陈浩
- 作品数:56 被引量:129H指数:8
- 供职机构:山东农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家水禽产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 致急性纤维肉瘤的缺陷型J亚群禽白血病病毒肿瘤基因的鉴定
- 根据致瘤机制的不同,禽白血病/肉瘤病毒群各成员病毒被划分慢性转化型病毒和急性转化型病毒两类。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因(c-onc)而引发肿瘤,潜伏期较长,一般超过90天;而急性转化型病毒则是通过...
- 陈浩
- 关键词:肿瘤基因生物学活性致病原因
- H9N2亚型禽流感病毒对樱桃谷肉鸭的致病性研究
- 引言H9N2禽流感病毒(AIV)自1994年在我国大陆首次在鸡体内分离得到后,在我国呈广泛流行,对我国的养殖业造成严重的影响和经济损失。水禽特别是鸭是AIV的巨大贮存库和传染源,对AI的爆发和传播起非常重要的作用。目前在...
- 王蛟孙晓艳陈浩郝东敏鲁爱玲刁有祥
- 鸭源新型鹅细小病毒感染樱桃谷肉鸭后病毒的体内分布情况及排毒规律
- 2015年3月以来,我国山东、安徽、江苏等地肉鸭群出现了一种以鸭喙发育不良,舌头外伸为主要特征的疾病,该病被暂时根据症状命名为,鸭短喙长舌综合征,并被证明为新型鹅细小病毒感染.该病主要引起雏鸭发育迟缓,上下喙萎缩变短,舌...
- 牛晓宇杨晶于相龙窦砚国陈浩刁有祥
- 关键词:樱桃谷肉鸭鹅细小病毒病毒感染排毒规律
- 鸭瘟病毒单抗的制备及胶体金试纸条检测方法的建立被引量:6
- 2016年
- 【目的】鸭瘟(DP)是由鸭瘟病毒(DPV)引起的一种急性、败血性传染病,以头颈肿胀、食道黏膜和泄殖腔黏膜出血、黄白色溃疡,头颈部皮下有黄白色胶冻样渗出为特征。该病一旦发生,发病急、死亡快、死亡率高,对养鸭业危害严重。快速诊断是控制鸭瘟的重要措施之一,可以及时确定病原,以便采取有效的防制手段。试验旨在建立鸭瘟病毒(DPV)胶体金快速检测方法。【方法】利用生物学软件Protean分析,选择鸭瘟病毒抗原表位较多的一段序列设计引物,PCR扩增目的基因。连接到载体pMD-18T上,测序正确后再连接到原核表达载体pET-28a上。将获得的重组质粒转化至Rosetta感受态细胞中进行诱导表达。表达的蛋白经纯化后测其浓度并经Western blotting鉴定分析。以表达的DPV-gB蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选及亚克隆,获得DPV-gB特异性单克隆抗体。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以制备的H6F6单抗作为标记抗体(标记的最适pH为8.0—8.5,最佳标记浓度为15倍原液稀释),将纯化的A8D7单抗(浓度为2倍原液稀释)和羊抗鼠IgG(浓度为10倍稀释)包被在硝酸纤维素膜(NC)上,分别作为检测线和质控线,经条件优化建立了鸭瘟病毒胶体金试纸条检测方法。【结果】共获得4株能稳定分泌抗DPV-gB蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6。间接ELISA检测腹水效价分别为1:10^3、1:10^3、1:10^5、1:10^3。亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blotting结果显示4株单抗均能与DPV-gB蛋白特异性结合。IFA结果显示制备的4株单抗是针对DPV产生的。建立的胶体金试纸条方法能够特异性地检测鸭瘟病毒,与鸭坦布苏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、呼肠孤病毒、减蛋综合征病毒无反应。阳性尿�
- 赵丹丹杨国平刁有祥陈浩提金凤张璐张英李川川
- 关键词:鸭瘟病毒原核表达单克隆抗体胶体金试纸条
- 一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法
- 本发明涉及生物制品技术领域,具体涉及一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法,所述的卵黄抗体来源于使用鸭细小病毒活疫苗和鸭细小病毒灭活疫苗高强度联合免疫健康蛋鸡的初产蛋,这种卵黄抗体,不仅制备方法易于操作,适合大规模生产...
- 刁有祥陈浩郑肖强窦砚国牛晓宇杨晶于相龙
- 文献传递
- 鸭细小病毒套式PCR检测方法的建立与应用被引量:9
- 2016年
- 鸭细小病毒是新近发生的引起樱桃谷肉鸭短喙、长舌、发育迟缓的1种新型水禽细小病毒,目前尚无可靠的快速诊断方法。本研究根据鸭细小病毒的VP3基因设计了2对特异性引物,建立了套式PCR检测方法。该方法对鸭细小病毒DNA的最低检出量为100copies,不能扩增鹅细小病毒、番鸭细小病毒、鸭肠炎病毒等。采用该方法对采自山东、江苏、安徽等地的30份疑似鸭细小病毒感染病料进行检测,结果显示阳性率为27/30(90%),与病毒分离结果符合率为90%;而普通PCR的阳性检出率为8/30(26.7%)。上述结果表明,建立的套式PCR方法具有较高的敏感性和特异性,可用于鸭细小病毒的临床诊断和分子流行病学调查。
- 窦砚国陈浩郑肖强于相龙杨晶牛晓宇刁有祥
- 关键词:套式PCR樱桃谷肉鸭
- 鸭细小病毒地高辛标记探针的制备与应用被引量:3
- 2016年
- 根据GenBank发表的1株鸭细小病毒全基因组序列设计1对特异性引物,利用PCR扩增得到大小为301bp的片段,回收纯化后用地高辛进行标记,制备鸭细小病毒地高辛标记探针。特异性试验表明,该探针仅与鸭细小病毒发生特异性杂交反应,与GPV、MDPV、DcuV、DEV、DHAV-I、H9N2亚型AIV、N-DRV、NDV、TMUV杂交反应均为阴性。敏感性试验表明,该探针对鸭细小病毒核酸的最低检测量为25pg。应用制备的探针对山东、江苏和安徽等地采集的61份患病鸭和30份健康鸭组织进行检测,阳性率分别为97%和0%,与病毒分离结果符合率为98%。上述结果显示,本研究制备的探针特异性强、敏感性高,为该病的诊断和流行病学调查提供可靠的方法。
- 郑肖强陈浩窦砚国杨晶牛晓宇于相龙刁有祥
- 关键词:地高辛探针
- 从种蛋中分离的新城疫病毒抗原性及其F和HN基因的分析
- 鸡新城疫(Newcastle Disease,ND)是由属禽副粘病毒I型的新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一种急性,烈性禽类传染性疾病。未经免疫的鸡群,传播性极强,发病和死亡率都...
- 陈浩
- 关键词:新城疫病毒抗原性遗传进化树病理分析
- 文献传递
- 坦布苏病毒在种鸭中的垂直传播被引量:9
- 2016年
- 为探究坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)能否垂直传播,57只38周龄的健康樱桃谷种鸭分为A、B、C 3组,每组15只母鸭、4只公鸭。A组母鸭、B组公鸭静脉接种坦布苏病毒TMUV-SDSG株2.5 mL/只(ELD50=10-2.37/0.2mL);C组接种等量生理盐水。各组隔离饲养,收集种蛋进行孵化。无菌采集孵化不同阶段的死亡鸭胚的胚脑、尿囊液或卵黄膜以及新生雏鸭和死亡弱雏的脑组织,进行病毒分离和半套式RT-PCR检测。结果显示,在种蛋的卵黄膜,死亡鸭胚的尿囊液、卵黄膜和胚脑,新生雏鸭和死亡弱雏的脑组织中均能检测并分离到TMUV。其中,A组种蛋、死亡鸭胚、1日龄雏鸭、15日龄雏鸭和死亡雏鸭中TMUV阳性率分别为60%,67.44%,35.48%,16.67%和100%。B组种蛋、死亡鸭胚、1日龄雏鸭、15日龄雏鸭和死亡雏鸭中TMUV阳性率分别为50%,51.35%,46.88%,10%和71.43%。C组各样品中均未检测到TMUV。结果表明,TMUV可在种鸭中经种蛋垂直传播。
- 张英赵丹丹刁有祥陈浩提金凤张璐杨国平
- 关键词:种鸭
- 一种鸭细小病毒毒株及其活疫苗
- 本发明涉及动物病毒学领域,提供了一种鸭细小病毒毒株及其活疫苗和制备方法,该毒株为鸭细小病毒,具体命名为GT2015v株,其生物保藏编号为CCTCC?No:V201528;利用该毒株制备的疫苗有效解决了我国当前该病无法预防...
- 刁有祥陈浩于相龙窦砚国郑肖强牛晓宇杨晶
- 文献传递