黄必军 作品数:78 被引量:231 H指数:8 供职机构: 中山大学肿瘤防治中心 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
直肠癌p53、K-ras基因突变与临床病理的相关性研究 被引量:1 2002年 目的 探索p5 3、k ras基因同时突变对直肠癌的恶性行为升级的作用及其临床意义。方法 用PCR SSCP方法检测直肠癌细胞p5 3、K ras基因突变 ,分析该基因突变与临床病理因素及预后的关系。结果 直肠癌细胞p5 3、K ras基因突变与临床病理因素无关 ,生存率也无统计学差异。结论 直肠癌细胞p5 3、K ras基因突变对癌细胞恶性生物学行为升级无明显的促进作用 ,p5 3、K ras基因同时突变也无协同促癌作用 ,也不影响病人的预后。 潘志忠 万德森 刘晖 陈功 黄必军关键词:直肠癌 基因突变 临床病理 P53基因 K-RAS基因 鼻咽癌分子遗传学研究 曾益新 方嬿 邵建永 冯炳健 贾卫华 黄薇 鄢践 郭颖 黄必军 梁启万 吴秋良 张林杰 马英红 黄贻学 1997年1月1日~2002年9月30日,由国家重大基础研究“973”规划、国家高新技术研究发展“863” 计划、国家自然科学基金、美国中华医学基金(CMB)、广东省自然科学基金等资助,进行了研究。明确鼻咽癌(Nasop...关键词:关键词:鼻咽肿瘤 分子遗传学 生物化学 染色体 系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2的表达及临床意义 被引量:7 1999年 目的为了探讨bcl 2基因在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及临床意义。方法应用逆转录 -聚合酶链反应(RT PCR)检测31例SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)bcl 2mRNA表达水平和流式细胞仪双标记法分析其T、B细胞bcl 2蛋白表达。结果活动期SLE患者PBMCbcl 2mRNA表达水平明显升高 ,占55 6 % ,且活动期SLE患者CD3+ 、CD4+ 和CD8+ T细胞亚群bcl 2蛋白表达明显高于非活动期SLE患者、正常人对照组和其他疾病组 ,而CD19+ B细胞bcl 2蛋白表达在各组之间并无统计学差异。结论T细胞bcl 2异常表达在SLE疾病活动的过程中起着重要作用 ,检测SLE患者外周血T淋巴细胞bcl 刘亚光 尹培达 石成钢 赵湘茹 孔庆瑜 黄必军关键词:红斑狼疮 BCL-2基因 和解汤对慢性乙型肝炎患者HBeAg阴转后阴转状态的影响 被引量:5 2001年 目的 :探讨和解汤对慢性乙型肝炎 HBe Ag阴转后阴转状态的影响。方法 :将慢性乙型肝炎 HBe Ag阴转但 SIL- 2 R水平仍高的患者 41例随机分为两组 ,治疗组 2 6例采用和解汤治疗 ;对照组 15例予以常规西药护肝治疗。均于治疗 3个月后抽取患者外周血检查 SIL- 2 R水平。结果 :治疗组 SIL- 2 R水平下降 (P<0 .0 5 ) ,且 HBe Ag重新阳转者 1例 ;对照组 SIL- 2 R水平无明显变化 (P>0 .0 5 ) ,且 HBe Ag重新阳转者 4例 ,与治疗组比较差异有显著性意义。结论 :HBe Ag阴转但 SIL- 2 R水平仍高的患者 ,HBe Ag阴转可能是暂时现象 ,应继续予以有效治疗 ,和解汤对保持 HBe Ag阴转状况有一定疗效。 张诗军 陈泽雄 黄必军 李俊彪关键词:乙型肝炎病毒 可溶性白细胞介素2受体 和解汤 中医药疗法 Serglycin稳定干扰增加鼻咽癌高转移细胞对顺铂的敏感性 被引量:2 2015年 目的观察serglycin稳定干扰后对鼻咽癌高转移细胞顺铂敏感性的影响,并初步探究其机制。方法建立serglycin稳定干扰的鼻咽癌高转移细胞株,qRT-PCR和Western blot检测serglycin的表达情况。四甲基偶氮唑蓝法测定顺铂对稳定株细胞的IC50;增殖曲线实验观察在顺铂压力下细胞增殖的差异;克隆形成实验观察细胞克隆形成能力的差异;Annexin V/PI双染检测细胞凋亡。qRT-PCR检测稳定株细胞中干性基因的表达情况。结果 Serglycin稳定干扰的鼻咽癌高转移细胞株成功建立,细胞形态发生改变。四甲基偶氮唑蓝法测得serglycin稳定干扰细胞的顺铂IC50显著低于对照组细胞,增殖抑制率高于对照组,药物作用下克隆形成能力减弱,流式凋亡比例增高。Serglycin稳定干扰后干性基因表达下调。结论 Serglycin稳定干扰可以增加鼻咽癌高转移细胞对顺铂的敏感性。 储悄悄 刘韬 贾守薇 黄必军 黄红兵关键词:SERGLYCIN 鼻咽癌 顺铂 一种基于人miR-30结构高效干扰LMP1基因表达的慢病毒载体的构建 2014年 目的:构建慢病毒载体并利用miRNA原理进行LMP1病毒癌基因干扰的可行性及有效性研究。方法:基于人miR-30a结构,利用靶点分析软件设计4个LMP1的候选干扰靶点,报告基因EGFP与miRLMP1靶点形成共顺反子表达,靶点载体质粒与LMP1高表达质粒用脂质体共转染工具细胞293FT,用Western blot方法筛选最有效的干扰靶点并用三质粒系统在293FT细胞中包装慢病毒,进行滴度鉴定。结果:在293FT工具细胞中成功筛选到一个高效干扰LMP1基因的靶点序列,在Western blot水平的蛋白干扰率高达95%;在20ml培养上清中可获得具有活性慢病毒颗粒7.2×108个,经纯化浓缩获得重组慢病毒颗粒,滴度高达6×109TU/ml,经流式细胞仪检测在80MOI时其感染EBV阳性的鼻咽癌细胞株C666-1的感染率高达80%以上。结论:基于人miR-30a结构的miR-LMP1能高效干扰LMP1基因的蛋白表达,利用慢病毒载体来建立稳定基因干扰肿瘤细胞株可能是一个良好的方法。 黄必军 杨长福 朱颖慧 周玲 朱秀云 黄铁军关键词:EB LMP1 RNA 慢病毒载体 EBV-LMP1促进鼻咽癌细胞系CNE2对顺铂的抗性 2012年 目的:EB病毒与鼻咽癌的发生有密切的关系,而其编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)被证实具有转化致瘤的作用。本实验的目的是观察LMP1是否使细胞产生对顺铂的抗性,并探索其中的发生机制。方法:用脂质体转染带有LMP1的质粒进入CNE2细胞,G418筛选构成稳定株,qRT-PCR和western检测其LMP1的表达情况。MTT和Annexin V/PI双染实验检测细胞对顺铂的敏感性。结果:CNE2/LMP1细胞能够稳定表达LMP1。LMP1能够促进细胞抵抗顺铂的生长抑制作用和抗顺铂诱导的凋亡。结论:EB病毒潜伏膜蛋白LMP1增强细胞对顺铂的抗性。 杨广达 杨红杰 黄必军关键词:EB病毒 LMP1 顺铂 构建睫状神经营养因子和绿色荧光蛋白基因转导的重组腺病毒载体 被引量:1 2008年 目的以重组腺病毒(rAd)为载体构建腺病毒-睫状神经营养因子-内部核糖体进入位点-绿色荧光蛋白(Ad—CNTF-IRES-GFP)。方法先构建Psp-CNTF-IRES-GFP质粒,再制备PDC316-CNTF-IRES—GFP质粒。然后在脂质体的作用下,用构建好的PDC316-CNTF-IRES—GFP质粒与骨架质粒PBHG在293-LP细胞中构建Ad—CNTF-IRES—GFP腺病毒,并扩增、纯化,鉴定病毒活性。最后,将Ad-CNTF-IRES-GFP转染人源性骨髓间充质细胞(MSCs),观察MSCs的CNTF表达情况。结果成功扩增CNTF基因,扩增后的CNTF基因与基因文库序列完全相符;成功制备PDC316-CNTF-IRES-GFP质粒及Ad-CNTF-IRES-GFP腺病毒.测得Ad—CNTF-IRES—GFP腺病毒的病毒活性单位(pfu)为2.3×10^11;构建好的Ad-CNTF-IRES-GFP成功转染MSCs,而且转染后的MSCs表达CNTF的量为未转染MSCs表达量的20倍。结论本方法能够成功构建Ad-CNTF-IRES—GFP腺病毒载体,而且转染后的MSCs高度表达CNTF。 陆正齐 胡学强 朱灿胜 刘然义 黄必军 黄文林关键词:腺病毒载体 化湿中药对慢性乙型肝炎湿证患者激活和功能T淋巴细胞亚群水平的影响 被引量:7 2006年 目的探讨化湿中药对慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)湿证患者临床疗效与激活和功能T淋巴细胞亚群水平变化的关系。方法将CHB湿证患者75例非随机分为两组,治疗组(45例)采用化湿中药治疗,对照组(30例)采用核苷类似物治疗,观察治疗1年后两组临床疗效及激活和功能T淋巴细胞亚群水平变化。结果CHB患者外周血CD8+CD2+8、CD4+CD2+8T细胞水平与健康人比较均明显下降(P<0.01);CD8+CD3+8T细胞水平与健康人比较均明显升高(P<0.05);经治疗后,治疗组CD4+CD2+8、CD8+CD2+8T细胞水平较治疗前明显升高(P<0.05),CD8+CD3+8T细胞水平较治疗前明显下降(P<0.05),对照组CD8+CD3+8T细胞水平较治疗前明显下降(P<0.05)。两组总有效率及显效率相比较,差异无显著性(P>0.05)。CHB显效患者治疗后CD8+CD2+8、CD4+CD2+8T细胞水平明显升高(P<0.05),CD8+CD3+8T细胞水平较治疗前明显下降(P<0.05);非显效患者治疗前后CD8+CD2+8、CD4+CD2+8、CD8+CD3+8、CD4+CD2+5T细胞水平无明显变化(P>0.05)。结论化湿中药对CHB湿证患者激活和功能T淋巴细胞亚群水平有一定的调节作用,这可能是抑制病毒复制、清除病毒的重要途径。 张诗军 陈泽雄 林佑武 张瑜 程永华 黄必军关键词:慢性乙型肝炎 湿证 应用间期荧光原位杂交技术检测原发性肝细胞癌c-myc基因扩增的临床意义 被引量:8 2001年 目的 探讨c myc基因在原发性肝细胞癌中的扩增及其与临床及预后的关系。方法 应用间期核荧光原位杂交技术对 10 0例原发性肝癌和 6例带卫星结节的肝癌组织标本进行检测。结果 92 % (92例 )原发性肝癌组织存在c myc基因扩增 ,其中高拷贝数扩增达 37% (37例 ) ,低拷贝数扩增 5 5 % (5 5例 ) ,只有 8% (8例 )无扩增。结合临床资料分析 ,c myc扩增与患者临床分期、肿瘤大小和病理类型无明显相关 (P >0 .0 5 ) ,原发肿瘤和相应卫星结节肿瘤组织具有相似的c myc基因扩增水平和相同病理类型的特点。在可随诊两年半的 90例病例中 ,91.1% (82例 )病例有c myc基因扩增 ,其中高拷贝数扩增 34例 ,低拷贝数扩增 48例 ,无扩增 8例。分析c myc扩增程度与患者术后复发的时间及生存期关系 ,发现c myc高拷贝数扩增的病例术后 1年内复发率 (70 .6 % ,2 4/ 34 )高于c myc低拷贝数扩增 (39 6 % ,19/ 48)和无扩增者 (12 5 % ,1/ 8) ,三者之间差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。而在术后 >12个月的复发率则与c myc不同扩增程度间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。另外 ,c myc高拷贝数扩增者术后 2年存活率明显低于低拷贝数扩增和无扩增者 (P =0 .0 0 1)。结论 原发性肝细胞癌存在高频率的c myc基因扩增 ,基因扩增与患者临床? 方嬿 黄必军 梁启万 李辉梅 黄楚文关键词:肝细胞癌 荧光原位杂交 MYC基因 基因扩增