张冬琳
- 作品数：16 被引量：17H指数：2
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 一种抑制水牛膜分化抗原14 基因表达的小核糖核酸分子
- 本发明的一种抑制水牛膜结合型白细胞分化抗原14基因表达的小核糖核酸分子，通过建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白EGFP-水牛膜结合型白细胞分化抗原14融合蛋白的人胚肾293细胞系，合成不同小核糖核酸分子，并转染人胚肾293细...
- 王凤阳杜丽雷明焦寒伟成鹰张冬琳郝永昌
- 海南坡鹿MD2 cDNA的克隆及其生物信息学分析
- 2011年
- 以海南坡鹿外周血白细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,获得海南坡鹿MD2全长cDNA,并对其进行较系统的生物信息学分析,内容包括序列特征分析、同源性分析、编码蛋白质理化性质及结构预测。结果表明:海南坡鹿MD2的CDS序列长度为486 bp,编码160个氨基酸,与黄牛、人、欧洲兔、褐家鼠的核苷酸序列同源性分别为98.55%,77.43%,78.47%和74.74%。该基因编码的蛋白质相对分子质量约为19×103,理论等电点为8.18。对编码蛋白的分子结构预测发现,该蛋白为非跨膜蛋白,其二级结构中,α-螺旋占16.25%,β-折叠片占38.13%,无规则卷曲占45.63%。
- 杜丽谢少林成鹰张晓茹匡文华焦寒伟张冬琳郝永昌雷明刘涛王凤阳
- 关键词：海南坡鹿克隆生物信息学分析
- 海南坡鹿MYD88 cDNA的克隆及其生物信息学分析被引量：2
- 2011年
- 以海南坡鹿外周血白细胞为材料,利用RT-PCR技术获得海南坡鹿髓样分化因子(myeloid differentia-tion factor 88,MYD88)基因完整的CDS序列,并对其进行了较系统的生物信息学分析。结果表明:该基因CDS区含有891 bp,编码296个氨基酸,该分子具有高度的进化保守性,编码蛋白无跨膜区,其二级结构中α螺旋占41.6%,β折叠占16.2%,无规则卷曲占42.2%。
- 满初日嘎谢少林杜丽成鹰张冬琳王凤阳
- 关键词：海南坡鹿克隆生物信息学分析
- 海南黄牛Cdc42 cDNA的克隆、表达及鉴定被引量：2
- 2011年
- 试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western blotting对其进行鉴定。结果显示,海南黄牛Cdc42 cDNA的编码框由576个碱基组成,编码191个氨基酸,融合蛋白分子质量约为30 ku,该蛋白主要以包涵体形式存在;纯化后的蛋白经Western blotting检测,发现对应大小的特异性条带,表明本试验成功克隆Cdc42并表达。
- 张冬琳杜丽成鹰刘涛雷明满初日嘎王凤阳
- 关键词：CDC42原核表达纯化
- 一种抑制水牛膜分化抗原14 基因表达的小核糖核酸分子
- 本发明的一种抑制水牛膜结合型白细胞分化抗原14基因表达的小核糖核酸分子，通过建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白EGFP-水牛膜结合型白细胞分化抗原14融合蛋白的人胚肾293细胞系，合成不同小核糖核酸分子，并转染人胚肾293细...
- 王凤阳杜丽雷明焦寒伟成鹰张冬琳郝永昌
- 文献传递
- 中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2 cDNA的克隆与原核表达被引量：2
- 2012年
- 本试验旨在克隆并表达中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2(myeloid differentiation protein-2,MD-2)基因,并用West-ern blotting进行鉴定。采用RT-PCR技术从中国荷斯坦奶牛外周血白细胞中扩增MD-2cDNA,并将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经测序鉴定后,构建pET28a-MD-2重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果表明,目的基因含有1个483bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;与黄牛、黑猩猩和小鼠MD-2的cDNA序列同源性分别为99.38%、77.02%、68.12%,氨基酸同源性分别为98.75%、65.00%和58.13%。融合蛋白以包涵体的形式存在,分子质量约为25ku。说明本研究成功克隆并表达了中国荷斯坦奶牛MD-2cDNA,为其进一步的功能研究提供了理论依据。
- 焦寒伟王洪梅刘晓杜丽雷明张冬琳郝永昌成鹰何洪彬王凤阳
- 关键词：中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2克隆原核表达
- 一种有效抑制小鼠mCD14基因表达的小干扰核糖核酸分子
- 本发明的一种能有效抑制小鼠mCD14基因表达的小干扰核糖核酸分子，其核糖核酸分子序列信息是：正义，gggcaguucacugauauuatt(5’-3’)，反义，uaauaucagugaacugccctt(5’-3’)，...
- 王凤阳杜丽雷明焦寒伟成鹰张冬琳郝永昌
- 文献传递
- 海南黄牛Cdc42基因的克隆、原核表达及其组织表达分析
- 细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是发育性状相关的重要功能基因。本实验以本实验室构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出Cdc42全长;构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导...
- 张冬琳
- 关键词：CDC42原核表达荧光定量PCR免疫组织化学
- 文献传递
- 海南坡鹿CDC42 cDNA的克隆、原核表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 应用RT-PCR方法对海南坡鹿细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle 42,CDC42)编码区进行扩增,将扩增产物与PET-42a载体连接,重组质粒鉴定正确后,进行生物信息学分析;构建pET42a-hdCDC42表达载体,经IPTG诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE、可溶性分析、纯化及Western blot分析。结果表明,海南坡鹿CDC42含有1个576 bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。经IPTG诱导表达后,得到一个带有His-tag和GST的约54 kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约54 kD的特异性抗体结合带,表明海南坡鹿CDC42原核表达载体成功构建并表达。
- 张巍陈品林雷明成鹰陈欢曹献英杜丽张冬琳刘涛许世英符运南祁超王凤阳
- 关键词：海南坡鹿CDC42克隆原核表达
- 水牛MyD88 cDNA的克隆与原核表达被引量：5
- 2011年
- 采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞总RNA中扩增出髓样分化因子88(mydoid differentiation factor88,MyD88)cDNA序列,PCR产物分离纯化后,与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序,并进行生物信息学分析;构建pET28a-MyD88表达载体,并将其转化至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、镍柱亲和层析纯化和Western blotting分析。结果显示,克隆到的水牛MyD88cDNA全长为1189bp,含有1个891bp的开放阅读框,编码296个氨基酸,理论等电点为5.65。经IPTG诱导表达后,得到一个带His·Tag的约39kD的重组融合蛋白。用抗His单克隆抗体进行Western blotting,得到1条约39kD特异性抗体结合带,表明水牛MyD88原核表达载体成功构建并表达。本研究为进一步开展水牛MyD88的结构功能分析奠定了基础。
- 张晓茹匡文华成鹰杜丽张冬琳郝永昌雷明焦寒伟刘涛祁超王凤阳
- 关键词：MYD88水牛基因克隆原核表达
