刘运超
- 作品数：64 被引量：85H指数：5
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展被引量：2
- 2008年
- 隐孢子虫病药物防治效果均不理想。因而,许多学者在隐孢子虫免疫方面进行了大量研究。本文综述了免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫保护作用,以期为该病的细胞免疫和免疫防治提供参考。
- 王秋霞庞玉芳鲁琨宁长申张丽萍李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- PCV2b衣壳蛋白C端连接不同B细胞表位对其免疫原性的影响被引量：1
- 2020年
- 为了研制廉价高效的猪圆环病毒2型(PCV2)亚单位疫苗,根据大肠杆菌密码子的偏好性合成PCV2b(GenBank:AY969004.1)cap基因全序列,利用PCR技术,分别将PCV2的2个B细胞表位(226LKDPPLNP233和195HVGLGTAF202)以单独和串联的方式连接到Cap的C端,成功构建至pE-SUMO表达载体,将3个重组载体转化表达菌株BL21(DE3)后诱导表达,经SDS-PAGE分析和Western Blotting鉴定,3种重组蛋白均以可溶形式表达且表达正确。对3种重组蛋白分别进行镍柱亲和层析纯化,再用SUMO蛋白酶除去融合标签,获得无标签的Cap-e1、Cap-e2和Cap-e12蛋白,并分别与相应的弗氏佐剂等体积乳化,将20只6周龄大小的雌性Balb/c小鼠随机分成5组,分别免疫3种重组蛋白,同时设置疫苗组和PBS组作为对照组,并进行免疫评价,比较C末端连接的不同B细胞表位对Cap免疫原性的影响。抗体检测结果表明,除第2周外,各试验组的抗体水平均显著高于PBS组,且连接2个表位的Cap-e12蛋白产生的抗体水平高于只连接1个表位的蛋白(Cap-e1、Cap-e2),而在第6周时,Cap-e12蛋白抗体水平与疫苗组无显著差异。综上Cap的免疫原性与连接表位数量有关,连接2个表位后能显著提高Cap的免疫原性。
- 刘晴坤冯华任春晓魏蔷刘运超张改平
- 关键词：衣壳蛋白B细胞表位免疫原性
- CCG-1423抑制猪流行性腹泻病毒体外感染的方法及应用
- 本发明涉及一种小分子抑制剂CCG‑1423抑制猪流行性腹泻病毒体外感染的方法及应用，该抑制剂可用于制备抑制猪流行性腹泻病毒感染的抗病毒药物。试验证明，在猪肾细胞LLC‑PK1体外感染PEDV过程中添加浓度为2μM的CCG...
- 魏蔷黄慧敏刘运超金前跃贾广敏张改平
- 与猪瘟病毒E2蛋白特定区域结合多肽配基设计及应用
- 本发明涉及与猪瘟病毒E2蛋白特定区域结合多肽配基设计及应用，属于多肽设计及病毒抗原检测领域。其中，所述的多肽配基序列为FYKRTSSS。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术，在黄病毒科病毒E2蛋白晶体结构的基础上，通过分子...
- 王方雨邓瑞广余秋颖邢广旭杨艳艳刘运超滕蔓郝俊芳柴书军赵东郭振华王晶
- 一种仔猪犬牙剪钳
- 本发明公开了一种仔猪犬牙剪钳，包括牙钳和牙剪，牙钳包括左钳瓣和右钳瓣，牙剪包括左剪瓣和右剪瓣，左钳瓣和右钳瓣靠轴一侧设置有凹槽，所述左剪瓣和右剪瓣分别匹配套装于左钳瓣和右钳瓣内侧，所述左钳瓣、左剪瓣、右剪瓣和右钳瓣依次叠...
- 焦文强邢广旭陈直徐引弟刘运超王治方王克领
- 文献传递
- 2014—2018年猪流行性腹泻病毒N基因遗传变化分析被引量：1
- 2019年
- 为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因的分子流行病学情况,采用RT-PCR方法对2014—2018年采集到的河南、河北、山东、山西、甘肃、湖北、江西以及上海8省市共205份疑似PEDV阳性病料进行PEDV检测,使用RT-PCR方法扩增得到PEDV的N基因片段,回收PCR产物并与pMD20-T载体进行连接,挑选阳性克隆进行测序,分析研究PEDV遗传变异情况。结果显示,205份样品中,有191份样品为PEDV阳性,共得到19株PEDV的N基因序列,N基因全长均为1 326 bp,没有碱基的缺失和插入;将检测到的PEDV的N基因序列与国内外分离株进行比对发现,核苷酸的同源性为94.8%~99.5%,氨基酸的同源性为95.0%~99.3%。进化树分析发现,得到的19株N基因序列与CV777、CH-S等国内外毒株亲缘关系较远;其中,16株与MN、USA-Indiana-2013、USA-Iowa107-2013等近年分离株在一个分支上,为G2a亚群;CH-HENWZ-2015、CH-HENPY-2014、CH-HENZMDPY-2017这3株序列形成另一个分支,为G2b亚群。综上可知,我国PEDV流行广泛,病毒变异频繁。研究结果可为新型疫苗研发以及检测方法的建立奠定基础。
- 邢广旭焦文强刘运超刘运超王治方徐引弟王克领张改平
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N基因分子流行病学
- 依诺沙星单链抗体核心氨基酸序列及其应用
- 本发明涉及一种依诺沙星单链抗体的核心氨基酸序列及应用，属于抗菌药物抗原检测领域。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术，在依诺沙星单链抗体晶体结构的基础上，通过分子对接技术，搜寻虚拟多肽库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多...
- 张改平王方雨邢广旭刘运超杜加茹胡曼邓瑞广
- 文献传递
- 猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
- 2024年
- 为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为387RRQDN^(391)和578QRKE^(581),而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN^(391)和578QRKE^(581)抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。
- 柴书军杨苏珍刘运超冯华魏蔷王方雨金前跃张改平
- 关键词：单克隆抗体抗原表位
- 用RT-PCR技术快速检测猪瘟病毒
- 本文根据猪瘟病毒(CSFV)端非编码区保守序列设计一对引物，建立了用RT-PCR检测CSFV的方法。应用异硫氰酸胍-酚-仿一步抽提法提取病料细胞总RNA，经RT-PCR扩增，得到与设计片段大小相同的产物(581bp)，而...
- 刘运超陈玉梅王爱萍张改平鲁琨李乔木王秋霞
- 关键词：猪瘟病毒聚合酶链式反应
- 猪流行性腹泻病毒部分非结构蛋白真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2020年
- 为了对猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白进行真核表达载体的构建和表达,进一步研究非结构蛋白与宿主细胞蛋白互作,试验以PEDV-Hubei-2016株为基础,以真核表达质粒pCDNA3.1为载体,根据PEDV非结构蛋白在基因组的位置克隆8个非结构蛋白(NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10)基因,通过在引物添加XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点将目的基因连接到pCDNA3.1载体,酶切和测序验证插入序列。将构建正确的载体转染HEK-293细胞,24 h后收取细胞进行Western-blot检测。结果表明:本试验成功扩增了NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10蛋白的基因,连接质粒,酶切、测序验证序列正确。将构建正确的质粒转染HEK-293细胞,24 h后收取细胞,Western-blot检测结果表明,NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10蛋白出现与预期大小一致的条带。说明本试验构建的8个真核表达质粒在HEK-293细胞中成功表达。
- 焦文强邢广旭邢广旭刘运超徐引弟王克领
- 关键词：猪流行性腹泻病毒非结构蛋白真核表达免疫印迹
