郭建刚
- 作品数:10 被引量:58H指数:4
- 供职机构:广西动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 羊痘病毒和羊口疮病毒二重PCR鉴别检测方法的建立被引量:10
- 2007年
- 针对羊痘病毒(capripoxvirus,CaPV)的A29L基因和羊口疮病毒(orf virus,ORFV)的H3L基因,设计、合成了2对特异性引物以进行二重PCR。结果表明,该方法可以在数小时、在同一反应体系中清晰地区分CaPV和ORFV,其PCR产物大小分别为413 bp和708 bp,与预期的片段大小相符,序列分析证实目的基因序列与已发表的序列一致;该检测方法的灵敏度可达1个病毒蚀斑形成单位(PFU)。采用二重PCR对12株CaPV、ORFV和相关病毒、细菌培养物,以及22份田间样品进行检测,与预期结果完全一致,且与相关病毒或健康羊组织样品无交叉反应。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,可作为临床样品中CaPV和ORFV的鉴定和诊断的有效方法。
- 郑敏金宁一刘棋郭建刚熊毅朱伟陈义祥邹联斌
- 关键词:二重PCR羊痘病毒羊口疮病毒
- 广西部分地区猪群主要疫病免疫抗体监测和免疫效果分析被引量:14
- 2010年
- 从广西5个地市33家养殖场随机采集免疫过猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)疫苗的血清样品393份,使用免疫胶体金方法对样品的抗体水平进行检测。结果显示,不同养殖规模的猪场抗体阳性率总体较高的是猪瘟,达75.06%;其次是猪伪狂犬病,为71.25%;而猪繁殖与呼吸综合征抗体最低,仅为42.24%。各种病原抗体在不同规模的猪场有较大的差别,规模猪场的猪群某些疫病的抗体未必比散养猪群高。通过对不同类型的疫苗所产生的抗体水平进行比较,结果发现,使用猪繁殖与呼吸综合征灭活苗和弱毒苗、猪瘟脾淋苗和细胞苗、猪伪狂犬病国产苗和进口苗免疫所产生的抗体水平没有明显差异。
- 韦显凯邹联斌屈素洁梁媛赵国明何贻坚莫胜兰郑列丰郭建刚
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征猪伪狂犬病抗体监测
- 中国“人-猪-禽”基因重排H1N2亚型猪流感病毒全基因克隆及遗传进化的研究被引量:16
- 2008年
- 【目的】为了研究2006年从广西病猪肺组织中分离的H1N2亚型猪流感病毒(SIV)A/Swine/Guangxi/13/2006(H1N2)(Sw/GX/13/06)的遗传学特性和8个基因的来源。【方法】运用RT-PCR方法对其全基因进行了克隆并运用分子生物学软件对其基因序列进行了遗传进化分析。【结果】血凝素(HA)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因来源于猪古典H1N1亚型流感病毒;神经氨酸酶(NA)和聚合酶蛋白(PB1)基因来源于人的H3N2亚型流感病毒;聚合酶蛋白(PA)和聚合酶蛋白(PB2)基因来自于禽流感病毒。【结论】可见Sw/GX/13/06是一株"人-猪-禽"三源基因重排H1N2亚型SIV,且与美国(1999?2001年)和韩国(2002年)分离到该型病毒的有明显的亲缘关系。据我们所知,这是中国首次报道含有禽流感病毒基因片段的重排H1N2SIV,该病毒是否对养猪业和人类公共卫生健康具有潜在的威胁,有待于进一步研究。
- 陈义祥蒙雪琼刘棋黄夏黄胜斌刘翠权施开创郭建刚陈芳芳胡丽萍
- 关键词:猪流感病毒基因重排遗传进化
- 2型猪链球菌SspA基因序列及其免疫原性分析被引量:4
- 2015年
- 【目的】明确2型猪链球菌的枯草杆菌素样丝氨酸蛋白酶(Ssp A)基因序列特征及其原核表达重组蛋白的免疫原性,为2型猪链球菌病的诊断及疫苗研究奠定基础。【方法】针对Ssp A基因上、下游序列分别设计1对引物,从112株2型猪链球菌临床分离株中扩增其相应片段,并进行测序分析;同时以Ssp A基因的重组质粒p ET28a-Ssp N、p ET28a-Ssp M和p ET28a-Ssp C分别转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达,再以SDS-PAGE检测融合蛋白表达情况,Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】Ssp A基因上游片段较保守,而下游片段变异区间较大。在IPTG诱导下,含有重组质粒p ET28a-Ssp N、p ET28a-Ssp M和p ET28a-Ssp C的菌株表达出3段融合蛋白,其中,Ssp N和Ssp C重组蛋白存在于破碎菌体的上清液中,而Ssp M重组蛋白以包涵体形式存在于沉淀中,其大小为:Ssp N重组蛋白66 k D,Ssp M重组蛋白65 k D,Ssp C重组蛋白32 k D。Western blotting鉴定结果显示,3段重组蛋白均能与2型猪链球菌感染血清发生反应,且以Ssp N重组蛋白反应最强烈,而与以全菌灭活苗制备的猪血清未发生特异性反应。【结论】2型猪链球菌Ssp A基因上游片段较保守,经大肠杆菌重组表达的Ssp N蛋白免疫原性较强,且具备鉴别2型猪链球菌感染与免疫的潜力,可作为研究猪链球菌病血清学诊断的候选抗原片段。
- 胡巧云袁小宁熊毅何奇松黄胜斌孙翔翔吴军颜健华冯淑萍李军郭建刚
- 关键词:2型猪链球菌免疫原性
- 2012—2013年广西部分规模猪场猪瘟群体免疫合格率与抗体离散度监测及免疫效果分析被引量:5
- 2014年
- 为了解近两年来广西部分规模猪场的猪瘟免疫抗体水平,采用阻断ELISA的方法对广西20个不同规模的猪场共计3 010份血清进行了猪瘟抗体检测,猪瘟抗体阳性2 577份,免疫合格率为85.61%,抗体离散度为34.87%。存栏数超过万头的大型规模猪场猪瘟群体合格率为92.36%(2 164/2 343),抗体离散度为27.80%;中小型规模猪场的猪瘟群体合格率为61.92%(413/667),抗体离散度为54.11%。表明大型规模猪场的猪瘟抗体水平明显好于中小型规模猪场。
- 马琳郭建刚覃芳芸胡巧云黄胜斌胡丽萍杨荣熊毅冯淑萍
- 关键词:规模猪场猪瘟抗体
- 广西不同年龄猪群中2型猪链球菌抗体水平调查分析
- 2015年
- 为调查规模化猪场不同年龄猪群中2型猪链球菌(S.suis 2)抗体水平,本研究采用以荚膜多糖为抗原的间接ELISA对来自广西地区母猪群、肥猪群、生长猪群共1 908份血清样品进行了S.suis 2抗体检测和分析。结果显示:成年猪群中抗S.suis 2的抗体水平普遍较高,种猪场母猪血清抗体阳性率可高达95%以上,不同地区屠宰场的育肥猪血清抗体阳性率在39.2%-97.5%。对不同日龄仔猪群抗体水平检测分析显示:14日龄-42日龄期间,抗体水平随仔猪日龄的增长而呈逐渐下降的趋势;而42日龄-130日龄期间,抗体水平随日龄的增长而呈逐渐上升的趋势。此外,经产母猪群抗体水平略高于后备母猪群,并且随胎次的增加,抗体的离散度缩小。以上结果表明S.suis 2抗体在仔猪生长阶段的空白期即42日龄时,仔猪群抗体水平最低。因此,在这个阶段和之前做好S.suis的预防和免疫工作对猪群链球菌病的防控至关重要。
- 胡巧云袁小宁熊毅喻正军何奇松黄胜斌颜健华李军郭建刚
- 关键词:2型猪链球菌抗体监测免疫程序
- 广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征调查分析被引量:3
- 2019年
- 【目的】了解广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的感染情况,为广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的监督及防控工作提供参考。【方法】通过对Nsp2基因的分析,合成新的特异性诊断引物,并利用RT-PCR的方法对广西贵港地区111个规模猪场采集的1865份扁桃体同时进行高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征和经典猪繁殖与呼吸障碍综合征的分子流行病学调查。【结果】25个猪场检出92份猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点总阳性率为22. 5%,样品总阳性率为4. 93%。其中9个猪场检测出24份高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点阳性率为8. 10%,样品阳性率为1. 29%; 18个猪场检测出68份经典猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点阳性率为16. 2%,样品阳性率为3. 65%; 2个猪场同时检测出高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和经典猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒。【结论】广西贵港地区规模猪场感染猪繁殖与呼吸障碍综合征的现象较为严重。
- 张书祥何奇松孔子荣郭建刚周庆安黄胜斌韩银华熊毅
- 关键词:猪繁殖与呼吸障碍综合征扁桃体NSP2
- 2011—2013年广西地区猪瘟抗体监测及免疫效果分析被引量:4
- 2014年
- 为了解广西地区猪瘟的免疫抗体水平,采用正向间接血凝试验对采集自2011-2013年广西14个地市不同规模猪场的20271份血清样品进行了猪瘟抗体检测。结果表明,广西各地的猪瘟抗体水平存在一定差异,抗体合格率为64.4%~97.5%,平均合格率为84.9%,大型规模场和中小规模场的猪瘟抗体合格率较稳定,且保持在较高水平,分别为96.0%和87.5%;农村散养户和屠宰场/市场的抗体合格率相对较低,分别为82.7%和70.5%。
- 马琳郭建刚覃芳芸胡巧云黄胜斌胡丽萍杨荣熊毅冯淑萍
- 关键词:猪瘟抗体监测免疫效果
- 广西动物疫病监测工作的现状与应对措施被引量:1
- 2014年
- 动物疫病监测工作是动物防疫工作的重要组成部分,是评价动物防疫水平和做好动物疫病预警预报的基础。近年来,随着国内外动物疫病对畜牧业生产、公众卫生安全的危害程度不断加大,动物疫病防控作用越来越突出,加强动物疫病监测是落实国家“以防为主”方针的先决条件,也是保障畜牧业健康发展,维护社会公共卫生安全的迫切需要。虽然我区每年都根据国家的安排,制订了监测计划,开展了大量监测工作,并取得了一定成效,
- 覃芳芸杨荣胡丽萍马琳郭建刚
- 关键词:动物疫病监测监测工作动物防疫工作公共卫生安全畜牧业生产预警预报
- 广西兽医系统实验室考核常见问题和建议被引量:2
- 2014年
- 兽医系统实验室考核是农业部为了加强兽医系统实验室管理,提高兽医实验室技术水平和工作能力而开展的行业内考核评审工作,并先后出台了《兽医系统实验室考核管理办法》和《兽医系统实验室考核工作实施方案》。广西根据农业部的《考核管理办法》和《考核工作实施方案》制订了《广西兽医系统实验室考核工作实施方案》,并根据该实施方案开展了辖区内的兽医系统实验室的考核工作。自2010年开展考核工作以来至2013年底,
- 覃芳芸胡丽萍马琳杨荣郭建刚
- 关键词:实验室管理考核管理农业部