胡俊杰
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肝纤维化的中西医治疗进展
- 李定国虢灿杰胡俊杰
- 靶向bcl-2基因转录shRNA重组质粒的构建和筛选被引量：1
- 2008年
- 目的构建能高效抑制肝星状细胞(HSCs)bcl-2表达的小发夹RNA(shRNA)重组质粒。方法利用RNA干扰技术,设计有小发夹结构的3条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体psiRNA-hH1neo上构建重组质粒,予以酶切和测序鉴定。重组质粒转染HSC-T6细胞株,运用实时荧光定量PCR和Western blotting进行筛选鉴定。结果酶切及测序鉴定表明,成功构建重组质粒shRNA1、shRNA2和shRNA3。实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示,shRNA1和shRNA2转染后显著抑制HSC-T6中bcl-2mRNA和蛋白表达(P<0.05),其中siRNA1的bcl-2表达抑制效率>80%。结论构建的重组质粒shRNA1能有效抑制HSCs中bcl-2的表达。实验为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径奠定了基础。
- 孙桦李光明刘博伟胡俊杰李定国
- 关键词：RNA干扰BCL-2重组质粒肝星状细胞
- 肝纤维化的中西医治疗进展
- Pooper教授曾强调指出:谁能阻止或延缓肝纤维化的发展,谁就能治愈大多数慢性肝病。在多数情况下,如能早期采取抗纤维化治疗,有可能使肝纤维化停止发展或逆转。因此,预防肝纤维化的发生,推迟肝纤维化的进展是当今治疗慢性肝病的...
- 李定国虢灿杰胡俊杰
- 文献传递
- 靶向bcl-2基因的shRNA对肝星状细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究短发夹RNA(shRNA)重组载体介导抑制大鼠肝星状细胞(HSCs)bcl-2基因的表达,观察其对HSCs凋亡的影响。方法重组质粒载体pGPU6-GFP-shRNA由脂质体介导转染HSC-T6细胞株。荧光定量PCR和Western blotting鉴定bcl-2表达;CCK-8法观察质粒转染对HSCs生长和增殖的影响;Hoechst 33258染色观察细胞形态学改变;流式细胞术及caspase-3和caspase-9酶活性检测分析转染后细胞凋亡情况。结果pGPU6-GFP-shRNA能抑制bcl-2 mRNA和蛋白表达;转染后HSC-T6体外生长明显受到抑制;转染后72 h时细胞凋亡率为33.34%,caspase-3和caspase-9酶活性显著增高。结论shRNA重组载体pGPU6-GFP-shRNA能有效地抑制HSC-T6中bcl-2的表达,抑制细胞生长并促进凋亡。实验为进一步探索肝纤维化基因治疗提供了实验依据。
- 孙桦李光明虢灿杰刘博伟胡俊杰李定国
- 关键词：RNA干扰BCL-2凋亡肝星状细胞
- 大鼠诱导多能干细胞向肝系细胞的诱导分化
- 2014年
- 目的本研究探讨利用诱导因子将大鼠诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)快速高效诱导分化为肝细胞样细胞(hepatocyte-like cells,HLCs)。方法利用诱导因子将iPSCs向肝系细胞方向分化,采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测培养20 d时细胞各种肝系细胞标志表达。结果培养分化20 d的iPSCs形成肝细胞样集落,表达肝系细胞特征性标志,并且具有尿素合成和糖原贮备能力。结论利用诱导因子可有效地将大鼠iPSCs诱导分化为HLCs,有望为细胞移植治疗各种肝脏疾病提供种子细胞。
- 孙超胡俊杰陈源文潘勤曹毅范建高
- 关键词：诱导多能干细胞肝细胞样细胞
- 肝纤维化的中西医治疗进展
- @@Pooper教授曾强调指出:谁能阻止或延缓肝纤维化的发展，谁就能治愈大多数慢性肝病。在多数情况下，如能早期采取抗纤维化治疗，有可能使肝纤维化停止发展或逆转。因此，预防肝纤维化的发生，推迟肝纤维化的进展是当今治疗慢性肝...
- 李定国虢灿杰胡俊杰
- 关键词：肝纤维化中医治疗西医治疗
- 文献传递
- 腺病毒介导人uPA感染大鼠间充质干细胞的体外研究
- 2009年
- 目的体外分选与鉴定大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并用腺病毒介导的人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)体外感染原代MSCs,观察病毒的转导效率及对MSCs增殖的影响。方法通过黏附培养分离纯化MSCs,并采用免疫组化DAB显色法鉴定;荧光显微镜检测uPA的转染效率;Western blotting检测uPA在MSCs中的表达;MTT法检测病毒对MSCs增殖的影响。结果分选培养的MSCs呈典型的间充质干细胞生长形态,细胞表面标记物CD29和CD90阳性,CD34和CD45阴性;随着病毒感染滴度增高,绿色荧光蛋白(GFP)的表达率亦呈增高趋势。当感染复数(MOI)=80且病毒转导72 h后,GFP阳性细胞数占细胞总数的比例达(94.0±1.5)%,可稳定表达7 d以上,且对MSCs的增殖无明显影响。结论MSCs是一种理想的基因过表达载体,稳定分泌uPA蛋白,可用于肝纤维化的研究。
- 胡俊杰孙超兰玲李定国
- 关键词：间充质干细胞尿激酶型纤溶酶原激活物肝纤维化
- 结肠镜规范化教学体会及思考被引量：2
- 2021年
- 随着内镜技术的发展,内镜诊断及治疗技术水平的不断提高,消化内镜及技术已经成为消化系疾病诊治的重要手段,也是未来消化疾病的主要发展方向。消化内镜在我国得到了广泛的应用,已经逐渐普及到基层医院,满足了人民群众日益增长的医疗需求。消化内镜是一门技术要求很高的专业应用,消化科医生或内镜医生需要具备良好的操作技术并做出正确的诊断,这需要长期的培训学习,并不断的在实践中提高。胃肠镜是所有内镜操作的基本功,是顺利完成检查,准确发现病灶并明确诊断的前提,且良好的操作习惯不仅减少患者的痛苦,且有利于避免并发症的产生。结肠镜是内镜操作中的一项基本技术,有一定的技术难度及特点,并存在一定的并发症可能。因此规范化的结肠镜培训学习是内镜医师成长的良好助益,结肠镜的学习是一个循序渐进的过程,不仅在于掌握正确的结肠镜插入法,完成操作本身,重要的是不断的学习内镜下病变的特征,更好的做出诊断。我院内镜中心在长期的结肠镜教学中,积累了丰富的经验,现将平时结肠镜教学中的一些体会总结如下。
- 胡俊杰高虹夏幼辰
- 关键词：结肠镜教学临床教学分层教学法PBL教学法教育
- 抗TGF-β受体治疗肝纤维化的作用研究进展被引量：3
- 2007年
- 活化的肝星状细胞(HSC)在肝纤维化的形成发展中起着至关重要的作用。转化生长因子(TGF-β)被认为是HSC活化最有效的刺激因子。拮抗TGF-β的作用已成为抗纤维化治疗策略的重要目标。此文就TGF-β受体的结构和功能以及近几年针对该受体的抗肝纤维化研究进展作一综述。
- 胡俊杰李定国
- 关键词：转化生长因子-ΒTGF-Β受体肝纤维化
- LentiviralHGF的构建及其体外对β_2m^-/Thy-1^+ BDLSCs影响的
- 2009年
- 目的构建携带大鼠HGF基因的慢病毒载体,并观察慢病毒对体外分选的β2m-/Thy-1+BDLSCs转染效果及影响。方法采用RT-PCR法从大鼠肝脏中提取HGF基因,并将其克隆到穿梭质粒TG006,与包装质粒一起在293T细胞中重组产生LentiviralHGF慢病毒。通过免疫磁珠法体外分选出β2m-/Thy-1+BDLSCs;采用荧光显微镜检测LentiviralHGF对BDLSCs的转染效率;采用ELISA法检测大鼠HGF的蛋白分泌水平;采用MTT法和免疫荧光法分别检测病毒对增殖和分化的影响。结果从纤维化大鼠肝脏中成功克隆出HGF基因,并构建LentiviralHGF慢病毒;慢病毒能高效转染BDLSCs。转染慢病毒的BDLSCs向胞外分泌高浓度的HGF。转染LentiviralHGF后,细胞增殖能力提高,ALB表达阳性。结论LentiviralHGF能高效转染BDLSCs,两者结合为肝纤维化的研究奠定了基础。
- 胡俊杰孙超兰玲李定国
- 关键词：慢病毒基因转导
