李晓静
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 炭疽杆菌噬菌体裂解酶基因在大肠
- 李晓静
- 关键词：炭疽杆菌大肠杆菌
- 干扰素与转铁蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：3
- 2005年
- 利用重叠PCR技术将干扰素(interferon,IFN)基因与转铁蛋白N端半分子(transferrinN-terminalhalf-molecule,TFN)基因在体外融合,融合基因和单独的TFN基因分别克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115,得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中均获得了表达.经SPSepharoseFastFlow阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化,获得了纯度大于93%的重组融合蛋白IFN-TFN和纯度大于95%的重组TFN样品.生物活性实验证明融合蛋白IFN-TFN具有抗病毒活性.铁饱和实验证明融合蛋白IFN-TFN和单独的TFN具有相同的铁结合能力.因而TFN可望作为IFN的天然运输载体.
- 李晓静张豪薛冲李彦英陈璟苗林方宏清陈惠鹏
- 关键词：转铁蛋白干扰素-Α毕赤酵母
- 甲状旁腺激素和转铁蛋白N端半分子融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2005年
- 利用重叠PCR技术将PTH(parathyroidhormone,甲状旁腺激素)基因与TFN(transferrinN_terminalhalf_molecule,转铁蛋白N端半分子)基因在体外融合,融合基因克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115。转化子经甲醇诱导后,融合蛋白得到了表达并分泌到发酵上清液中。经SPSepharoseFF阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化获得了纯度大于95%的PTH_TFN样品。Westernblot分析及腺苷酸环化酶实验证明融合蛋白中的PTH具有与抗PTH抗体结合能力及刺激腺苷酸环化酶的活性,铁饱和实验证明融合蛋白中的TFN和单独的TFN具有相同铁结合能力。因而TFN可望作为PTH的天然运输载体。
- 张豪李晓静王德解陈璟李彦英李玉玲沈明山方宏清陈惠鹏
- 关键词：甲状旁腺激素毕赤酵母基因表达腺苷酸环化酶
- 新媒体时代突发事件舆论引导与媒体责任
- 包括互联网在内的新媒体迅猛发展,其本身具有的信息传播速度快、效应大、监管和舆论引导难度大的特点,使媒体和政府在舆论引导上面临一系列棘手问题。目前,我国及世界已经进入各种突发事件高发期,四川汶川地震、三鹿奶粉事件、拉萨打砸...
- 李晓静
- 关键词：新媒体舆论引导媒体责任
- 文献传递
- 噬菌体裂解酶研究进展被引量：3
- 2005年
- 噬菌体裂解酶是双链DNA噬菌体所特有的细胞壁水解酶。研究表明,所有噬菌体裂解酶在结构上具有相似性,即含有2个结构域:比较保守的N端催化区和差异较大的C端特异性结合区。裂解酶的高亲和性与种属特异的细胞壁糖基有关,而后者常常是细菌存活的必要成分。所以,细菌难以产生对裂解酶的抗性。本文简要综述噬菌体裂解酶的研究进展。
- 李晓静方宏清付学奇陈惠鹏
- 关键词：裂解酶噬菌体细胞壁水解酶双链DNAC端N端
- 炭疽杆菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达及鉴定
- 为了研究噬菌体裂解酶在体外裂解病原菌的条件,探索其用于疫区病原菌洗消的可行性。本实验利用PCR 方法扩增炭疽杆菌噬菌体裂解酶（γlysin）基因,克隆至大肠杆菌表达载体pET22b 中,经菌落PCR 筛选、序列测定和酶切...
- 李晓静
- 关键词：炭疽杆菌大肠杆菌
- 文献传递
- 炭疽杆菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：9
- 2005年
- 利用PCR方法扩增炭疽杆菌噬菌体裂解酶 (γlysin)基因 ,克隆至大肠杆菌表达载体pET2 2b中 ,经菌落PCR筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pET2 2b -γlysin构建成功 ,并在EscherichiacoliBL2 1(DE3)中获得了高表达。目的蛋白约占菌体总蛋白的 4 0 % ,5L发酵罐中的产酶水平高达 15g L。菌体经超声破碎 ,制备无细胞抽提液 ,StreamlineSP和SPHP柱层析以及SephacrylS- 10 0凝胶过滤三步纯化 ,得到分子量为 2 7kD单一条带的目的蛋白 ,薄层扫描分析显示其纯度大于 95 %。目的蛋白的收率为 19 1% ,纯化倍数为 35 0。生物活性鉴定重组的γ噬菌体裂解酶具有特异性 :可快速裂解炭疽杆菌 ,比活为 14 0 0u mg左右 ;而对大肠杆菌、枯草杆菌及蜡样芽孢杆菌没有裂解活性。
- 李晓静张豪付学奇李彦英陈璟李玉玲方宏清陈惠鹏
- 关键词：炭疽杆菌大肠杆菌
