黄文林
- 作品数：93 被引量：249H指数：8
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 腺病毒携带人Endostatin在Tca8113细胞和ECV细胞中的表达和作用
- Objective: To study the expression of endostatin in TCA8113 and ECV cell line infected by Ad/hEnd and to evalu...
- 陈宇丁学强黄嘉凌李立刘然义冼励坚曾益新黄文林赖坤吴秀菊柯妙拉
- 文献传递
- 严重急性呼吸综合征患者血清病毒抗体消长规律的研究被引量：4
- 2004年
- 段朝晖罗晓红黄嘉凌王惠英何春生江从海刘香梅曾桦郑治修朱振宇黄文林
- 关键词：严重急性呼吸综合征传染性非典型肺炎病情变化SARS病毒抗体
- ZD6474对伊马替尼耐药的K562细胞增殖的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨酪氨酸激酶抑制剂ZD6474（Vandetanib）对K562细胞及其衍生的伊马替尼耐药的K562/G细胞的增殖抑制作用及其分子机制.方法 通过逐渐增加药物浓度的方法诱导伊马替尼耐药的K562/G细胞株,采用Western blot方法检测耐药细胞株中明显变化的分子.WST方法检测伊马替尼和ZD6474对细胞增殖的影响,流式细胞术检测药物对细胞周期的影响.采用RT-PCR、Western blot和体外Src激酶卣接测定的方法研究ZD6474作用的分子机制.结果 伊马替尼对K562细胞的IC50值为（0.28 4-0.04）μmol/L,而对K562/G细胞的IC50值为（15.80±0.93）μmol/L,K562/G细胞的耐药倍数为56倍,Western blot结果提示其耐药机制与磷酸化Src激酶（p-Src）的表达增强,Bcl-2和磷酸化STAT3（p-STAT3）的表达升高有关.ZD6474呈剂量依赖的方式抑制K562和K562/G细胞增殖,48 h的IC50值分别为1.61 μmol/L和3.18 μmol/L.ZD6474作用24 h,可以显著诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡.分子机制研究显示,ZD6474显著抑制Src激酶活性,上调Bax/Bcl-2的比例,以及下调p-STAT3表达.结论 ZD6474可以有效抑制伊马替尼耐药的K562/G和亲本K562细胞增殖,诱导凋亡.其机制与ZD6474显著抑制Src激酶活性有关.
- 嘉红云吴晓蔓王忠英邓小燕林桢冯桂玲黄文林
- 关键词：酪氨酸激酶抑制剂细胞增殖
- IFNγ修饰的DC对T细胞增值及杀伤肿瘤细胞作用影响的研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨结肠癌细胞抗原致敏的IFNγ修饰的树突状细胞(DC)对T淋巴细胞增殖和分化的影响,以及活化T细胞对结肠癌LoVo细胞的杀伤作用。方法构建携带人IFNγ基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(Ad-IFNγ),用其感染人外周血单个核细胞来源的DC;以流式细胞仪检测DC表型的变化。用反复冻融裂解法提取的结肠癌LoVo细胞抗原致敏DC,将其与自身T淋巴细胞共同培养,观察T细胞增殖和分化的情况以及活化T细胞对LoVo细胞的杀伤作用。结果Ad-IFNγ转染后24h内几乎不影响DC的吞噬功能,DC自身表达的IFNγ在一定程度上能促进DC的成熟;IFNγ修饰的DC经LoVo细胞抗原致敏后能明显促进T淋巴细胞的增殖并使其向Th1细胞分化,Th1细胞对结肠癌LoVo有明显的特异性杀伤效应。结论IFNγ修饰的DC能增强促进T淋巴细胞的增殖,诱导细胞免疫,增强T细胞的细胞毒作用,从而有效地杀伤肿瘤细胞。
- 薛刚程莹曹永宽王培红田伏洲黄文林
- 关键词：结肠肿瘤IFNΓ树突状细胞免疫治疗
- 重组人内皮抑素腺病毒抑制肝癌裸鼠移植瘤生长被引量：12
- 2003年
- 目的 观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad/hEndo)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304经Ad/hEndo感染后,western印迹检测人内皮抑素的表达。人肝癌BEL-7402细胞移植到裸鼠背脊部后,检测Ad/hEndo对肝癌移植瘤生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中内皮抑素mRNA的表达。分析人内皮抑素在裸鼠体内的表达分布。结果 Western印迹检测到人内皮抑素基因在ECV-304细胞内高效表达。Ad/hEndo明显抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤生长(F=4.061,P<0.05)。Ad/hEndo组血管密度计数为6.88±1.08,DMEM组为13.60±1.71(t=9.216,P<0.01)。瘤内注射Ad/hEndo后3d,RT-PCR在肿瘤组织检测到内皮抑素mRNA的表达,7d后表达不明显。人内皮抑素蛋白主要分布在肿瘤组织。结论 腺病毒介导的人内皮抑素基因在体内、体外获得高效表达,并明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长与血管生成。
- 李立吴沛宏黄嘉凌刘然义曾益新黄文林
- 关键词：肝癌裸鼠移植瘤抗血管生成
- 14-3-3σ调控p27抑制Rat1-Akt细胞增殖被引量：4
- 2007年
- 目的:研究腺病毒介导14-3-3.σ(Ad-14-3-.3σ)对Akt过表达Rat1-Akt细胞增殖的影响,并探讨其作用是否通过调控p27而实现。方法:通过5-溴-2′脱氧尿嘧啶(B rdU)实验检测Ad-14-3-3.σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响,并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3.σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响。结果:Ad-14-3-3σ转染的细胞B rdU阳性率(45%)低于PBS处理组(100%)或Ad-β-gal转染的对照组细胞(98%)。14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位。结论:转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Rat1-Akt增殖,14-3-3σ通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性,阻断Akt介导的p27胞浆错位,从而发挥其抑制Rat1-Akt细胞增殖。
- 杨惠玲夏洪平赵睿颖夏云飞黄文林LEE Mong-hong
- 关键词：P27蛋白激酶B
- IFN-γ基因修饰的骨髓基质细胞体外抗白血病作用的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究重组人IFNγ腺病毒(Ad/hIFNγ)在CML病人骨髓基质细胞(BMSCs)中的转染效率、IFNγ表达,并进一步观察转染Ad/hIFNγ的骨髓基质细胞体外抗白血病细胞株K562增殖和诱导K562细胞凋亡的作用。方法以Ad/hIFNγ重组腺病毒按感染复数(MOI)为50转染CML病人骨髓基质细胞,RTPCR、ELISA及Westernblot分别检测转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞(BMSCs)中IFNγmRNA和IFNγ的表达;转染Ad/hIFNγ的骨髓基质细胞与K562细胞共培养,通过绘制K562细胞生长曲线分析其对K562细胞增殖的影响;并进一步通过流式细胞学分析其对K562细胞周期的影响和诱导凋亡的作用。结果RTPCR、Westernblot及ELISA方法都分别检测到转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞(BMSCs)中IFNγmRNA和IFNγ的表达;与对照组相比,转染Ad/hIFNγ的人骨髓基质细胞的实验组具有明显的抑制K562细胞增殖的作用(P=0.000),在细胞周期G1期的K562细胞比例明显增加,而S期K562细胞比例显著下降(P<0.01),并显著诱导K562细胞的凋亡(P<0.01)。结论Ad/hIFNγ转染人骨髓基质细胞后可获得IFNγ有效的表达,并在体外能有效地发挥抗白血病细胞作用。
- 李晓青黄文林徐海鹏陈晓勤耿其容吕跃
- 关键词：骨髓基质细胞IFN-Γ
- 用于检测癌症放疗敏感性的试剂盒及其应用
- 本发明涉及用于检测癌症放疗敏感性的试剂盒及其在疗效预测上的应用，本发明对分子标志物的筛选完全是基于国际研究水平中较为实用和有效的筛选方式——全基因组RNAi文库筛选。鉴定是在体内外基于放疗耐受诱导过程中逐级进行，最终发现...
- 刘然义岳欣王雪涔黄文林
- 文献传递
- 抑制H1N1型流感病毒增殖的microRNA及其应用
- 本发明公开了一种抑制H1N1型流感病毒增殖的microRNA及其应用。本发明提供的抑制H1N1型流感病毒增殖的RNA如序列表的序列1所示。本发明同时保护所述RNA的编码序列，以及含有所述编码序列的重组表达载体、表达盒、转...
- 黄文林宋丽萍高诗娟刘鹤
- 文献传递
- 重组人内皮抑素真核表达载体pCD-sEndo的构建和表达被引量：1
- 2005年
- 目的:构建表达人内皮抑素的重组真核表达载体,并将其转染人肝癌SMMC-7721细胞,观察其体外抑制血管生成的活性. 方法:将含有IL-2分泌肽的人endostatin全长cDNA插入真核表达载体pcDNA3.0产生重组质粒pCD—sEndo,利用阳离子脂质体介导将其体外转染人肝癌细胞SMMC- 7721细胞.G418筛选后得到阳性克隆,并被命名为SMMC/sEndo,采用Western—blot检测转染细胞上清中endostatin蛋白的表达,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成实验检测转染细胞上清中内皮抑素蛋白的生物活性. 结果:成功构建endostatin基因的真核表达质粒pCD—sEndo并经酶切和序列测定证实,通过阳离子脂质体转染SMMC-7721细胞,Western-blot显示转染细胞上清有人endostatin蛋白的表达,Mr 20 000,而转然空质粒对照组未检测到目的蛋白.CAM实验显示在给予内皮抑素蛋白的鸡胚绒毛膜血管稀疏,血管密度明显减少,并且随着蛋白量的增加,血管减少程度加强. 结论:重组endostatin真核表达质粒构建正确,转染SMMC-7721细胞后可有效表达具有生物学活性的人endostatin蛋白并能分泌到细胞外.
- 邵俊伟刘然义易继林卢绮萍黄文林
- 关键词：肝癌内皮抑素
