSS13.0软件包进行组间t检验。结果:术后1d,cyto-c、caspase-9表达水平开始升高,7d时达到高峰;术后3d时,caspase-3表达水平开始升高,TUNEL阳性细胞增多,14d时达到高峰。各时间点表达水平MnTBAP侧较对照侧显著降低(P<0.05)。结论:MnTBAP对损伤的面神经元有明显的抗凋亡作用,是一种有效的神经保护剂。
- 黄绍辉于洋王绪凯
- 关键词：面神经元凋亡
