陈雄飞
- 作品数：16 被引量：67H指数：4
- 供职机构：沧州市中心医院更多>>
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- 宽切缘根治切除治疗伴微血管侵犯的原发性肝癌患者预后及原发性肝癌手术患者短期预后影响因素分析被引量：31
- 2019年
- 目的分析宽切缘根治切除治疗伴微血管侵犯(microvascular invation,MVI)的原发性肝癌患者预后及原发性肝癌手术患者短期预后的影响因素。方法选取2012年1月—2015年12月我院收治的345例原发性肝癌患者作为研究对象,对其临床及随访资料进行回顾性分析,比较MVI阳性组和MVI阴性组采用宽切缘与窄切缘手术治疗后3年的复发率及生存率;比较宽切缘组(切缘≥1cm)和窄切缘组(切缘<1cm)患者术后并发症发生情况;分析影响原发性肝癌手术患者短期预后的因素。结果MVI阳性组采用宽切缘手术切除患者较窄切缘手术切除患者,术后3年复发率明显降低,3年生存率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);MVI阴性组不同手术切缘患者术后3年复发率及生存率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。宽切缘组和窄切缘组术后总并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。非条件多因素logistic回归分析显示,窄切缘、肿瘤直径>5cm、MVI阳性、肿瘤包膜不完整及血清甲胎蛋白水平过高为原发性肝癌手术患者短期预后的独立危险因素。结论宽切缘根治切除治疗伴MVI的原发性肝癌患者预后较好,且具有一定的安全性;窄切缘、肿瘤直径>5cm、MVI阳性、肿瘤包膜不完整及血清甲胎蛋白水平过高为原发性肝癌手术患者短期预后的独立危险因素。
- 孔德帅袁俊建陈雄飞张雷赵秀雷李凤山刘汝海
- 关键词：肝肿瘤预后
- FXYD6过表达对肝细胞癌SMMC7721细胞5-Fu化疗敏感性的影响被引量：1
- 2021年
- 目的观察FXYD离子转运调节因子6(FXYD6)过表达对肝细胞癌SMMC7721细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法将肝细胞癌SMMC7721细胞分为过表达组和对照组,分别转染pcDNA3.1/FXYD6和pcD-NA3.1/Vector真核质粒,培养48 h筛选SMMC7721抗性克隆。取两组转染后的抗性克隆细胞,分别加入终浓度为0、12.5、25、50、100μg/mL的5-Fu作用24、36、48 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。取两组转染后的细胞,加入终浓度为25μg/L的5-Fu作用48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着5-Fu浓度增加和作用时间延长,两组细胞增殖抑制率均呈升高趋势。5-Fu浓度为12.5μg/mL时,两组作用24、36、48 h的细胞增殖抑制率比较均无明显差异(P均>0.05);5-Fu浓度为25、50、100μg/mL时,过表达组作用24、36、48 h的细胞增殖抑制率均明显低于对照组同时间点(P均<0.01)。观察组细胞凋亡率为35.62%±3.98%,对照组为46.19%±6.60%,两组比较P<0.01。结论 FXYD6蛋白过表达可降低肝细胞癌SMMC7721细胞对5-Fu的化疗敏感性。
- 陈雄飞丁立爽孔德帅赵秀雷廖丽丽张耀敏李凤山刘汝海
- 关键词：肝细胞癌SMMC7721细胞5-氟尿嘧啶化疗敏感性
- miR-375靶向调控JAK2表达抑制胃癌细胞增殖、侵袭与迁移被引量：4
- 2020年
- 目的:研究miR-375对胃癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,以及可能的调控机制。方法:实时荧光定量PCR检测胃癌组织、癌旁组织和3种胃癌细胞系(MKN28、SGC-7901和BGC-823)中miR-375的表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-375与JAK2的靶向作用关系;Western blot检测SGC-7901细胞中JAK2蛋白的表达情况;MTT检测miR-375对SGC-7901细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测miR-375对SGC-7901细胞侵袭与迁移能力的影响。结果:实时荧光定量qPCR结果显示,miR-375在胃癌组织中的表达量明显低于癌旁组织(P<0.05),JAK2在胃癌组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05);3种胃癌细胞株中,SGC-7901细胞中miR-375表达量最低;miR-375与JAK23’-UTR有特异性结合区域,miR-375靶向调控JAK2的表达;转染miR-375模拟物后,SGC-7901细胞的增殖、侵袭与迁移的能力显著减弱(P<0.05)。结论:miR-375在胃癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调控JAK2来抑制胃癌SGC-7901细胞的恶性生物学行为。
- 李凤山王振勇柴伟陈雄飞刘汝海
- 关键词：胃肿瘤JAK2增殖迁移
- FXYD6 蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义
- 2021年
- 目的检测FXYD6蛋白在肝细胞癌组织及其癌旁组织中的表达,并分析其临床病理学意义。方法回顾性收集沧州市中心医院2012年3月至2018年1月期间的根治性切除的肝细胞癌蜡块80例及其癌旁组织40例,采用免疫组织化学链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合法(SABC)检测FXYD6蛋白的表达情况,并分析FXYD6蛋白表达与肝细胞癌患者的临床病理学特征、术后早期复发及生存时间的关系。结果FXYD6蛋白在肝细胞癌组织中的表达阳性率高于癌旁组织[77.5%(62/80)比40.0%(16/40),P<0.001]。FXYD6蛋白在肝细胞癌组织中的表达与性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤最大径、肿瘤数目、术前AFP水平和HBV或HCV感染均无关(P>0.05),而与肿瘤包膜完整性、微血管侵犯和TNM分期均相关(P<0.05)。FXYD6蛋白表达阳性组的早期复发率高于阴性表达组[53.2%(33/62)比16.7%(3/18),P=0.006],然而多因素分析结果显示,FXYD6蛋白表达不是早期复发的独立危险因素(P=0.422)。FXYD6蛋白表达阳性组的术后生存情况差于阴性表达组(P=0.043),然而多因素分析结果显示,FXYD6蛋白表达不是总体生存的独立危险因素(P=0.754)。结论FXYD6蛋白在肝细胞癌组织中高表达,可能参与肝细胞的癌变及其进展,可能是肝细胞癌患者的一个不良预后因素。
- 陈雄飞丁立爽孔德帅赵秀雷廖丽丽张耀敏李凤山刘汝海
- 关键词：肝细胞癌早期复发预后
- 人FXYD6单克隆抗体库的制备及其在胆管癌诊断中的应用
- 第一部分人FXYD6抗原的表达与纯化
目的：构建含人FXYD6胞内区-G4S-FXYD6胞外区-G4S-GST-His6TAG基因序列的原核表达质粒，并诱导其表达，并对表达出的蛋白进行纯化。方法：构建去除FXYD...
- 陈雄飞
- 关键词：原核表达蛋白纯化单克隆抗体胆管癌分化程度
- 文献传递
- 离子通道相关蛋白FXYD6功能区的原核表达及纯化被引量：1
- 2010年
- 目的构建FXYD6蛋白功能区(FXYD6-ex)的原核表达质粒,并诱导FXYD6-ex在原核细胞中表达与纯化,以进一步研究FXYD6功能。方法用全长FXYD6 cDNA扩增FXYD6-ex,扩增产物插入克隆质粒载体pMD18-T Simple并用限制性内切酶酶切,将目的片段插入以限制性内切酶切后的表达质粒载体pET28a(+)中,经PCR电泳和测序证实后转化宿主大肠杆菌Rossetta,异丙基-β-8-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍柱纯化重组蛋白,十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶和Western blot检测鉴定蛋白表达及纯化情况。结果成功构建pET28a(+)-FXYD6-ex大肠杆菌表达载体,并实现该蛋白在大肠杆菌中的高表达,分离纯化的产物纯度达90%。结论本研究成功对FXYD6-ex进行原核表达及纯化;此为后续制备该蛋白抗体库及进一步研究其具体功能奠定了良好基础。
- 陈雄飞周宁新
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化
- hFXYD6真核表达载体构建及对人肝癌细胞系SMMC7721细胞的生物学作用的影响被引量：2
- 2017年
- 目的构建人肿瘤相关蛋白FXYD6真核表达载体pc DNA3.1-h FXYD6,研究其对人肝癌细胞系SMMC7721细胞增殖与侵袭的影响。方法扩增h FXYD6 c DNA,将其插入克隆质粒载体p MD18 T Simple,将限制性内切酶酶切后的目的片段插入以限制性内切酶切后的表达质粒载体pc DNATM 3.1/myc-His(-)B中,经聚合酶链反应(PCR)电泳和测序证实后转染至人肝癌细胞系SMMC7721细胞中,同时设pc DNA3.1空载体转染组和pc DNA3.1-h FXYD6载体转染组,比较两组细胞的增殖与侵袭情况。结果成功构建了pc DNA3.1-h FXYD6真核表达载体。转染真核质粒pc DNA3.1-h FXYD6的SMMC7721细胞,经培养48 h,电泳图显示用h FXYD6单克隆抗体识别的特异性蛋白条带。pc DNA3.1-h FXYD6表达载体组细胞较pc DNA3.1空载体转染组细胞增殖速度明显增快。pc DNA3.1空载体转染组、pc DNA3.1-h FXYD6表达载体组细胞穿透Boyden趋化小室滤膜的细胞数分别为(109.9±7.8)个、(167.6±9.3)个,两组差异有显著统计学意义(P<0.001)。结论成功构建的pc DNA3.1-h FXYD6真核质粒能在肝癌细胞系SMMC7721细胞中表达目的蛋白,h FXYD6可促进肝癌细胞增殖与侵袭,这为研究h FXYD6的具体作用机制奠定了基础。
- 陈雄飞张执全袁俊建郭忠健郭尧李凤山刘汝海
- 关键词：真核表达载体转染SMMC7721细胞生物学效应
- 胃癌术后小肠套叠一例
- 2019年
- 患者男,66岁,主因“食欲不振20d”收入院:2个月前曾行“胃癌根治术(全胃切除、食管空肠Roux-en-Y吻合)”“胃镜检查提示:胃癌术后改变,未见吻合口狭窄或潴留液情况。全腹增强CT提示:左上腹局部肠管排列欠规整、部分肠管壁略增厚,肠管略扩张、积气。
- 袁俊建王振勇陈雄飞李凤山刘汝海
- 关键词：小肠套叠胃癌术后胃癌根治术吻合口狭窄全胃切除食欲不振
- miR-143、miR-145联合血清AFP检测对原发性肝癌的临床诊断价值被引量：11
- 2019年
- 目的 探讨miR-143、miR-145联合血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对原发性肝癌的临床诊断价值。方法 选取2016年7月—2017年9月我院收治的原发性肝癌60例作为肝癌组,取同期肝硬化60例作为肝硬化组、健康体检者60例作为健康对照组。比较3组miR-143、miR-145、AFP水平,计算不同检查方式诊断原发性肝癌的灵敏度及特异度。结果 肝癌组miR-143、miR-145、血清AFP水平高于肝硬化组和健康对照组(P<0.05)。miR-143+miR-145+AFP诊断原发性肝癌的灵敏度及特异度高于AFP、miR-145+AFP、miR-143+AFP单一诊断(P<0.05)。结论 miR-143、miR-145在原发性肝癌患者血清中表达水平升高,联合AFP检测可提高诊断原发性肝癌的灵敏度及特异度。
- 袁俊建孔德帅陈雄飞张雷赵秀雷李凤山刘汝海
- 关键词：原发性肝癌MIR-143MIR-145血清甲胎蛋白
- 抗人FXYD6特异性多肽单克隆功能性抗体制备及生物学作用鉴定被引量：3
- 2018年
- 目的研制抗人转运调节因子(FXYD)6功能区单克隆抗体库,筛选分泌胞内、胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株并对鉴定胞外区单克隆抗体生物学作用。方法原核表达并纯化去除跨膜区域FXYD6功能区重组蛋白,FXYD6重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,多次筛选及克隆化,建立稳定分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区的单克隆抗体杂交瘤。分别应用间接酶联免疫吸附法(ELISA)、Western blot和免疫组织化学法鉴定抗体特异性及亚型,细胞流式技术筛选可识别天然构象的胞外区单克隆抗体,用腹水诱导法对胞外区单抗进行制备、纯化并检测亲和常数,高表达FXYD6的HepG2细胞系检测胞外区单抗的功能。结果成功获得分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区单克隆抗体的杂交瘤细胞库,制备出具有功能阻断性的胞外区单抗。结论制备的抗人FXYD6胞外区单抗可抑制HepG2细胞的增殖。
- 陈雄飞袁俊建张执全郭忠健郭尧刘汝海李凤山
- 关键词：生物学鉴定
