孙德旭
- 作品数：15 被引量：37H指数：3
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- 发文基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目四川省教育厅资助科研项目江苏省教育厅自然科学基金更多>>
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- 加巴喷丁对关节炎大鼠背根神经节FGF2及FGFR1表达的影响
- 2015年
- 目的探讨加巴喷丁对关节炎大鼠背根神经节成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）及成纤维细胞生长因子受体1（fibroblast growth factor receptor-1,FGFR1）表达的影响。方法成年健康雄性SD大鼠30只,随机分为3组：对照组、模型组和加巴喷丁组。模型组和加巴喷丁组大鼠注射弗氏完全佐剂诱导关节炎模型。加巴喷丁组在建模后第7～14天腹腔注射加巴喷丁。检测大鼠造模后的第1、4、7、10、14天足底厚度和缩足反射机械刺激阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）的变化情况;免疫组织化学法检测造模后第7天及第14天大鼠背根神经节内FGF-2及FGFR1的表达。结果与正常组大鼠相比,模型组及加巴喷丁组大鼠出现关节炎症状,PWMT值明显下降（P〈0.05）,背根神经节内FGF-2及FGFR1表达增多,加巴喷丁组给药后PWMT升高,FGF-2及FGFR1表达量下降。结论加巴喷丁能减轻关节炎性痛并降低背根神经节FGF-2及FGFR1的表达。
- 孙德旭秦苏萍温相如
- 关键词：加巴喷丁关节炎成纤维细胞生长因子2
- CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定被引量：12
- 2014年
- 目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。
- 秦苏萍李慧李小翠王晓天汤仁仙孙德旭
- 关键词：滑膜成纤维细胞原代培养关节炎
- 以专业认证为契机改革局部解剖学教学方法
- 2014年
- 为满足临床专业认证的要求,进一步提高我院的教学质量,针对在局部解剖学授课过程中存在的问题,在课堂教学和实验教学中,改革之前一贯沿用的教学方法,充分运用各种手段调动学生的学习积极性,培养学生的自主学习能力,适应现代医疗教学的需要。
- 孙德旭
- 关键词：局部解剖学
- 人参皂甙Rb1阻止大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡和诱导NAIP表达(英文)被引量：3
- 2007年
- 人参皂甙Rb1(GRb1)是人参中一个最重要的有效成分(人参属五加科中一属),能减少大鼠暂时性脑缺血梗塞面积和改善神经功能缺失症状,这种神经保护作用的机制不完全清楚。本实验研究GRb1的神经保护作用是否与防止神经元凋亡和调控神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)的表达有关。通过阻塞大鼠大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型,再灌注开始后立即给予腹腔注射GRb1(40mg/kg)。具有神经功能缺失的大鼠被随机分成2组:缺血组和GRb1组,每个组根据再灌注时间(3h,12h,1d,2d,3d,5d,10d,n=4/每时间点)分为亚组。正常大鼠和假手术组做为对照组。TUNEL标记分析凋亡细胞,用免疫组织化学的方法检测NAIP的表达。结果显示再灌注3h凋亡细胞数量开始升高,24h达高峰,后下降,但再灌注10d的凋亡细胞数量显著高于对照组(P<0.01)。与缺血组相比,GRb1各亚组的凋亡细胞数减少,但再灌注12h至3d,其差异具有统计学意义。在对照组,NAIP弱或阴性的免疫反应广泛出现在脑实质神经元。再灌注3h,NAIP阳性细胞增加,12h时达高峰,后下降。再灌注5d,NAIP阳性细胞数量比对照组少(P<0.05)。NAIP阳性神经元出现缺血性改变如扇形或三角形,纹状体星形胶质细胞强表达NAIP。在GRb1组,NAIP阳性细胞数量从再灌注12h到10d,显著高于缺血组。本实验结果提示大鼠局灶性脑缺血时,GRb1能减少细胞凋亡,其机制可能与增加NAIP的表达有关。
- 袁琼兰孙珠蕾杨朝鲜孙德旭邓莉高小青
- 关键词：人参皂甙RB1局灶性脑缺血凋亡
- Sonic Hedgehog(SHH)促进胶原蛋白诱导关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Sonic Hedgehog(SHH)在滑膜成纤维细胞增殖中的作用。方法收集类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、强直性脊柱炎(AS)患者及健康正常人血清样本各(30例),ELISA检测上述血清SHH的含量。SD大鼠皮内注射2型胶原蛋白(Col2)诱导RA大鼠模型(CIA),取其滑膜组织原代培养滑膜成纤维细胞(SF)。免疫荧光细胞化学染色法检测vimentin表达鉴定SF,并检测SHH在SF中的表达。培养SF给予SHH-胶质瘤相关癌基因1(Gli-1)通路特异性阻断剂GANT61处理72 h,Western blot法检测SF表达SHH的变化情况,CCK-8法检测SF的增殖情况。结果 RA患者血清中SHH的含量较SLE、AS患者及正常组含量升高。成功建立CIA模型及分离培养SF;CIA-SF表达SHH较正常组SF高。给予GANT61处理72 h,CIA-SF中SHH蛋白表达降低且细胞增殖水平下降。结论 SHH参与RA发病与CIA-SF增殖有关。
- 李慧秦苏萍孙德旭潘伟李向阳孔凡运郑葵阳汤仁仙
- 关键词：滑膜成纤维细胞SHH
- 加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节FGF-2表达的影响
- 2015年
- 目的观察加巴喷丁(GBP)对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠背根神经节成纤维细胞生长因子2(FGF-2)蛋白表达的影响,以探讨其镇痛机制。方法将80只SD大鼠随机分为C组、DNP组、SC+DNP组和GBP+DNP组,各20只。除C组外,其他各组采用腹腔注射STZ建立DNP模型。SC+DNP组和GBP+DNP组在造模第15天开始分别腹腔注射生理盐水、GBP(50 mg/kg),每天1次,连续7 d。在造模前1天及造模后3、7、10、14、21、28天测定各组大鼠的缩足反射机械刺激阈值(PWMT)和缩足反射热辐射潜伏期(PWTL);免疫组织化学法和Western blotting法检测大鼠背根神经节中的FGF-2。结果与C组相比,DNP组、SC+DNP组、GBP+DNP组造模后3、7、10、14、21、28天PWMT和PWTL低(P均<0.05)。与DNP组及SC+DNP组相比,GBP+DNP组造模后21天PWMT和PWTL高(P均<0.05)。造模后21天,DNP组、SC+DNP组和GBP+DNP组背根神经节内FGF-2蛋白含量较C组高,GBP+DNP组较DNP组、SC+DNP组低(P均<0.05)。结论 GBP可通过抑制DNP大鼠背根神经节内FGF-2的表达,从而减轻大鼠神经病理性痛。
- 孙德旭李向阳王林秦苏萍
- 关键词：加巴喷丁成纤维细胞生长因子2
- 人参皂苷Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤中NAIP表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:观察人参皂苷Rb1对神经元凋亡抑制蛋白(neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP)在脑缺血再灌注损伤中表达的影响,探讨人参皂苷Rb1对缺血性脑病的防治机制。方法:线栓法阻断大鼠大脑中动脉2h,再灌注3h～5d制备脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法标记NAIP阳性细胞,观察人参皂苷Rb1对NAIP阳性细胞数的影响。结果:缺血再灌注后,缺血半暗带内的NAIP阳性细胞表达增加,海马CA1区等部位的NAIP阳性细胞数量也明显增加,而缺血中心区无NAIP阳性细胞的表达。实验对照组中NAIP阳性细胞数量随再灌注时间延长逐渐升高,12h达到高峰,至5d时NAIP阳性细胞数量表达低于正常水平。实验用药组中NAIP阳性细胞数量在2d时达到高峰,且其高峰值明显高于实验对照组中的高峰值,后随再灌注时间的延长而逐渐下降,至5d时仍处于较高水平。结论:脑缺血再灌注后,NAIP表达增加是脑组织对损伤的一种保护性反应,其对缺血区周围的神经细胞的保护作用更为明显。NAIP在脑组织中的表达具有一定的时间规律性,并且人参皂苷Rb1可能通过上调NAIP的表达发挥对受损脑组织的保护作用。
- 孙德旭萧洪文袁琼兰杨朝鲜邓莉高小青龚林
- 关键词：人参皂苷RB1缺血再灌注脑损伤
- ELISA法检测血清抗丝聚蛋白抗体对类风湿性关节炎的诊断价值被引量：2
- 2013年
- 目的探讨ELISA法检测血清抗丝聚蛋白抗体(AFA)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值。方法分别采用ELISA法和免疫荧光法检测RA(RA组,50例)、系统性红斑狼疮(SLE组,20例)、强直性脊柱炎(AS组,20例)患者和健康者(C组,20例)的血清AFA,比较两种方法检测血清AFA对RA诊断的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率。结果 ELISA法和免疫荧光法检测AFA阳性率:RA组为74%和52%,SLE组为15%和0,AS组为5%和10%,C组均为0。ELISA法检测AFA对RA诊断的敏感度高于免疫荧光法(P<0.05),两种方法检测AFA对RA诊断的特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率无统计学差异。两种方法检测AFA的结果密切相关(r=0.63,P<0.05)。结论 ELISA法检测血清AFA对RA有较高的诊断价值。
- 秦苏萍孙德旭李小翠王晓天杜文平汤仁仙郑葵阳
- 关键词：酶联免疫吸附试验免疫荧光法类风湿性关节炎
- 免疫金银法检测抗角质蛋白抗体的影响因素
- 2015年
- 目的：探讨免疫金银法检测抗角质蛋白抗体（AKA）的影响因素.方法：收集AKA阳性的类风湿性关节炎患者血清20份,同时收集20份正常健康者血清作为对照,采用免疫金银法检测上述血清AKA,检测中采用不同的封闭液、不同浓度的金标抗体、不同的显色时间,比较分析不同条件下免疫金银法检测AKA的阳性率及结果易判断程度,以确定较合适的检测条件.同时采用免疫荧光法检测AKA,比较2种方法检测AKA的敏感性.结果：以含10％～20％的羊血清及1％BSA的封闭液、1：80～1：320的金标抗体、10～15 min的显色时间为较合适的检测条件.免疫金银法检测AKA较免疫荧光法敏感性高,且差别有统计学意义.结论：免疫金银法检测AKA对类风湿性关节炎具有较高的敏感性和特异性,临床上用于类风湿性关节炎的辅助诊断具有较高的诊断价值.
- 孙德旭秦苏萍杜文平
- 关键词：免疫金银法抗角质蛋白抗体类风湿性关节炎
- 细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建
- 2013年
- 目的构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞。方法分别克隆FGF18基因启动子区域的5'同源臂和3'同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒。提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区。结果经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC。结论成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产。
- 孙德旭秦苏萍王晓天李小翠刘志强
- 关键词：绿色荧光蛋白细菌人工染色体同源重组
