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Shh基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究: 目的研究对大鼠MSC进行重组Shh基因修饰的可行性。为下一步基因与细胞联合干预心肌缺血大鼠模型做好准备。方法克隆Wistar大鼠Shh基因并测序鉴定。构建PCDNA3.1-Shh真核表达载体,采用密度梯度离心—贴壁培养法...; 吴晓明杨进福谭志平唐滔张伟史进历忠逵; 文献传递

Noonan综合征1例附文献复习被引量：1: 2009年; 陈金兰杨一峰谭志平王跃斌唐先明龚医博; 关键词：NOONAN综合征身材矮小先天性心脏病

Connexin31相互作用蛋白筛选、证实与功能研究被引量：3: 2005年; 筛选间隙连接蛋白31 (connexin31,Cx31) 相互作用蛋白并研究其在Cx31运输中的功能. 运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,电喷雾-四极杆-飞行时间质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实,确定actin为Cx31相互作用蛋白. 用药物处理细胞,抑制actin的功能,观察Cx31定位与间隙连接通道的通透性,确定actin在Cx31运输中的功能. 当药物抑制actin的功能时,Cx31很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道,Cx31主要分布在胞质中;当药物抑制tublin的功能时,Cx31能到达细胞膜上形成间隙连接通道,细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象,但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加. Actin在Cx31运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用.; 刘宇谭志平潘乾贺立强蔡芳邬玲仟梁德生夏昆夏家辉张灼华; 关键词：免疫共沉淀

ATF1与CDK3蛋白相互作用研究: 2010年; 研究真核细胞转录激活因子1(activating transcription factor1,ATF1)与细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶3(cyclin-dependent kinase3,CDK3)的相互作用机制,分别构建ATF1的激酶诱导区域(kinaseinducible domain,KID)结构域、谷氨酰胺富含域(glutamine rich domain,Q2)结构域及亮氨酸拉链区(basic leucine zipper domain,bZIP)结构域缺失体与VP16的融合表达载体,在HEK293细胞过表达,应用真核细胞双杂交系统,研究ATF1结构域与CDK3的相互作用.结果表明,ATF1全蛋白与CDK3蛋白之间存在强烈的相互作用;ATF1结构域缺失体与VP16的融合蛋白在HEK293细胞中可获得高表达,但ATF1的任何一种结构缺失体与CDK3蛋白结合都会严重减弱其与CDK3蛋白的相互作用,只有完整的ATF1蛋白才能实现与上游CDK3蛋白的结合.; 刘小平巩丽云王亮谭志平郑多; 关键词：细胞转化 HEK293细胞

Connexin31显性听力下降相关突变体研究被引量：2: 2005年; Cx31突变可以导致常染色体显性听力下降、常染色体隐性听力下降、周围神经疾病伴听力丧失,以及变性红皮肤病角化病,其导致不同疾病的机理一直是研究的重点.利用定点突变技术(site-directed mutagenesis,SDM)构建connexin31显性听力下降相关突变体Cx31R180X,Cx31E183K并插入到真核表达载体pEGFP-N1,转染HeLa细胞,转染Cx31R180X-pEGFP-N1和Cx31E183K-pEGFP-N1Cx31突变体质粒的HeLa细胞质膜上没有出现斑块状染色和聚集现象,分别用内质网染料conA和高尔基体染料WGA进行免疫荧光染色,结果显示Cx31显性听力下降相关突变体蛋白主要分布在细胞质内,且大部分定位在内质网和高尔基体上.同时分别用抗Cx31和抗GFP抗体进行蛋白质印迹检测,证实Cx31R180X,Cx31E183K在转染的HeLa细胞中都有表达.研究发现Connexin31显性耳聋相关突变体Cx31R180X,Cx31E183K不能正常地形成间隙连接通道,这与connexin31 EKV(变性红皮肤病角化病)相关突变体能够运输到细胞膜上形成间隙连接通道的报道不相同,提示connexin31不同部位突变导致不同疾病的致病机理可能不一样,从而为解释“one connexin two diseases”提供分子水平的依据.; 谭志平刘宇蔡芳潘乾贺立强黄亮群戴和平夏昆夏家辉张灼华; 关键词：定点突变技术突变体绿色荧光蛋白

遗传性综合征及拷贝数变异对圆锥动脉干畸形一期根治手术预后的影响: 目的探讨合并遗传性综合征征型及合并拷贝数变异对圆锥动脉干畸形患儿一期根治手术预后的影响.方法回顾性分析我院近年263例接受一期手术治疗的圆锥动脉干畸形患儿的临床资料.将2010年7月至2012年12月期间在我院接受一...; 张伟志黄晓洁谭志平杨一峰

细胞间黏附分子-1基因K469E多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性被引量：4: 2012年; 目的:探讨细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)基因K469E多态性与中南地区汉族人群慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的相关性及对ICAM-1的影响。方法:从来自中南地区、主要是湖南地区的汉族人群中收集COPD患者91例及健康对照者80例的血液标本,提取基因组DNA,用PCR方法扩增包含K469E位点的碱基序列后进行测序确定基因型;从完成测序的对象中随机抽取COPD患者60例、正常对照者26例的血清进行可溶性细胞间黏附分子-1(soluable intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的检测。结果:COPD患者的基因型及等位基因分布频率与正常对照组差异没有统计学意义(P>0.05);但在16例极重度患者中,KE+EE基因型和E等位基因频率相对于75例非极重度患者增高(10/16 vs 26/75,12/30 vs 20/150,P<0.05)。COPD组的sICAM-1水平较对照组增高[(213.8±35.6)ng/mL vs(175.8±22.7)ng/mL,P<0.05],并且与第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(forced expiratory volume in one second for the percentage of predicted value,FEV1%)呈负相关(r=-0.591,P<0.01);但正常对照组和不同严重程度COPD亚组中,KE+EE基因型与KK基因型间sICAM-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ICAM-1基因K469E多态性与中南地区汉族人群COPD的发病没有明显相关性;但携带E等位基因可能是病情严重程度的危险因素。; 黄河颂蒋慧孔祥龙刘婷婷谭志平陈平罗红; 关键词：细胞间黏附分子-1 基因多态性慢性阻塞性肺疾病

p11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备被引量：6: 2002年; 目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化目的蛋白。利用纯化的GST p11蛋白制备多克隆抗体。结果 :得到高表达量的融合蛋白 ,经亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST p11和 6xHis p11蛋白。以GST p11蛋白免疫新西兰兔得到p11多克隆抗体 ,Westernblotting证实该抗体能够识别 6xHis p11蛋白 ,具有较高特异性。结论 :利用原核表达人p11融合蛋白制备的p11多克隆抗体具有较好的特异性。; 谭志平黄亮群郑多房海燕夏昆夏家辉; 关键词：纯化抗血清

GST p11融合蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备: 目的:表达GST p11和6xHis p111融合蛋白并制备GST p11特异性抗体.方法:将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX4T2和pQE30,分别在大肠杆菌BL21和M15中表达,用GlutathioneS...; 徐伟谭志平曹友德; 关键词：融合蛋白 GST 抗血清多克隆抗体; 文献传递

纤毛与人体左右不对称发育研究进展被引量：2: 2018年; 人体内脏器官在位置及形态上呈左右不对称分布。纤毛在左右不对称发育中发挥关键作用。目前已鉴定数十个不对称发育相关的人类疾病基因,这些基因大多涉及纤毛发生、运动以及Nodal-Pitx2信号传导过程。文中主要介绍了纤毛影响Nodal-Pitx2信号通路导致人体左右不对称发育的过程。此外还简要阐述了纤毛与先天性心脏病的关系以及左右不对称发育人类遗传学研究的最新发现。这些进展将有助于我们深入了解左右不对称发育分子机制以及纤毛与人类疾病的联系。; 原壮壮黄皓杨一峰谭志平; 关键词：纤毛

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谭志平

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