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马雯
作品数:
4
被引量:3
H指数:1
供职机构:
南通大学附属医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
陈晓岚
南通大学附属医院
范亚平
南通大学附属医院
徐玉音
南通大学附属医院
仇芝
南通大学附属医院
陆飞
南通大学附属医院
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RNAi沉默PGE2受体1、2亚型对TGF-β1诱导的小鼠系膜细胞损伤的影响
陈晓岚
黄新忠
马雯
前列腺素E2受体1亚型拮抗剂通过抑制ERK通路减轻转化生长因子β1诱导的小鼠系膜细胞损伤
被引量:1
2014年
目的探讨前列腺素E2(PGE2)受体1亚型(EP1)拮抗剂(SC-19220)对转化生长因子(TGF)B1诱导的小鼠肾小球系膜细胞增殖、前列腺素合酶表达、细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响及可能机制。方法小鼠肾小球系膜细胞分组:对照组;TGF-β1(10μg/L)组;药物干预组:不同浓度(0.1、0.5、1.0μmol/L)SC-19220+TGF-β1(10μg/L)组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清中PGE2的表达;实时荧光定量PCR法检测细胞结缔组织生长因子(CTGF)、层粘连蛋白(LN)、环氧化酶2(COX2)、膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGESl)mRNA的表达。Western印迹法检测CTGF、LN、COX2、mPGESl及ERKl/2活性变化。结果与对照组比,TGF.131组系膜细胞增殖增加(P<0.05),PGE:表达增加(P<0.05),CTGF、LN、COX2、mPGESlmRNA及蛋白表达增加(P<0.05),ERKl/2活性增加(P<0.05)。SC-19220干预后呈剂量依赖性抑制系膜细胞增殖(P<O.05),下调PGE2的表达(P<0.05),抑制CTGF、LN、COX2、mPGESlmRNA及蛋白表达(P<0.05),抑制ERKl/2活性(P<0.05)。结论SC-19220可能通过抑制ERKl/2活性,反馈抑制COX2、mPGESl及PGE2的表达,从而下调CTGF、LN的表达,减轻TGF-131诱导的系膜细胞损伤。
仇芝
陈晓岚
徐玉音
潘天昳
马雯
范亚平
关键词:
受体
转化生长因子Β1
系膜细胞
拮抗剂
细胞外信号
前列腺素E2受体3亚型siRNA通过抑制MAPK信号通路减轻TGF-β1诱导的小鼠系膜细胞损伤
被引量:1
2015年
目的探讨前列腺素E2(PGE2)受体3亚型(EP3)对转化生长因子-B1(TGF—β1)诱导的小鼠肾小球系膜细胞的损伤及可能机制。方法体外培养原代野生型系膜细胞,采用脂质体Lipofectamine^TM 2000化学合成法将siRNA转染至系膜细胞中沉默EP3受体,筛选干扰效率最大的EP3-siRNA片段。实验分组:(1)正常对照组;(2)TGF-β1(10μg/L)组;(3)NC-siRNA+TGF-β1(10μg/L)组;(4)EP3-siRNA组;(5)EP3-siRNA+TGF—β1(10μg/L)组。CCK-8法检测TGF—β1对细胞增殖的影响;ELISA法检测细胞PGE2和cAMP的表达;实时荧光定量PCR法检测纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、环氧化酶2(COX2)、膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES1)mRNA的表达;Western印迹检测FN、CTGF、COX2、mPGES1蛋白表达及ERK1/2、p38MAPK活性的变化。结果与正常对照组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖明显增加(P〈0.05),PGE2和cAMP表达增加(均P〈0.05),FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均上调(均P〈0.05);与TGF—β1组相比,EP3-siRNA+TGF-β1组系膜细胞增殖减少(P〈0.05),FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均下调(均P〈0.05)。与正常组比较,TGF-β1组ERK1/2、p38MAPK磷酸化水平明显增强(均P〈0.05);而EP3-siRNA+TGF—β1组的ERK1/2、p38MAPK磷酸化水平较TGF—β1组明显下调(均P〈0.05)。结论EP3-siRNA可能通过增加cAMP的产生,抑制ERK1/2、p38MAPK磷酸化,反馈抑制COX2及PGE2,从而下调FN、CTGF的表达,减轻TGF-β1诱导的小鼠系膜细胞损伤。
马雯
陈晓岚
徐玉音
陆飞
范亚平
关键词:
受体
小分子干扰
肾小球系膜细胞
MAP激酶信号系统
前列腺素E2受体1亚型在转化生长因子β1诱导小鼠系膜细胞损伤中的作用机制
被引量:2
2015年
目的:探讨前列腺素E2受体1亚型(EP1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的小鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖、细胞外基质的影响及可能机制。方法:体外原代培养MCs。采用脂质体Lipofectamine TM 2000化学合成法将siRNA转染至MCs中沉默EP1受体,筛选干扰效率最大的EP1-siRNA片段。实验分组:(1)正常对照组;(2)TGF-β1(10 ng/ml)组;(3)NC-siRNA+TGF-β1(10 ng/ml)组;(4)EP1-siRNA+TGF-β1(10 ng/ml)组;(5)EP1-siRNA组。ELISA法检测各组细胞上清中前列腺素E2(PGE2)的表达,实时荧光定量PCR方法检测各组细胞纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、环氧化酶2(COX2)、膜结合型前列腺素E2合酶1(m PGES-1)mRNA的表达。Western blot法检测FN、CTGF、COX2、m PGES-1蛋白及p38MAPK、ERK活性的变化。结果:与正常对照组相比,TGF-β1组FN、CTGF、COX2、m PGES-1的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05);与TGF-β1组相比,EP1-siRNA+TGF-β1组FN、CTGF、COX2、m PGES-1的mRNA和蛋白的表达下调(P<0.05);TGF-β1刺激后,p38MAPK、ERK磷酸化水平明显增强(P<0.05),EP1-siRNA+TGF-β1组,p38MAPK、ERK磷酸化水平较对照组明显下调(P<0.05)。结论:EP1-siRNA可能通过抑制ERK和p38MAPK磷酸化减轻TGF-β1诱导的小鼠系膜细胞损伤。
马雯
徐玉音
仇芝
范亚平
陈晓岚
关键词:
SIRNA
转化生长因子Β1
系膜细胞
信号通路
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