郭海宁
- 作品数：19 被引量：37H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 转瓶培养与生物反应器微载体培养流感重组腺病毒的比较
- 分别用3.5L转瓶和7L生物反应器微载体系统培养HEK-293细胞,接种流感重组腺病毒,比较两种培养方式生产病毒的毒价.材料与方法：向转瓶中接种3.4×107个HEK-293细胞,每2d传代细胞并计数,8d后细胞数目达到...
- 郭海宁鲁会军金宁一
- 关键词：HEK-293细胞转瓶生物反应器微载体重组腺病毒
- 转瓶培养与生物反应器微载体培养流感重组腺病毒的比较
- 分别用3.5L转瓶和7L生物反应器微载体系统培养HEK-293细胞,接种流感重组腺病毒,比较两种培养方式生产病毒的毒价.材料与方法:向转瓶中接种3.4×107个HEK-293细胞,每2d传代细胞并计数,8d后细胞数目达到...
- 郭海宁张萍韩继成靖杰曾亮解长占肖朋朋李一权马海彬南福龙崔卓栋鲁会军金宁一
- 转瓶培养与生物反应器微载体培养重组腺病毒的比较被引量：5
- 2016年
- 目的分别用3L转瓶和7L生物反应器微载体系统培养人胚胎肾细胞（HEK-293细胞）并接种H3型流感重组腺病毒,比较两种方法培养细胞及重组腺病毒的效果。方法分别用3L转瓶和7L生物反应器培养HEK-293细胞。转瓶每24h取样,生物反应器每12h取样,记录细胞总数。待细胞长满表面85%~90%时接种流感重组腺病毒,完全病变后收取病毒液并测定病毒滴度。结果转瓶培养HEK-293细胞3d,细胞增殖增加1.85~2.45倍,为（3.71~4.90）×107个[（2.95~3.90）×104 cells/cm2],生物反应器培养3d,细胞增长4.72~5.00倍,为（132.15~140.09）×107个[（24.88~28.72）×104cells/cm2]。转瓶培养重组腺病毒滴度为6.85TCID50/ml,生物反应器微载体系统培养腺病毒滴度为7.200TCID50/ml。结论生物反应器微载体系统培养流感重组腺病毒数量和滴度均高于转瓶培养,不但提高了疫苗的产量,还减少了细胞分泌物的残留,增强了疫苗接种的安全性。
- 郭海宁张萍韩继成靖杰曹亮肖朋朋解长占李一权马海彬南福龙崔卓栋李霄田明尧鲁会军金宁一
- 关键词：转瓶生物反应器微载体HEK-293细胞重组腺病毒
- 欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗构建及免疫原性研究
- 目的:构建欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗并对其免疫原性进行分析,为预防欧洲型PRRSV的感染提供依据。方法 :PCR扩增欧洲型蓝耳病ORF3、ORF5目的基因,将其连接到腺病毒穿梭质粒构建重组腺病毒穿梭质粒pacad-E...
- 曹亮孙文超解长占韩继成郭海宁鲁会军金宁一
- 关键词：腺病毒免疫原性
- 文献传递
- H3亚型流感重组腺病毒的纯化工艺研究
- 引言流感病毒(influenza viruses,IV)每年的季节性流行造成约500 000人死亡,对人类的危害极大。随着流感病毒的变异,流感病毒已经突破种属界限,在人和动物间跨种传播。目前,造成世界性流行的血清型主要有...
- 张萍郭海宁解长占韩继成孙文超崔卓栋南福龙鲁会军金宁一
- 文献传递
- 欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗猪免疫试验效果评价被引量：2
- 2016年
- 目的评价欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18猪体免疫效果。方法用鉴定正确的重组腺病毒进行猪免疫试验,通过淋巴细胞亚群检测、细胞因子检测和免疫组化检测分析其免疫效果。结果猪淋巴细胞亚群检测显示重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18刺激CD4+和CD8+表达量在21d、35d、49d分别为PBS组的1.53、1.84、1.90倍和1.41、1.76、1.53倍,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA检测pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18免疫猪血清IL-4和IFN-γ水平在14d时的表达量分别是PBS组的1.45和1.46倍(P<0.05),而在35d时分别是PBS组的1.81和1.79倍(P<0.05)。免疫组化检测免疫猪肺、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴组织病毒量相对于野毒组和PBS组显著减少。结论重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18疫苗,具有良好的免疫原性,能提高猪细胞免疫和体液免疫水平。
- 解长占曹亮孙文超张萍韩继成郭海宁肖朋朋温树波崔卓栋南福龙马海彬赵冠宇张赫庄忻雨张金勇鲁会军金宁一
- 关键词：重组腺病毒疫苗
- 表达基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白的重组鸡痘病毒的构建和筛选被引量：1
- 2015年
- 为了构建并筛选表达新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组鸡痘病毒(rFPV-F),通过PCR扩增F基因,克隆至pMD18-T Simple载体,进行DNA序列分析和遗传进化关系分析。将测序正确的F基因克隆至笔者所在实验室自行构建的新型鸡痘病毒穿梭载体pTS2GFPV150中,获得重组质粒pTS2GFPV150-F。然后将其与鸡痘病毒FPV282E4株共转染鸡胚成纤维细胞进行同源重组,挑取表达增强型绿色荧光蛋白的噬斑,经多轮筛选获得重组病毒rFPV-F,应用PCR、RT-PCR、Western-blot等方法对重组鸡痘病毒进行鉴定。结果显示,成功获得NDV F基因及重组F基因的鸡痘病毒rFPV-F,并证实F基因已被整合到鸡痘病毒基因组中,且在感染细胞内被成功表达。本研究成功获得了1株表达NDV F基因的重组鸡痘病毒,为下一步开展动物体内免疫研究奠定了基础。
- 辛舒田明尧曹佳媛薛斐杜寿文谭鹏肖朋朋陈兴郭海宁金宁一
- 关键词：新城疫病毒F蛋白同源重组
- 欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗猪体免疫实验研究被引量：6
- 2014年
- 目的评价实验室构建的欧洲型PRRSV和PCV2二联重组痘苗病毒猪体免疫效果。方法分别用重组痘苗病毒rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF5和rVTT-EU-ORF3-ORF5进行猪体免疫试验,每周采血,分离血清,采用ELISA检测病毒特异性抗体、中和抗体检测及细胞因子水平,评价免疫效果。结果 rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF免疫组35d时,猪血清欧洲型PRRSV GP3和GP5及PCV2ORF2特异性抗体,显著高于野毒组(t=6.61,t=9.21,t=10.34,P<0.05);猪血清中和抗体35d时,各免疫组均可产生较高的免疫水平,差异均无统计学意义(t=0.48,P>0.05);重组痘苗病毒疫苗rVV-ORF2-EU-ORF3-ORF5免疫可诱导IL-4和IFN-γ产生,增强猪体细胞免疫应答水平。结论欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗能诱导猪体产生体液和细胞免疫应答,为欧洲型PRRSV、PCV2的新型疫苗研究奠定了实验基础。
- 韩继成任静强孙文超靖杰肖朋朋郭海宁陈兴鲁会军金宁一
- 关键词：免疫研究
- 欧洲型PRRSV重组痘苗病毒候选疫苗猪体免疫效果研究被引量：3
- 2015年
- 目的通过猪体免疫试验,评价欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗的免疫效果。方法分别用重组痘苗病毒rVV-EU-ORF3-ORF5和灭活rVV-EU-ORF3-ORF5进行猪体免疫试验,通过检测猪血清特异性抗体中和抗体检测及T淋巴细胞增殖试验分析免疫效果。实验设E3L-VTT野毒免疫组和PBS组作对照。结果免疫后35d,欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗免疫组和rVV-EU-ORF3-ORF5免疫组GP3、GP5特异抗体水平均达峰值（A值0.51~0.56）,两组间比较差异无统计学意义（tGP3=1.805,tGP5=0.7998,P〉0.05）,但均高于E3L-VTT野毒免疫组（A值0.33~0.43）,差异显著（tGP3=5.518,tGP5=3.346,P〈0.01）;猪血清中和抗体重组痘苗病毒灭活疫苗组与重组痘苗病毒疫苗组均与免疫后35d达峰值水平（分别为16.38和18.88）,且两组间比较差异无统计学意义（t=0.7005,P〉0.05）;T淋巴细胞增殖试验的SI值两疫苗组差异无统计学意义（t=0.2536,P〉0.05）,但均高于E3L-VTT野毒免疫组（t值分比为6.414和7.222,P〈0.01）。结论欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗能诱导猪体产生体液和细胞免疫应答,可为欧洲型PRRSV的新型疫苗的研制提供参考。
- 韩继成靖杰肖朋朋曹亮李一权郭海宁马海彬张萍鲁会军金宁一
- 关键词：免疫研究
- 欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗构建及免疫原性研究
- 目的：构建欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗并对其免疫原性进行分析,为预防欧洲型PRRSV的感染提供依据。方法：PCR扩增欧洲型蓝耳病ORF3、ORF5目的基因,将其连接到腺病毒穿梭质粒构建重组腺病毒穿梭质粒pacad-EU...
- 曹亮孙文超解长占韩继成郭海宁鲁会军金宁一
- 关键词：腺病毒免疫原性
