李慧
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金国家自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用自制细胞培养罐小规模制备抗衣原体单抗的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 建立简便、经济的小规模制备单抗的罐培养方法。方法 使用自制细胞培养罐培养抗衣原体杂交瘤细胞株 ,定时细胞计数 ,测定培养上清液中葡萄糖、乳酸及抗体含量 ,微量免疫荧光法测定单抗效价。结果 5d内细胞密度从 5× 10 8/L增至 1× 10 10 /L ,活细胞数为 1.4 5× 10 9/L ,纯化抗体为 0 .4 4g/L ,总量达 11mg ,3株杂交瘤细胞均获得效价为 1∶2 0 4 8的培养上清。结论 自制细胞培养罐可以纯批式小规模制备单抗 ,污染少 。
- 王慧宁波周峰李慧刘晓梅汤仁仙
- 关键词：单克隆抗体细胞培养衣原体
- CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定被引量：12
- 2014年
- 目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。
- 秦苏萍李慧李小翠王晓天汤仁仙孙德旭
- 关键词：滑膜成纤维细胞原代培养关节炎
- Sonic Hedgehog(SHH)促进胶原蛋白诱导关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Sonic Hedgehog(SHH)在滑膜成纤维细胞增殖中的作用。方法收集类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、强直性脊柱炎(AS)患者及健康正常人血清样本各(30例),ELISA检测上述血清SHH的含量。SD大鼠皮内注射2型胶原蛋白(Col2)诱导RA大鼠模型(CIA),取其滑膜组织原代培养滑膜成纤维细胞(SF)。免疫荧光细胞化学染色法检测vimentin表达鉴定SF,并检测SHH在SF中的表达。培养SF给予SHH-胶质瘤相关癌基因1(Gli-1)通路特异性阻断剂GANT61处理72 h,Western blot法检测SF表达SHH的变化情况,CCK-8法检测SF的增殖情况。结果 RA患者血清中SHH的含量较SLE、AS患者及正常组含量升高。成功建立CIA模型及分离培养SF;CIA-SF表达SHH较正常组SF高。给予GANT61处理72 h,CIA-SF中SHH蛋白表达降低且细胞增殖水平下降。结论 SHH参与RA发病与CIA-SF增殖有关。
- 李慧秦苏萍孙德旭潘伟李向阳孔凡运郑葵阳汤仁仙
- 关键词：滑膜成纤维细胞SHH
- 快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体
- 2014年
- 目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。
- 秦苏萍李慧王晓天李小翠郑葵阳汤仁仙
- 关键词：类风湿性关节炎
- Evi1基因在急性髓系白血病中的表达及意义被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨急性髓系白血病 (AML)中Evi1基因的表达及意义。方法 应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系 (Evi1阳性细胞株 )、94例AML(初治 49例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 10名正常对照Evi1基因的表达。结果 ① 10名正常人骨髓单个核细胞中无Evi1mRNA的表达 (阴性 ) ,HEL细胞系Evi1阳性。②AML患者Evi1基因总的阳性表达率为 18.1% (17/94) ,M5型未见表达 ,M1～M4各型的阳性率无差异 (P >0 .0 5)。AML初治、复发、完全缓解的Evi1基因阳性率分别为 2 6.5%、17.4%、4.5% ,各组间无明显差异 (P >0 0 5)。③AML初治患者中Evi1阳性表达者首次完全缓解 (CR1)后缓解持续时间短于Evi1阴性表达者 (P <0 0 1) ,早期病死率 (确诊后 3个月内死亡 )明显升高 (P <0 .0 1)。结论 Evi1基因在AML的发病中可能起一定作用 。
- 汪海岩徐开林潘秀英李振宇李慧李德鹏
- 关键词：急性髓系白血病预后
- 性别差异对类风湿性关节炎大鼠模型的影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察性别差异对类风湿性关节炎大鼠模型的影响。方法健康成年SD大鼠40只，雌雄各半，随机分4组：雄性、雌性对照组，雄性、雌性模型组。模型组大鼠尾根部皮内注射Ⅱ型胶原及弗氏完全佐剂诱导类风湿性关节炎模型。观察建模后第1、2、3、4、5、6周大鼠的一般情况、体重、踝关节直径、关节炎指数评分的变化情况。结果与雄性模型组相比，雌性模型组大鼠关节炎症状出现早且急性期维持时间长，踝关节直径增加更明显，关节炎指数评分较高。结论采用注射胶原法诱导大鼠类风湿性关节炎动物模型，雌性大鼠更易于建模。
- 秦苏萍李慧李向阳汤仁仙郑葵阳
- 关键词：类风湿性关节炎性别动物模型
- IHH-Gli信号通路在CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖中的作用被引量：4
- 2015年
- 目的初步探讨IHH-Gli信号通路在胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast,SF)增殖中的作用。方法注射胶原诱导CIA大鼠模型,采用组织块贴壁法培养大鼠膝关节SF,免疫荧光法检测Vimentin鉴定细胞纯度,免疫荧光法检测IHH-Gli通路相关分子(IHH、Ptc、Smo及Gli1)的表达情况,给予GANT61阻断IHH-Gli信号通路,观察细胞形态变化、CCK8法检测细胞增殖情况、免疫荧光法检测糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)表达变化情况。结果病理及影像学检查显示CIA模型建立成功,培养的细胞95%以上均表达Vimentin,CIA-SF表达IHH、Ptc、Smo及Gli1蛋白,且CIA-SF表达IHH蛋白较正常SF高,10μmol/L及15μmol/L的GANT61能显著抑制CIA-SF的增殖,且降低GSK-3β的蛋白表达水平。结论 IHH-Gli信号通路参与CIA-SF的增殖机制,可能成为研究RA治疗药物的新靶点。
- 秦苏萍孙德旭李慧李向阳潘伟郑葵阳汤仁仙
- 关键词：滑膜成纤维细胞细胞增殖
