黄胜斌
- 作品数：32 被引量：116H指数：6
- 供职机构：广西动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西科技创新能力与条件建设项目广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪脑心肌炎病毒GXLC株的分离及其3D基因分子特征的分析被引量：7
- 2011年
- 采集临床疑似脑心肌炎死亡仔猪的组织作为接种材料,接种于BHK-21细胞系,观察细胞病变（CPE）,并用RT-PCR和间接荧光抗体试验（IFA）进行鉴定,证实分离到1株脑心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus,EMCV）,命名为GXLC株。应用RT-PCR方法扩增GXLC株的3D基因,扩增产物克隆入pMD18-T载体后进行测序,对获得的3D基因序列进行分析。序列分析结果表明,GXLC株3D基因全长1380 nt,编码460个氨基酸,含有7个抗原表位。同源性分析结果表明,GXLC株与国内外其它EMCV分离株3D基因核苷酸序列的同源性在84.7%~99.7%之间,氨基酸序列的同源性在96.1%~99.6%之间。遗传进化分析结果表明,基于3D基因核苷酸序列绘制的系统进化树可将所有EMCV分离株分成2个群：Ⅰ群和Ⅱ群,Ⅰ群可再细分为Ⅰa亚群和Ⅰb亚群,其中猪源EMCV在Ⅰ群和Ⅱ群中均有分布,而鼠源EMCV分布在Ⅰ群,人源EMCV分布在Ⅱ群;GXLC株与其它中国分离株均属于Ⅰa亚群。
- 陈进喜施开创黄胜斌陆文俊屈素洁郑敏李军
- 关键词：脑心肌炎病毒3D基因分子特征
- A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2016年
- 为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白p ET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白p GEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价。将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7。结果表明:这4株单克隆抗体均为Ig M亚型和κ轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大。4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合。说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体。
- 颜健华兰宗宝何奇松蒋家霞冯淑萍黄胜斌韦达有易春华许瑞胜梁晟熊毅
- 关键词：A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体
- A型口蹄疫病毒VP1蛋白竞争ELISA检测方法的初步建立被引量：3
- 2015年
- 用纯化的融合蛋白p GEX-6p-1-VP1作为包被抗原,4E12单抗为检测抗体与待检血清竞争固相抗原,建立了单抗竞争ELISA方法来检测口蹄疫A型抗体,并进行了反应条件的优化,确定阴阳临界值。结果表明,抗原最适包被浓度为0.625μg/m L,待检血清稀释度为1∶2,单抗最大稀释度为1∶400,酶标抗体工作浓度为1∶5000,封闭液、待检血清和单抗作用时间分别为60、60、45 min;阴阳性判断抑制率(PI)≥30%为阳性。与液相阻断ELISA检测试剂盒比对,符合率为84.8%。试验表明,建立的单抗竞争ELISA检测方法具有特异性强、稳定性好等优点,可用于口蹄疫A型血清抗体的检测,这为口蹄疫A型免疫抗体水平检测、疫情监控及流行病学调查提供了技术平台。
- 颜健华何奇松蒋家霞冯淑萍黄胜斌胡巧云易春华许瑞胜梁晟熊毅
- 关键词：A型口蹄疫病毒VP1蛋白竞争ELISA
- 广西马流感H3N8毒株的HA基因序列测定与分析被引量：3
- 2015年
- 为了了解广西马群流感病毒流行病学状况,试验通过RT-PCR方法,从广西4个市采集的104份马组织样品中检测出1份马流感病毒阳性,经鸡胚接种分离到病毒,并进行了血清学检测、基因扩增和测序比对。结果表明:分离到的病毒为H3N8亚型马流感病毒,HA基因阅读框为1 710 bp,编码569个氨基酸,与哈萨克斯坦2007年分离毒株(Otar07)的核苷酸、氨基酸同源性最高,分别为99.5%和99.6%。但与Otar07株相比,广西分离株HA基因蛋白在第11,12位多了苯丙氨酸(F)和异亮氨酸(I)2个氨基酸,存在变异。绘制的系统进化树显示广西分离株属于美洲谱系中的佛罗里达第2分支。
- 冯淑萍韦建华易春华刘杰标熊毅何奇松黄胜斌颜健华
- 关键词：马流感H3N8HA基因
- 猪脑心肌炎病毒感染对iNOS mRNA转录水平的影响
- 2012年
- 为研究iNOS在猪脑心肌炎病毒(EMCV)致病机制中的作用,本研究将猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠、仔猪,观察临床症状和病理变化,检测心、脑组织中iNOS mRNA转录水平。试验结果表明,小鼠和仔猪感染EMCV后均出现明显的临床症状、剖检及组织病理学变化显示心、脑组织的病理炎症分值显著增加;心、脑组织中的iNOS mRNA转录水平显著上调,并且转录水平上调的峰值与感染小鼠、仔猪出现明显临床症状、严重病理损害及小鼠死亡高峰存在明显的时间相关性,与心、脑组织的病理炎症分值成线性正相关。表明组织中iNOS的过量表达与感染动物的发病和死亡密切相关,iNOS在EMCV致病机制中发挥重要作用。
- 施开创覃芳芸陆文俊屈素洁黄胜斌李军
- 关键词：脑心肌炎病毒INOS致病机制
- 2012—2013年广西部分规模猪场猪瘟群体免疫合格率与抗体离散度监测及免疫效果分析被引量：5
- 2014年
- 为了解近两年来广西部分规模猪场的猪瘟免疫抗体水平,采用阻断ELISA的方法对广西20个不同规模的猪场共计3 010份血清进行了猪瘟抗体检测,猪瘟抗体阳性2 577份,免疫合格率为85.61%,抗体离散度为34.87%。存栏数超过万头的大型规模猪场猪瘟群体合格率为92.36%(2 164/2 343),抗体离散度为27.80%;中小型规模猪场的猪瘟群体合格率为61.92%(413/667),抗体离散度为54.11%。表明大型规模猪场的猪瘟抗体水平明显好于中小型规模猪场。
- 马琳郭建刚覃芳芸胡巧云黄胜斌胡丽萍杨荣熊毅冯淑萍
- 关键词：规模猪场猪瘟抗体
- 广西猪群H1和H3亚型猪流感病毒抗体水平调查被引量：7
- 2008年
- 猪流感（Swine influenza．SI）是由猪流感病毒（Swine influenza virus．SIV）所引起的一种急性呼吸道传染病．一年四季都可发生．但以春秋多发．各种日龄的猪都可感染。单纯的SIV感染表现为发病率高．死亡率低．但常常与其它病原体并发继发感染。临床上主要表现为：咳嗽、流鼻涕、呼吸困难、精神沉郁和发烧，怀孕母猪流产。
- 黄胜斌蒙雪琼陈义祥陈芳芳陆文俊赵国明苏凯屈素杰刘棋
- 关键词：猪流感病毒抗体水平急性呼吸道传染病猪群
- 基因芯片技术在细菌学研究中的应用进展被引量：6
- 2009年
- 基因芯片技术的诞生是基于人类基因组计划的成果,是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的新技术。能够广泛应用于基因表达分析、突变检测、核酸多态性分析、基因测序和药物筛选等几乎所有的生物学研究领域。综述了基因芯片技术的发展历史、原理、检测细菌的程序、在细菌学研究中的应用、存在的问题及其应用前景。
- 付建黄胜斌陈磊何丹胡晓静熊毅刘棋
- 关键词：基因芯片细菌学
- 基因缺失鉴别ELISA试验在种猪场控制与净化猪伪狂犬病的应用被引量：1
- 2007年
- 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒（PRV）引起的一种急性、高度接触性传染病，以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状。该病毒可引起各种家畜及野生动物发病，猪是该病原的传播者和自然宿主，临床表现为母猪流产、死产、产弱仔猪等繁殖障碍症状，新生仔猪发热、出现神经症状、死亡率较高。近年来，随着猪伪狂犬病疫苗特别是基因缺失疫苗的使用，猪伪狂犬病的发病率与死亡率大大减少，但目前该病仍然是威胁广西壮族自治区养猪业发展的重要疫病。2005～2006年我们应用gpI基因缺失鉴别ELISA试验对广西4个种猪场进行了猪伪狂犬病的检测，并清除带毒猪，做了控制与净化猪伪狂犬病的试验，达到了预期的净化效果。现报告如下。
- 覃芳芸黄夏陆文俊胡杰磨龙春黄胜斌赵国明
- 关键词：ELISA试验基因缺失疫苗猪伪狂犬病种猪场
- 猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 根据GenBank中5′端非编码区的靶序列设计了用于TaqMan荧光定量PCR的1对引物及TaqMan探针,以猪瘟活疫苗病毒为模板,在常规PCR的基础上优化了TaqMan荧光定量PCR反应条件,建立了猪瘟病毒(CSFV)TaqMan荧光定量PCR检测方法。其敏感性和特异性试验结果表明,所建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法对CSFV具有很高的特异性,其检测灵敏度可达5.03×10-2μg/μL。说明TaqMan荧光定量PCR适用于CSFV的快速检测。
- 马琳付薇何奇松徐贤坤易春华孙翔翔蒋家霞黄胜斌熊毅
- 关键词：猪瘟病毒TAQMAN探针
