李光玉
- 作品数：145 被引量：349H指数：10
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金陕西省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测汉坦病毒（HTV）
- 1996年
- 目的探讨ＲＴ－ＲＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检测汉坦病毒ＲＮＡ及抗原的敏感性。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ、双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ三种方法检侧汉坦病毒Ａ９株细胞培养物中病毒ＲＮＡ和抗原。结果ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后１天即可检出病毒ＲＮＡ；其次为ＥＬＩＳＡ，种毒后２天可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２小时。ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，该毒株与汉坦病毒７６－１１８株Ｍ片断的同源性为８１．８％，从而验证了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性。结论ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性高于双ＭｃＡｂ夹心法ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡ。
- 孙永涛白雪帆黄长形杨为松张斌李光玉张文彬
- 关键词：汉坦病毒聚合酶链反应RNART-PCR
- 肾综合征出血热患者血清汉坦病毒基因的PCR-ELISA方法建立被引量：2
- 2002年
- 目的 建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清标本中HV基因的PCR ELISA方法。方法 设计并合成互补于HVS基因片段的标记引物 ,对 10 8例HFRS患者血清进行巢式RT PCR扩增 ,并用酶免方法分析扩增产物。结果 10 8例患者不同病日采集的血清标本的巢式RT PCR平均检出率仅为 6 2 0 % ,而PCR ELISA平均检出率为 81 5 %。结论 PCR
- 韦三华白雪帆潘蕾李光玉陈红梅
- 关键词：肾综合征出血热多聚酶链反应汉坦病毒PCR-ELISA免疫诊断
- 汉滩病毒S片段基因cDNA 3′端非编码区对核蛋白在大肠杆菌中表达的影响被引量：2
- 1997年
- 为了探讨汉滩病毒Ｓ片段ｃＤＮＡ３′端非编码区基因对核蛋白表达的影响，先后构建了两个核蛋白的表达质粒（ｐＢＶＳ２２和ｐＢＶＳＸ），其中ｐＢＶＳ２２不含非编码区基因，ｐＢＶＳＸ含有３′端非编码区基因。比较两者在大肠杆菌中表达核蛋白的水平后发现３′端非编码区对核蛋白的表达有明显的负调控作用，表达量下降近５０％。可能的原因是非编码区中含有非常丰富的ＡＴ碱基。该研究结果为进一步提高汉滩病毒核蛋白的表达量积累了经验，也为高效表达其它病毒结构蛋白提供了有益的资料。
- 黄长形杨为松杭长寿白雪帆李光玉李新红孙永涛孙永涛
- 关键词：汉滩病毒
- 胎儿骨髓间充质干细胞的培养及其向肝细胞样细胞的诱导分化
- 目的建立稳定的胎儿间充质干细胞(FMSCs)体外培养扩增体系,探索其在体外诱导为肝细胞样细胞的分化潜能。方法通过密度梯度离心、贴壁筛选法分离培养人FMSCs,应用流式细胞术检测其特异表面标志物的表达。加HGF、FGF-4...
- 贾战生魏欣王春雨刘秋平李光玉李羽白雪帆
- 文献传递
- 输血传播病毒TTV致病性的探讨被引量：7
- 2002年
- 目的 通过病例对比 ,进一步研究 TTV是否有致病性 ;对 1例西安地区非甲 -非戊型肝炎但血清 TTV阳性患者套式 PCR终产物纯化测序 ,在验证我们 TTV DNA检测正确性的同时初步研究西安地区 TTV流行株部分分子生物学特点 .方法 在 TTV ORF1区参照文献 [1]设计一套套式 PCR引物 ,并建立稳定的套式 PCR检测法 ,对西安地区 119例非甲 -非戊型肝炎患者及 16 2例健康有偿献血员进行 TTV对比检测和统计学处理 ;对 1例患者套式 PCR终产物纯化测序 ,用 DNAsis软件在计算机上与中国 1株做同源性比较阳性 .结果 119例非甲 -非戊型肝炎患者中 37例 TTV DNA阳性 ,阳性率 31.1% ;16 2例健康有偿献血员中 TTV DNA阳性 30例 ,阳性率 18.5 % ;两组有明显的统计学差异 (P<0 .0 5 ,χ2 =5 .2 5 1) .对 1例非甲 -非戊型肝炎患者血清 TTV套式 PCR终产物纯化直接测序 ,测得 143bp序列 ,经计算机比较 ,其与中国 1株同源性为 6 5 .0 % ,差异率为 35 .0 % (>30 .0 % ) .其中6 2 bp序列同源性高达 75 .8% .结论 TTV可能有致病性 ;西安地区可能存在新的
- 傅恩清白雪帆王平忠潘蕾李光玉陈红梅杨为松周永兴
- 关键词：输血病毒传播输血传播病毒聚合酶链反应
- B型超声对门脉高压症的诊断价值被引量：26
- 1999年
- 目的应用Ｂ型超声（简称Ｂ超）测量肝脏回声、脾脏大小、门静脉主干直径（ＭＰＶＤ）及脾静脉直径（ＳＶＤ）等多项指标，以探讨更准确的诊断门脉高压症的方法．方法以电子内镜直接观察有无食管静脉曲张作为金指标，将患者分为门脉高压症组（Ａ组）１０４例，男８７例，女１７例，年龄１６岁～６６岁；对照组（Ｂ组）９１例，男８１例，女１０例，年龄１６岁～６５岁．再以Ｂ超测得的ＭＰＶＤ，ＳＶＤ，脾脏厚度及肝脏回声对两组进行分析、比较．结果诊断门脉高压症的可疑指标为：ＭＰＶＤ１３ｃｍ～１４ｃｍ，门脉高压症的阳性率为５４７％；脾脏厚度４６ｃｍ～５５ｃｍ，阳性率７１６％．诊断的有力指标为：ＭＰＶＤ≥１４ｃｍ，门脉高压症的阳性率９５４％；ＳＶＤ≥０９ｃｍ，阳性率９５６％；脾脏厚度≥５５ｃｍ，阳性率９５３％；肝脏回声２，３级，阳性率９６８％．诊断的确定指标：ＳＶＤ≥０９ｃｍ＋肝脏回声２，３级；ＭＰＶＤ≥１３ｃｍ＋肝脏回声２，３级；ＭＰＶＤ＋ＳＶＤ＋肝脏回声＋脾脏厚度≥４６ｃｍ；其阳性率均为１００％．结论ＳＶＤ及肝脏回声是Ｂ超诊断本病最重要的指标，４项综合分析比单项门静脉测量符合率更高．
- 李梅春周永兴郝春秋雷香娥李光玉
- 关键词：门静脉高压食管静脉曲张超声波诊断
- 人中性粒细胞多肽1真核表达载体的构建与表达
- 2004年
- 目的 构建人中性粒细胞多肽 1(HNP1)基因真核表达载体 ,为探讨HNP1基因工程生产的可能性奠定基础。方法 从健康人中性粒细胞中提取总RNA ,用RT PCR方法扩增出HNP1基因cDNA片段 ,将纯化PCR产物与pMD18 T载体连接 ,经酶切鉴定及测序确证 ,将其亚克隆入真核表达载体pcDNA3 1/V5 His TOPO中 .用脂质体转染COS 7细胞 ,用BA ELISA法检测转染细胞上清中HNP1的表达。结果 从人中性粒细胞中克隆出人HNP1基因 ,经测序分析与GenBank公布的人HNP1核苷酸序列完全一致 ,并在COS 7细胞中获高效瞬时表达。结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3 1/V5 His TOPO/HNP1,为后续哺乳动物工程细胞株的建立奠定了实验基础。
- 刘娟孙永涛李光玉刘秋平翟嵩王福祥
- 关键词：人中中性粒细胞真核表达载体多肽PCDNA3T载体PCR产物
- 小鼠对HBV DNA疫苗的免疫应答及细胞因子的免疫佐剂效应被引量：10
- 2001年
- 目的 :观察编码小鼠 IL- 2及 IL- 12的真核表达载体 ,对 HBV DNA疫苗诱导 Balb/ c小鼠 (H- 2 d )免疫应答的调节作用及其对稳定表达 HBs Ag的小鼠肥大细胞瘤 P815细胞 (P 815 - HBV- S)成瘤性的影响。 方法 :肌内注射HBV DNA疫苗及细胞因子真核表达载体 ;背部皮下接种 P 815 - HBV - S细胞 ,观察成瘤情况 ;EL ISA法测定血清抗HBs;4h5 1 Cr释放法检测小鼠脾细胞 CTL 活性。 结果 :免疫 8周后 ,以 p CR3.1- S、p CR3.1- S+IL- 2及 p CR3.1-S+IL- 12免疫的小鼠血清 ,45 0 nm A值分别为 0 .87± 0 .1、1.98± 0 .17及 1.6 7± 0 .15 ,均较 p CR3.1组显著提高(P<0 .0 5 )。CTL 细胞杀伤活性分别为 (5 0 .5± 6 .4) %、(6 1.9± 7.1) %及 (73.3± 8.8) % ,后两组与 p CR3.1- S组比较差异均显著 (P<0 .0 5 )。脾细胞悬液经抗 CD4+ 单克隆抗体处理后 ,CTL细胞杀伤活性分别为 (48.3± 5 .9) %、(5 6 .2± 7.5 ) %和 (75 .6± 9.1) % ,抗 CD8+ 单克隆抗体处理后分别为 (10 .6± 1.4) %、(13.6± 1.9) %和 (16 .9±2 .3) %。对照组成瘤率为 10 0 % ,p CR3.1- S组小鼠成瘤率为 12 .5 % ,p CR3.1- S+IL- 12真核表达载体组成瘤率为0 ,对照组平均存活期和 6周后存活率分别为 2 8.4天和 0天。后两组分别 >38.2天及 45?
- 杜德伟周永兴白宪光冯志华李光玉姚志强
- 关键词：DNA疫苗乙型肝炎表面抗原细胞因子小鼠真核表达载体
- 汉滩病毒核蛋白羧基端多肽真核表达载体的构建及其表达产物的鉴定
- 2002年
- 目的 探讨汉滩病毒 (HTNV)核蛋白羧基端多肽的抗原性 ,为建立分型检测方法奠定基础 .方法 设计并合成 S基因编码区及其 3 端 82 5 bp片段引物 ,用 PCR方法从PBV2 2 0 - S2 2原核质粒中扩增出目的片段 ,应用 TA克隆将其插入 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO载体中 ,并通过脂质体转染至 Vero细胞中进行瞬时表达 ,表达产物用间接免疫荧光法进行鉴定 .结果 成功构建了 pc DNA3.1- S及 pc DNA3.1- S- C真核表达载体 ,间接免疫荧光法可检测到真核表达质粒转染的 Vero细胞表达的核蛋白羧基端多肽 .结论 pc DNA3.1- S及 pc DNA3.1- S- C真核表达载体有较高的转染效率 ,能在宿主细胞中表达 。
- 李光玉白雪帆黄长形潘蕾赵玉玲陈红梅韦三华杨为松
- 关键词：汉滩病毒核衣壳蛋白多肽抗原真核表达
- 汉坦病毒R36株的基因分型研究
- 1996年
- 采用汉坦病毒Ｍ片段特异性核苷酸分型引物，对Ｒ３６等７株汉坦病毒进行反转录和聚合酶链式反应扩增鉴定，结果Ｒ３６株仅能被Ⅰ型分型引物扩增出特异性片段，而不能被Ⅱ型引物扩增；ＰＣＲ产物的序列分析结果表明，Ｒ３６与ＨＴＮ型病毒７６－１１８株的同源性为７８．４％，与ＳＥＯ型病毒Ｒ２２株的同源性为６８．１％。文中对Ｒ３６与汉坦病毒其它毒株的核苷酸同源性进行了配对比较。该项研究为从核苷酸水平对Ｒ３６株的分型，提供了科学依据。
- 孙永涛白雪帆黄长形李光玉张文彬周永兴杨为松
- 关键词：汉坦病毒基因分型
