王维刚
- 作品数：12 被引量：81H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去甲斑蝥素与单克隆抗体偶联物治疗肝癌实验研究被引量：8
- 1999年
- 用大鼠单克隆抗体３Ａ５与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）制备偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞和小鼠肝癌Ｈ２２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性。小鼠腹腔内移植肿瘤，ｉｐ给药，３Ａ５ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ的ＩＬＳ值分别为１１１％和３７％。结果说明在对腹腔肿瘤的治疗方面３Ａ５ＮＣＴＤ具有比游离ＮＣＴＤ更强的治疗作用。裸鼠移植ＢＥＬ７４０２人肝癌，ｉｖ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜００１）；ｐｔ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜００１）。与ＮＣＴＤ相比３Ａ５ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌具有更强的治疗作用。在给药途径方面，治疗效果ｐｔ强于ｉｖ。以上结果提示单克隆抗体与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。
- 梁福佑张胜华潘颖徐琳娜徐琳娜卢志达王维刚
- 关键词：单克隆抗体免疫偶联物肝癌
- 以Ⅳ型胶原酶为靶点的细胞内表达单链抗体的抗肿瘤作用被引量：7
- 2000年
- Ⅳ型胶原酶（包括ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９）与肿瘤的侵袭转移和恶性进展密切相关． 通过构建可在真核细胞内质网表达抗Ⅳ型胶原酶 ｓｃＦＶ Ｍ９７抗体基因的真核表达载体， 应用脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ法对人高转移性肺巨细胞癌ＰＧ细胞系进行基因治疗．研究 结果表明，细胞内表达 ｓｃＦｖ Ｍ９７对 ＰＧ细胞 Ⅳ型胶原酶分泌、 ＰＧ细胞生长及体外侵袭 能力具有显著的抑制作用，并能明显降低ＰＧ细胞裸鼠体内成瘤性，延长动物存活时间． 以上结果提示胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键步骤从根本上抑制Ⅳ型胶 原酶的活性，在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景。
- 王维刚张胜华李毅徐琳娜周京华甄永苏
- 关键词：肿瘤侵袭
- 抗Ⅳ型胶原酶胞内抗体对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨内质网滞留型胞内抗体对Ⅳ型胶原酶分泌及其对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用。方法构建了编码胞浆和内质网滞留型抗Ⅳ型胶原酶抗体的表达载体pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv。对人巨细胞肺癌PG细胞系进行基因转染。以Western blot检测pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv的表达,明胶酶谱检测PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌情况,Matrigel实验检测细胞侵袭。结果CP.scFv和ER.scFv胞内抗体在PG细胞内表达,ER.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌具有显著的抑制作用,对基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶-2的抑制率分别为85.7%和51.2%;而CP.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌无抑制作用。ER.scFv编码基因转染的PG细胞与野生型和空白质粒组比较,对体外侵袭有明显的抑制,抑制率为76.3%;而CP.scFv编码基因转染的PG细胞未显示出有抑制作用。结论内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌通路中抑制Ⅳ型胶原酶的活性,进而抑制肿瘤侵袭,可能在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景。
- 沈恩允王维刚张胜华甄永苏
- 内质网滞留型抗Ⅳ型胶原酶胞内抗体对肿瘤细胞侵袭和增殖的抑制作用被引量：5
- 2004年
- 背景与目的:侵袭转移是恶性肿瘤细胞的重要特性,Ⅳ型胶原酶(包括基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9)在恶性肿瘤转移扩散中发挥着极其重要的作用。我们通过胞内抗体技术,阻断Ⅳ型胶原酶的分泌,以期达到抑制恶性肿瘤细胞侵袭转移的效果。方法:构建编码可在内质网滞留的抗Ⅳ型胶原酶单链抗体的表达载体pcDNA3.1-ER.scFv,并转染入人巨细胞肺癌PG细胞系内。Westernblot检测pcDNA3.1-ER.scFv的表达,免疫共沉淀实验分析胞内抗体ER.scFv在PG细胞内与靶蛋白相互作用情况,明胶酶谱检测Ⅳ型胶原酶的分泌,以及体外侵袭和增殖实验。结果:ER.scFv在PG细胞内表达,而且能够识别和结合靶蛋白基质金属蛋白酶9。通过胞内抗体的基因转染,显著抑制了Ⅳ型胶原酶的功能和活性。ER.scFv转染的PG细胞较野生型和空白质粒组,侵袭能力明显降低,抑制率为76.3%(P<0.05),在Matrigel上进行细胞培养,ER.scFv对PG细胞有明显的抗增殖效果。结论:内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键通路中抑制肿瘤细胞Ⅳ型胶原酶的活性,进而抑制了肿瘤侵袭和增殖,在肿瘤基因治疗中具有应用前景。
- 沈恩允王维刚李毅张胜华甄永苏
- 关键词：胞内抗体肿瘤侵袭增殖基因治疗
- 去甲斑蝥素用于单克隆抗体为载体的肿瘤导向治疗实验研究被引量：32
- 1999年
- 用单抗３Ａ５制备与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）的偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性，两者的ＩＣ５０分别为２．３ｍｇ／Ｌ和４．２ｍｇ／Ｌ。小鼠腹腔内移植Ｈ２２肝癌，腹膜内给药（ｉｐ），３Ａ５ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）的延长寿命值（ＩＬＳ）分别为１６８％和４２％。裸鼠移植人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞，静脉给药（ｉｖ），ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞０．０５），３Ａ５ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜０．０１）；瘤结周围给药（ｐｔ），ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜０．０５），３Ａ５ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜０．０１）。结果表明，与ＮＣＴＤ相比，３Ａ５ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌和腹腔肿瘤具有更强的治疗作用。以上结果提示单抗与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。
- 梁福佑张胜华潘颖徐琳娜王维刚
- 关键词：单克隆抗体去甲斑蝥素免疫偶联物肿瘤
- 单克隆抗体Fab'－平阳霉素偶联物及其抗肿瘤作用
- 抗人肝癌BEL-7402细胞单克隆抗体3A5，以适当方法获得其活性Fab’片段；以葡聚糖T-40作中介体，将Fab’与平阳霉素相偶联，体外实验用培养的人体肝癌BEL-7402细胞和口腔鳞癌KB细胞，克隆形成法检测，偶联物...
- 甄永苏刘小云王维刚刘秀均
- 文献传递
- 人单克隆抗体与平阳霉素偶联物治疗乳腺癌实验研究被引量：12
- 1995年
- 抗乳腺癌人单抗ＣＭＩ用ＤｅｘｔｒａｎＴ－４０为中介体的方法与平阳霉素（ＰＹＭ）偶联，体外实验显示ＣＭＩ－ＰＹＭ偶联物对人乳腺癌细胞的ＩＣ５０（抑制５０％克隆生成浓度）为０．３５μｍｏｌ·Ｌ－１；游离ＰＹＭ为４．０μｍｏｌ·Ｌ－１。裸鼠体内实验证明，局部给予ＣＭＩ－ＰＹＭ偶联物（２．５ｍｇ·ｋｇ－１）对移植的人乳腺癌抑制率达９５％，等剂量平阳霉素为５８％。结果表明人单抗ＣＭＩ－平阳霉素偶联物对乳腺癌有显著疗效，偶联物对肿瘤的抑制作用比游离平阳霉素更强。
- 王维刚王树惠薛玉川甄永苏
- 关键词：单克隆抗体平阳霉素乳腺癌药物疗法
- 单克隆抗体Fab'－平阳霉素偶联物及其抗肿瘤作用
- 抗人肝癌BEL－7402细胞单克隆抗体3A5,以适当方法获得其活性Fab'片段;以葡聚糖T－40作中介体,将Fab'与平阳霉素相偶联,体外实验用培养的人体肝癌BEL－7402细胞和口腔鳞癌KB细胞,克隆形成法检测,偶联物...
- 甄永苏刘小云王维刚刘秀均
- 文献传递
- 人单克隆抗体与平阳霉素偶联物治疗乳腺癌实验研究
- 1995年
- 目前研制的大多数道抗肿瘤导向药物均使用鼠源性单抗制备，临床使用可导致人抗鼠抗体(HAMA)产生。据报告在黑色素瘤、结肠癌、乳腺癌和卵巢癌患者，HAMA发生率高达100%，HAMA对注入的单抗导向药物起中和作用，从而抵消其疗效。因此，研究者普遍关注的是使鼠单抗人源化。CMl是抗乳腺癌人单克隆抗体，
- 王维刚薛玉川甄永苏王树蕙
- 关键词：乳腺癌HAMA单克隆抗体平阳霉素偶联物CM
- 单克隆抗体与平阳霉素偶联物对肿瘤的区域性导向实验治疗被引量：12
- 1997年
- 以小鼠Ｈ２２肝癌腹腔内移植和胸腔内移植肿瘤为模型，观察３Ａ５ＰＹＭ偶联物对腔内肿瘤的治疗作用，并以裸鼠移植结肠癌为模型，观察局部注射的治疗作用。结果表明，于小鼠肝癌Ｈ２２皮下肿瘤局部给药，３Ａ５ＰＹＭ在肿瘤的浓度较游离ＰＹＭ高，滞留时间也较长。对小鼠腹腔内或胸腔内移植的肿瘤，腔内注射３Ａ５ＰＹＭ比游离ＰＹＭ具有更显著的延长动物生存期的作用。裸鼠皮下移植ＨＴ２９人结肠癌，在肿瘤周围注射３Ａ５ＰＹＭ比ｉｖ或ｉｐ给予３Ａ５ＰＹＭ显示更高的抑瘤率。提示单抗与平阳霉素偶联物在肿瘤的区域性导向治疗中有较好的疗效。
- 王维刚徐琳娜张胜华薛玉川甄永苏
- 关键词：单克隆抗体平阳霉素免疫偶联物肿瘤
