李小翠
- 作品数：29 被引量：90H指数：6
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术生物学更多>>
- CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定被引量：12
- 2014年
- 目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。
- 秦苏萍李慧李小翠王晓天汤仁仙孙德旭
- 关键词：滑膜成纤维细胞原代培养关节炎
- JNK磷酸化Bad在脑缺血神经元凋亡中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨JNK磷酸化Bad在大鼠缺血性神经元凋亡中的作用。方法 20只大鼠均分为4组:假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SP600125组。制作大鼠全脑缺血模型,应用免疫沉淀和免疫印迹法检测大鼠脑缺血复灌1 d海马CA1区神经元Bad与14-3-3及Bad与Bcl-Xl的结合、Bad丝氨酸128位磷酸化[p-Bad(S128)]水平、Caspase-3蛋白表达情况。结果与缺血复灌组相比,SP600125组海马CA1区神经元Bad与14-3-3的结合明显增高,Bad与Bcl-Xl的结合、p-Bad(S128)、Caspase-3表达显著减少(均P<0.05)。结论 JNK介导的Bad(S128)磷酸化在大鼠缺血性脑损伤中发挥了重要作用。
- 王晓天刘晓梅尤红娟李小翠秦苏萍汤仁仙宋远见
- 关键词：BADJNK丝裂原活化蛋白激酶类凋亡脑缺血
- 白藜芦醇促TRAIL诱导PC-3细胞凋亡的作用
- 2014年
- 目的研究白藜芦醇(Res)促进肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白诱导人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用。方法实验分为TRAIL蛋白组以及联合应用白藜芦醇和TRAIL蛋白的联合用药组;采用CCK8法检测细胞增殖情况,确定白藜芦醇的用药浓度;通过CCK8法、流式细胞术检测TRAIL蛋白组、联合用药组细胞增殖和凋亡情况;分光光度法检测两组细胞caspase-8、caspase-3活性。结果 CCK8结果提示白藜芦醇的用药浓度为50μmol/L;联合用药组PC-3细胞的增殖率明显低于TRAIL蛋白组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,联合用药组PC-3细胞的凋亡率明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05);caspase活性检测结果显示,联合用药组PC-3细胞caspase-8、caspase-3的活性明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05)。结论白藜芦醇能够促进TRAIL蛋白诱导的PC-3细胞凋亡,为肿瘤的生物学治疗提供新的材料。
- 李小翠尤红娟李向阳华慧汤仁仙
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体白藜芦醇PC-3凋亡
- CBL应用于医学微生物理论教学的初步探索被引量：10
- 2014年
- 针对医学微生物学的课程特点,对五年制临床医学的部分学生采用CBL教学,并比较CBL与LBL的教学效果。结果表明,CBL组学生的表达能力、自主学习能力、创新思维能力、团队协作能力明显提高,可为医学微生物学教学改革提供借鉴。
- 尤红娟刘晓梅李小翠孙伟郑葵阳刘莹汤仁仙
- 关键词：CBL医学微生物学教学改革
- p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中的作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法①制作大鼠全脑缺血模型,免疫印迹法检测假手术组、脑缺血复灌6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK、p38MAPK蛋白表达。②免疫印迹法检测假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SB203580组p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas和Caspase-3蛋白表达。结果①与假手术组相比,脑缺血再灌注6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK蛋白表达水平逐渐升高,于1 d达高峰(P均<0.05)。②与缺血复灌组和溶剂对照组相比,SB203580组p-p38MAPK、FasL和Caspase-3表达水平显著降低(P均<0.05)。结论 p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中发挥了重要作用。
- 王晓天刘晓梅尤红娟李小翠秦苏萍汤仁仙郑葵阳
- 关键词：P38MAPKFASFASL凋亡
- 炎症与趋化因子IL-6／MIP-2在癫痫小鼠海马的表达变化被引量：2
- 2014年
- 目的观察炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-2（mac—rophage inflammatory protein-2，MIP-2）在海人藻酸（kainie acid，KA）致痫模型小鼠海马的表达变化。方法雄性C57／B6小鼠48只，随机分为生理盐水对照组和KA致痫组，KA致痫组再根据KA注射后3、6、12、24、72h各时间点分为5个亚组。观察KA注射后小鼠的痫性发作情况，并采用Real—timePCR检测在KA注射后不同时间点小鼠海马IL-6和MIP-2的mRNA丰度变化，运用免疫组化法观察IL-6和MIP-2在海马的蛋白表达改变。结果与对照组比较，致痫模型组小鼠海马IL-6和MIP-2的mRNA水平在KA刺激3h明显升高（P〈0．05），24h达到高峰（P〈0．01），72h开始降低；与对照组相比，KA刺激24h，海马CA3区IL-6和MIP-2的蛋白表达显著升高。结论癫痫小鼠海马炎症因子和趋化因子表达水平升高，引发中枢炎症反应，可能成为癫痫发病的重要机制之-。
- 李小翠刘晓梅张清秀王晓天尤红娟汤仁仙郑葵阳
- 关键词：巨噬细胞炎性蛋白-2海人藻酸癫痫
- MLK3信号通路在癫痫及脑缺血海马CA3区神经元中的不同作用被引量：1
- 2014年
- 目的:研究混合性谱系激酶3(MLK3)信号通路对癫痫及脑缺血海马CA3区神经元的作用。方法 :采用海人藻酸(KA)或四动脉结扎法分别建立大鼠癫痫及全脑缺血模型,运用免疫印迹技术检测在KA注射后及脑缺血再灌注后不同时间海马CA3区MLK3和c-Jun的N端激酶(JNK)的活化水平;采用焦油紫染色,观察大鼠海马CA3区神经元的损伤。结果:KA刺激6 h,癫痫大鼠海马CA3区MLK3和JNK明显激活,1 d后仍维持在较高水平(P<0.05);MLK3和JNK的总蛋白表达并无显著改变。脑缺血大鼠海马CA3区,缺血再灌注后各时间点,MLK3和JNK并未出现明显的活化。此外,大鼠致痫后7 d,海马CA3区神经元大量死亡;缺血再灌注后7 d,海马CA3区神经元并未受到明显损伤。结论:MLK3/JNK信号通路参与了癫痫脑损伤海马CA3区神经元的损伤;但并未介导缺血性脑损伤海马CA3区神经元的存活。
- 李小翠王晓天张清秀尤红娟周峰汤仁仙郑葵阳刘晓梅
- 关键词：癫痫脑缺血再灌注海马CA3区JNK
- miR-383增强SLE患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达被引量：2
- 2011年
- 目的初步探讨microRNA-383（miR-383）对IL-2信号介导的系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Foxp3mRNA转录的影响。方法采用Westernblot方法检测14例SLE患者PBMCs中SOCS3蛋白表达水平，通过相关microRNA软件预测和Westernblot鉴定靶向SOCS3的microRNA，RT—PCR方法检测miR-383转染SLE患者的PBMCs中转录因子Foxp3mRNA的转录水平。结果Westernblot结果发现，SLE患者的PBMCs中SOCS3蛋白表达水平显著增加，miR-383抑制SOCS3蛋白表达。SLE患者PBMCs转染miR-383后Foxp3mRNA的转录水平显著增高。结论miR-383靶向抑制SOCS3，上调IL-2信号介导的SLE患者的PBMCs中Foxp3mRNA的转录水平。
- 史震张庆张海清李小翠郑葵阳周峰
- 关键词：系统性红斑狼疮SOCS3外周血单个核细胞FOXP3MRNA
- 人T淋巴细胞活化后羟甲基化的变化
- 2014年
- 目的初步探讨人T淋巴细胞活化后细胞内5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)和5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)的含量变化。方法成年健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)分别经刀豆蛋白(ConA)或CD3抗体和CD28抗体处理72 h后,采用免疫荧光法观察5-hmC和5-mC的变化,Real-time PCR检测TETs的mRNA转录水平。结果免疫荧光结果显示无论是经ConA非特异性刺激还是经CD3抗体和CD28抗体处理的人T淋巴细胞细胞核内,5-hmC水平明显高于5-mC,且后者从核内转位到胞浆;CD3抗体和CD28抗体处理后的TET2 mRNA转录水平显著高于非处理组。结论活化的T淋巴细胞中5-mC转变是由TET2调控的。
- 张庆史震李小翠刘晓梅汤仁仙郑葵阳周峰
- 关键词：T淋巴细胞
- 荷载Akt基因的PEG-PLGA/DOPE纳米粒的制备及对大鼠缺血性脑损伤的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨荷载Akt基因的聚乙二醇-乳酸羟基乙酸共聚物/二油酰磷脂酰乙醇胺(PEG-PLGA/DOPE)纳米粒(Akt-NPs)对脑缺血-再灌注(I-R)诱导的大鼠海马CA1区神经细胞损伤及血红素加氧酶1(HO-1)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法通过复乳法制备PEG-PLGA/DOPE纳米粒并对其进行表征。将48只SD大鼠随机均分为假手术组(A组)、全脑I-R组(B组)、I-R+Akt-NPs组(C组)和I-R+空载PEG-PLGA/DOPE纳米粒组(D组)。采用焦油紫染色和TUNEL染色检测全脑I-R后5d各组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡的情况,免疫印迹法检测各组HO-1和Caspase-3的表达。结果制备的纳米粒能够较好地荷载Akt基因。I-R后5d时,与A组相比,B组大鼠脑海马CA1区神经细胞凋亡率上升(P<0.05),HO-1表达减少(P<0.05),Caspase-3表达增加(P<0.05);与B组相比,C组大鼠脑海马CA1区神经细胞凋亡率下降(P<0.05),HO-1表达增加(P<0.05),Caspase-3表达减少(P<0.05)。结论 Akt-NPs减轻大鼠海马CA1区神经细胞的缺血性损伤作用与上调HO-1和下调Caspase-3表达有关。
- 张芳张兆成刘红芝吴健陈彦付燕燕戚大石李小翠牛坚赵子明温相如宋远见
- 关键词：AKT基因血红素加氧酶1缺血性脑损伤
