邢广旭
- 作品数:202 被引量:265H指数:8
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- 发文基金:河南省科技攻关计划国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 新城疫病毒F基因真核表达载体的构建及瞬时表达
- 2007年
- 应用PCR扩增出新城疫病毒F基因,将其克隆入pGEM-T载体,测序。然后将NDVF基因与高效的真核表达载体pcDNA4/HisMax相连,构建NDVF基因重组真核表达质粒pc4F,采用Superfect转染试剂将pc4F瞬时转染COS-7细胞,应用细胞免疫组化法检测其在细胞中的表达情况。结果表明,F基因能够在COS-7细胞中成功表达。
- 王青张彦明王选年张改平胡建和杨苏珍赵东邢广旭徐彦召赵光辉段艳华
- 关键词:新城疫病毒F基因真核表达
- 猪流行性腹泻病毒E蛋白诱发细胞未折叠反应的分子机制
- 2022年
- 为阐明猪流行性腹泻病毒(PEDV) E蛋白诱导Vero-E6细胞内质网应激分子机制,采用RT-PCR方法扩增得到E蛋白基因,经XhoⅠ和BamHⅠ酶切后与同样酶切的p-EGFP-N1载体使用T4 DNA连接酶进行连接,成功构建了表达载体,与pCDNA 3.1-GRP78共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦试验和Western blot验证E蛋白的细胞定位,并揭示其激活细胞内质网应激的分子机制。结果表明,通过共聚焦荧光显微镜证实E蛋白定位在细胞中,Western blot方法验证E蛋白可以上调Vero-E6细胞GRP78蛋白表达水平,诱导Vero细胞内质网应激。进一步采用Western blot验证E蛋白通过PERK-eIF2α信号通路激活未折叠蛋白反应。本研究为探究PEDV致病机制提供了新的思路。
- 邢广旭焦文强焦文强张改平
- 关键词:猪流行性腹泻病毒E蛋白信号通路
- 鸡新城疫病毒HN表位抗原多肽的免疫原性鉴定及应用研究
- 新城疫病毒/(Newcastle disease virus,NDV/)分类上属于副粘病毒科,为有囊膜的单股、负链、不分节段的RNA病毒,基因组全长约15 kb,编码六种病毒结构蛋白。其中HN和F是NDV最重要的致病性抗...
- 邢广旭
- 关键词:新城疫病毒B细胞抗原表位多肽合成
- 文献传递
- 鹅星状病毒刺突蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量:2
- 2022年
- 为了制备鹅星状病毒(goose astrovirus, GAstV)刺突(Spike)蛋白的单克隆抗体,并对获得的单克隆抗体的生物学特性进行鉴定,将大肠杆菌表达的截短Spike蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和单克隆抗体的筛选来获得阳性杂交瘤细胞,并进一步利用免疫印迹和间接免疫荧光技术进行单抗的鉴定;采用ELISA技术进行单克隆抗体亚型、抗体效价的测定;同时根据GAstV XX株Spike蛋白序列合成重叠的多肽库进行单抗识别的抗原表位鉴定。共获得3株阳性杂交瘤细胞,分别命名为1A5、2B4、12E6;免疫印迹和间接免疫荧光实验显示3株单克隆抗体均与Spike蛋白具有良好的免疫反应,其中2B4、12E6可与GAstV发生反应;亚型鉴定结果显示单抗12E6、2B4为IgG2b亚类,单抗1A5为IgG2a亚类;轻链均为κ链;敏感性结果显示,抗体效价都在1∶51 200以上;抗原表位的鉴定结果表明单抗1A5识别的抗原表位为(EP16)ELRNRLNIADGDYVI,单抗2B4识别的抗原表位为(EP21)AGDSNPGETFQNFKM。本研究成功制备了针对GAstV Spike蛋白的单克隆抗体,并鉴定出2个新的抗原表位,为建立快速、简便的GAstV检测方法奠定了基础。
- 卢清侠李伟金前跃郭振华冯丽丽邢云瑞柴书军邢广旭张改平
- 关键词:刺突蛋白单克隆抗体抗原表位
- 鸡IBDV VP3蛋白B细胞抗原表位Ⅱ
- 本发明属于分子免疫学领域,主要涉及鸡传染性法氏囊病病毒IBDV VP3蛋白的系列多肽片断,特别是涉及VP3蛋白中组成B细胞抗原表位的系列多肽片断。由本发明的鸡传染性法氏囊病病毒IBDV VP3蛋白B细胞抗原表位设计的免疫...
- 张改平王选年赵东乔宏兴江涛席俊杨艳艳李青梅柴书军邢广旭杨继飞李学伍肖志军邓瑞广
- 文献传递
- 快速检测微量百菌清的试纸条及其制备方法
- 本发明涉及一种快速检测微量百菌清的试纸条及其制备方法。该试纸条底层为支撑层,中间层为吸附层,保护层固定在吸附层上,吸附层从测试端依次为吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层,其中纤维素膜层上有用偶联百...
- 邓瑞广职爱民胡骁飞邢广旭王玲玲张改平
- 文献传递
- 瘦肉精多残留联检试纸卡
- 本实用新型公开一种“瘦肉精”多残留分析的金标层析检测试纸卡,包括塑料支撑物和试纸芯,试纸芯由样品垫、金标物结合垫、层析膜和吸水垫依次粘贴到衬板上制成,金标物结合垫为吸附有二~五种混合金标抗体的玻璃纤维棉,金标抗体为胶体金...
- 职爱民胡骁飞张改平邓瑞广李孟顺杨继飞刘庆堂赵东邢广旭柴书军杨艳艳李青梅滕蔓
- 文献传递
- 一条抑制猪瘟病毒感染活性的多肽及其应用
- 本发明一条抑制猪瘟病毒感染活性的多肽及其应用,该多肽序列为KRWWSHK(P<Sub>8</Sub>)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E2蛋白晶体结构为模板,同源建模获得猪瘟病毒E2蛋白的三维结构,借助虚拟分子对接技术,最终获...
- 王方雨张改平邓瑞广余秋颖邢广旭郝慧芳孙亚宁赵东柴书军
- 文献传递
- 猪丹毒杆菌抗原快速检测试纸条
- 本发明涉及一种猪丹毒杆菌抗原检测试剂显示的器具,特别是涉及一种猪丹毒杆菌抗原快速诊断试纸条,试纸条含有支撑层、反应试剂载体吸附层,支撑层为不吸水薄片条,反应试剂载体吸附层粘贴于支撑层上,从样品测试端依次为纤维层,猪丹毒杆...
- 张改平李学伍邢广旭邓瑞广赵东杨继飞柴书军王方雨
- 文献传递
- 一步检测猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒抗体的试纸条
- 本实用新型公开了一种一步检测猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒抗体的试纸条,该试纸条含有支撑层、吸附层和保护层,吸附层附着在支撑层上,保护层附着在吸附层上,吸附层从测试端依次为样品纤维层、吸附金标物纤维层、纤维素膜层和吸水材料层...
- 张改平肖治军邓瑞广李学伍杨艳艳杨继飞赵东王爱萍邢广旭柴书军刘庆堂
- 文献传递