陈红梅
- 作品数：32 被引量：79H指数：5
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 宏基因组高通量测序技术在感染性疾病病原诊断中的临床应用
- 2022年
- 目的探讨宏基因组高通量测序技术(mNGS)在感染性疾病病原诊断中的临床应用。方法通过具体分析mNGS在4个临床典型病例中的应用,探讨mNGS的临床应用适应证及如何正确地判读结果。结果病例1病情危重,进展迅速,考虑感染可能,但病原不明,通过mNGS方法迅速锁定目标病原为钩端螺旋体。病例2为结核杆菌感染,病原培养需要时间较长,且阳性率低,常规方法联合mNGS可明显提高诊断率。病例3显示mNGS敏感度高,可检测到微量的基因产物,但也不排除检测过程中的痕量污染。所以在临床诊治过程中,应联合常规检测方法,结合流行病学史、临床表现及治疗反应综合判断,甄别假阳性可能。病例4显示mNGS因其高度敏感,对几乎所有病原微生物可无差别检测,所以其阴性结果对于排除感染亦具有较高的阴性预测值。结论mNGS在感染性疾病的病原学诊断方面具有独特的优势,是传统病原学检测方法的有益补充。
- 陈红梅张建欣赵英仁
- 关键词：感染性疾病病原诊断
- IL-2的真核表达载体对乙肝病毒基因疫苗的免疫佐剂效应被引量：3
- 2001年
- 单以乙肝病毒S区基因疫苗 (pCR3 1 S)或联合IL 2真核表达载体 (pDOR IL 2 )注射BALB/c小鼠 (H 2 d)股四头肌 ,ELISA法检测小鼠血清抗HBs,4h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。免疫 8周后 ,单注射pCR3 1 S及共注射IL 2真核表达载体的小鼠血清 45 0nmA值分别为 1 2 4± 0 1及 1 98± 0 17。CTL细胞杀伤活性分别为 (5 0 5± 6 4) %、 (6 1 9± 7 1) % ,两组均有明显差异 (P <0 0 1)。脾细胞悬液经抗CD4+ 单克隆抗体处理后CTL细胞杀伤活性分别为 (4 8 3± 5 9) %、 (5 6 2±6 1) % ,抗CD8+ 单克隆抗体处理后分别为 (10 6± 1 4) %、 (13 6± 1 3) %。结果表明 ,IL 2的真核表达载体能够提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答 ,CTL细胞杀伤活性主要由CD8+ 执行。基因疫苗可能用于预防及治疗HBV感染。
- 杜德伟刘清泉陈红梅李谨革连建奇冯志华周永兴姚志强
- 关键词：基因疫苗乙型肝炎表面抗原IL-2免疫佐剂真核表达载体白细胞介素2
- 重组质粒pcDNA3.1S2S/Fc在小鼠诱导免疫反应的观察
- 2009年
- 目的探讨S2S/Fc融合基因疫苗诱导小鼠HBV preS2S特异性体液和细胞免疫应答情况。方法取pcD-NA3.1S2S/Fc、pcDNA3.1S2S+pCMVsFc、pcDNA3.1S2S和空载体对照免疫BALB/c小鼠。在免疫动物2、4和6周后检测血清抗-HBs水平;在初次免疫7周后,测定免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性及细胞因子的分泌水平。结果经pcDNA3.1S2S/Fc免疫小鼠6周抗体滴度升至最高,免疫脾细胞的杀伤活性在效靶比为20:1时最高,免疫脾细胞的增殖活性以及IL-2和IFN-γ的分泌水平均比对照组明显增高。结论S2S/Fc融合基因在小鼠能诱导很强的特异性体液和细胞免疫应答。
- 陈红梅白雪帆任广立
- 关键词：基因疫苗抗-HBS小鼠
- 汉滩病毒S基因-重组痘苗病毒的制备和表达鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 :制备和鉴定汉滩病毒 (HTNV)S基因 重组痘苗病毒 ,为进一步建立肾综合征出血热 (HFRS)患者HTNV核衣壳蛋白特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的靶细胞奠定基础。 方法 :用野生型痘苗病毒和HTNVS基因 重组痘苗病毒分别感染Vero细胞 ,进行病毒扩增和滴度测定。用PCR和斑点杂交鉴定重组痘苗病毒基因组中的HTNVS基因 ,用间接免疫荧光和westernblot检测核衣壳蛋白的表达。 结果 :制备了含HTNVS基因的重组痘苗病毒 ,滴度为 4 .0 2× 10 7。该重组痘苗病毒基因组中存在HTNVS基因 ,它在Vero细胞中能有效地表达核衣壳蛋白。 结论 :制备了较高滴度、能有效表达HTNV核衣壳蛋白的重组痘苗病毒。
- 王平忠白雪帆张颖陈红梅
- 关键词：汉滩病毒S基因核衣壳蛋白重组痘苗病毒肾综合征出血热
- 巨细胞病毒感染致成人急性肝炎一例被引量：1
- 2006年
- 陈红梅张文谨罗生强高峰张海燕蔡少平
- 关键词：巨细胞病毒感染急性肝炎ALT/AST抗-HBS阳性成人嗜肝病毒
- 肾综合征出血热患者血清汉坦病毒基因的PCR-ELISA方法建立被引量：2
- 2002年
- 目的 建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清标本中HV基因的PCR ELISA方法。方法 设计并合成互补于HVS基因片段的标记引物 ,对 10 8例HFRS患者血清进行巢式RT PCR扩增 ,并用酶免方法分析扩增产物。结果 10 8例患者不同病日采集的血清标本的巢式RT PCR平均检出率仅为 6 2 0 % ,而PCR ELISA平均检出率为 81 5 %。结论 PCR
- 韦三华白雪帆潘蕾李光玉陈红梅
- 关键词：肾综合征出血热多聚酶链反应汉坦病毒PCR-ELISA免疫诊断
- 第60～80位氨基酸多肽片段缺失的HCV核蛋白在真核细胞中的表达被引量：4
- 2005年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)第6080位氨基酸多肽缺失核蛋白的真核表达载体,并在真核细胞中表达.方法:用RTPCR方法从西安地区丙型肝炎患者血清中扩增HCVC区及部分E1区基因并进行克隆、测序,以此为模板用重叠延伸拼接方法扩增第6080位氨基酸多肽基因缺失的核蛋白基因片段(C510),将其定向克隆入哺乳动物高效表达载体pCIneo中,通过Lipofectamine2000转染入p815细胞,经间接免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜和WesternBlotting方法检测细胞中目的蛋白的表达.结果:从患者血清中成功克隆出HCVC区基因,序列及系统发生树分析结果显示为1b型;测序结果显示构建的第6080位氨基酸多肽缺失核蛋白基因的重组真核表达质粒pCI510基因序列准确;免疫荧光和免疫印迹方法均证实目的蛋白p170可在p815细胞中表达.结论:重组体pCI510构建正确,其目的基因在p815细胞中可有效表达,为进一步的研究奠定了基础.
- 洪沙黄长形杨为松陈红梅李光玉王平忠陈伟红张岩李羽白雪帆
- 关键词：肝炎病毒病毒核心蛋白质类
- 基因佐剂注射时相对HBV preS_2S疫苗免疫作用的影响
- 2006年
- 目的:HBV preS2S基因疫苗接种不同时相应用佐剂pcDNA3·1IL-2/Fc,观察其对诱导免疫反应效果的影响。方法:采用HBV preS2S DNA基因疫苗作为基础免疫,重组质粒pcDNA3·1IL-2/Fc作为佐剂加强免疫,设计实验组与HBVpreS2S基因疫苗同时及在注射BALB/c小鼠后第3天加用佐剂,采用0、2、4周的方案接种,检测各次接种后抗体水平、免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性和细胞因子分泌水平。结果:HBV preS2S注射3天后应用佐剂的免疫小鼠,其抗体滴度、免疫脾细胞杀伤活性、增殖活性和Th1型细胞因子分泌水平均比同时免疫组、单独应用HBV preS2S组及空载体对照组明显增强。结论:预先接种疫苗后加用IL-2/Fc佐剂,能明显增强疫苗免疫效应。
- 陈红梅白雪帆黄长形李光玉
- 关键词：HBVDNA疫苗IL-2基因佐剂
- RT-nestedPCR和限制性酶切分析用于HV的检测和基因分型被引量：2
- 2001年
- 为建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中汉坦病毒 (HV)基因的RT nestedPCR方法 ,并进一步进行限制性酶切分型 ,设计并合成互补于HVS基因片段的引物 ,对 78例HFRS患者血清进行RT nestedPCR检测 ,并对PCR产物进行酶切分析。结果显示 ,阳性率分别为 76 % (≤ 7天 )、6 7% (8～ 14天 )、43% (15～2 1天 )和 2 9% (>2 1天 )。 48例检测阳性患者PCR产物酶切分型 ,47例为Ⅰ型 ,1例为Ⅱ型。提示RT nestedPCR用于早期HFRS患者的HV基因检测 ,具有直接、敏感、特异等优点 。
- 韦三华白雪帆陈红梅潘蕾李光玉
- 关键词：肾综合征性出血热聚合酶链反应基因分型
- 输血传播病毒TTV致病性的探讨被引量：7
- 2002年
- 目的 通过病例对比 ,进一步研究 TTV是否有致病性 ;对 1例西安地区非甲 -非戊型肝炎但血清 TTV阳性患者套式 PCR终产物纯化测序 ,在验证我们 TTV DNA检测正确性的同时初步研究西安地区 TTV流行株部分分子生物学特点 .方法 在 TTV ORF1区参照文献 [1]设计一套套式 PCR引物 ,并建立稳定的套式 PCR检测法 ,对西安地区 119例非甲 -非戊型肝炎患者及 16 2例健康有偿献血员进行 TTV对比检测和统计学处理 ;对 1例患者套式 PCR终产物纯化测序 ,用 DNAsis软件在计算机上与中国 1株做同源性比较阳性 .结果 119例非甲 -非戊型肝炎患者中 37例 TTV DNA阳性 ,阳性率 31.1% ;16 2例健康有偿献血员中 TTV DNA阳性 30例 ,阳性率 18.5 % ;两组有明显的统计学差异 (P<0 .0 5 ,χ2 =5 .2 5 1) .对 1例非甲 -非戊型肝炎患者血清 TTV套式 PCR终产物纯化直接测序 ,测得 143bp序列 ,经计算机比较 ,其与中国 1株同源性为 6 5 .0 % ,差异率为 35 .0 % (>30 .0 % ) .其中6 2 bp序列同源性高达 75 .8% .结论 TTV可能有致病性 ;西安地区可能存在新的
- 傅恩清白雪帆王平忠潘蕾李光玉陈红梅杨为松周永兴
- 关键词：输血病毒传播输血传播病毒聚合酶链反应
