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甲状旁腺激素和转铁蛋白N端半分子融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2005年; 利用重叠PCR技术将PTH(parathyroidhormone,甲状旁腺激素)基因与TFN(transferrinN_terminalhalf_molecule,转铁蛋白N端半分子)基因在体外融合,融合基因克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115。转化子经甲醇诱导后,融合蛋白得到了表达并分泌到发酵上清液中。经SPSepharoseFF阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化获得了纯度大于95%的PTH_TFN样品。Westernblot分析及腺苷酸环化酶实验证明融合蛋白中的PTH具有与抗PTH抗体结合能力及刺激腺苷酸环化酶的活性,铁饱和实验证明融合蛋白中的TFN和单独的TFN具有相同铁结合能力。因而TFN可望作为PTH的天然运输载体。; 张豪李晓静王德解陈璟李彦英李玉玲沈明山方宏清陈惠鹏; 关键词：甲状旁腺激素毕赤酵母基因表达腺苷酸环化酶

农村电商吸收能力对淘宝村组织绩效的影响：治理机制的调节作用: 随着农村互联网的普及以及基础设施的改善,农村电子商务发展迅速,受到学者们的广泛关注。当市场环境动态变化与市场竞争的加剧,淘宝村作为农村电商经济的典型代表,研究其如何从外部获取知识和信息,快速应对市场变动,提高淘宝村组织绩...; 张豪; 关键词：组织绩效; 文献传递

干扰素与转铁蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：3: 2005年; 利用重叠PCR技术将干扰素(interferon,IFN)基因与转铁蛋白N端半分子(transferrinN-terminalhalf-molecule,TFN)基因在体外融合,融合基因和单独的TFN基因分别克隆至真核表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母GS115,得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中均获得了表达.经SPSepharoseFastFlow阳离子交换层析、PhenylSepharoseFastFlow疏水层析纯化,获得了纯度大于93%的重组融合蛋白IFN-TFN和纯度大于95%的重组TFN样品.生物活性实验证明融合蛋白IFN-TFN具有抗病毒活性.铁饱和实验证明融合蛋白IFN-TFN和单独的TFN具有相同的铁结合能力.因而TFN可望作为IFN的天然运输载体.; 李晓静张豪薛冲李彦英陈璟苗林方宏清陈惠鹏; 关键词：转铁蛋白干扰素-Α 毕赤酵母

分时租赁共享汽车交通事故侵权责任研究: 分时租赁汽车作为现代交通工具在共享经济领域异军突起的出行新选择,一经问世便广受消费者的青睐与喜爱。现代共享经济模式的核心是所有权与使用权的“两权分置”,分时租赁汽车也不例外。分时租赁汽车平台作为汽车的所有人或管理人将车辆...; 张豪; 关键词：使用性质

炭疽杆菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：9: 2005年; 利用PCR方法扩增炭疽杆菌噬菌体裂解酶 (γlysin)基因 ,克隆至大肠杆菌表达载体pET2 2b中 ,经菌落PCR筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pET2 2b -γlysin构建成功 ,并在EscherichiacoliBL2 1(DE3)中获得了高表达。目的蛋白约占菌体总蛋白的 4 0 % ,5L发酵罐中的产酶水平高达 15g L。菌体经超声破碎 ,制备无细胞抽提液 ,StreamlineSP和SPHP柱层析以及SephacrylS- 10 0凝胶过滤三步纯化 ,得到分子量为 2 7kD单一条带的目的蛋白 ,薄层扫描分析显示其纯度大于 95 %。目的蛋白的收率为 19 1% ,纯化倍数为 35 0。生物活性鉴定重组的γ噬菌体裂解酶具有特异性 :可快速裂解炭疽杆菌 ,比活为 14 0 0u mg左右 ;而对大肠杆菌、枯草杆菌及蜡样芽孢杆菌没有裂解活性。; 李晓静张豪付学奇李彦英陈璟李玉玲方宏清陈惠鹏; 关键词：炭疽杆菌大肠杆菌

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张豪