王裴
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金NSFC-广东联合基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 感染性病毒PMA联合qPCR定量检测被引量：3
- 2016年
- 细胞培养作为定量检测活病毒的金标准,耗时长,通常需要数天到数周,光敏染料叠氮溴化丙锭联合qPCR(PMA-qPCR)作为一种新型定量检测病毒感染性的分析工具,具有快速便捷的优点PMA预处理待测样品,选择性渗入灭活病毒衣壳,结合核酸后抑制其扩增,使得仅活病毒核酸可以进行qPCR本研究就PMA-qPCR检测活病毒的机理、灭活病毒的方法进行分析讨论,并比较不同方案检测病毒感染性的差异性。
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- 关键词：荧光定量PCR
- α变形菌纲磁螺菌属TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立一种快速有效检测环境中q变形菌纲磁螺菌属细菌的方法。方法本研究以α变形菌纲磁螺菌属保守且特异的16SrRNA片段为靶序列，化学合成基因序列，制备重组质粒作为磁螺菌属检测的标准品；用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）技术，针对目的片段基因设计特异性引物和TaqMan荧光探针，进行实时荧光定量PCR检测，运用统计学方法评价该方法的特异性、敏感性及重复性。结果本实验成功构建了质粒PUC19-QC，引物、探针特异性良好，标准曲线在5．10×10^1～5．10×10^7拷贝数之间具有较好的线性关系，相关系数R2=0．999。该法最低可检测到5．10x10个DNA拷贝数，灵敏度明显高于普通PCR；重复性试验表明．荧光定量PCR检测结果Ct值波动范围较小，α值的标准差均小于0．23，表明该法重复性好，可靠性高。析因方差分析表明不同稀释度之间的ct值差异有统计学意义（F=3125．305，P〈0．001），三个批次的再现性良好，差异无统计学意义（F=0．057,P=0．945），而浓度分组与时间之间也无交叉效应（F=0．533，P=0．873）。结论本实验所建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测技术，能够快速有效地检测仅变形菌纲磁螺菌属细菌，且检测结果稳定，受外界条件如时间、气温等影响小。
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- 关键词：趋磁细菌TAQMAN探针16SRRNA基因
- Ⅰ型登革病毒prM抗体的制备及初步鉴定
- 2015年
- 目的以Ⅰ型登革病毒pr M蛋白为靶抗原,制备相应的多克隆和单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法 RTPCR扩增Ⅰ型登革病毒全长pr M基因,转入克隆载体和构建重组表达载体,以原核表达及纯化后的pr M蛋白作为免疫原分别免疫新西兰大白兔和BALB/c小鼠,采集免疫兔血清,制备抗pr M蛋白多克隆抗体;取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养、间接ELISA筛选阳性克隆,获得特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备抗pr M蛋白单克隆抗体,应用亲和层析法纯化抗体,Western-blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体效价。结果获得全长pr M的多克隆抗体及1株能稳定分泌抗pr M蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,抗体的效价高,特异性好。结论制备了Ⅰ型登革病毒pr M多克隆抗体和1株单克隆抗体,为进一步探讨登革病毒pr M抗体依赖的感染增强作用奠定基础。
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- 关键词：登革病毒多克隆抗体单克隆抗体
- FcγRⅡb抑制登革病毒prM抗体引起的抗体依赖增强作用的研究
- 目的: 登革病毒病流行于热带和亚热带地区，最近几十年发病率在全球大幅度上升。占世界人口40％以上的约25亿人面临罹患登革的危险。世卫组织估计，每年世界上可能有5000万至1亿登革病毒感染病例，是分布最广、发病人数最多、...
- 王裴
- 关键词：登革病毒FCΓ受体基因表达
- 登革病毒感染动物模型研究进展被引量：1
- 2013年
- 登革病毒感染可以引起登革热、登革出血热和登革休克综合征,是威胁人类生命的重大公共卫生问题。为解决这一问题,迫切需要构建出适宜的动物模型。登革病毒可以在非人灵长类动物体内相关的细胞内复制并引起免疫反应,但无明显症状。具免疫活性的小鼠感染了登革病毒后一般不会出现症状,颅内接种病毒的小鼠可出现麻痹,使用高剂量病毒感染的新小鼠模型可以发生出血的症状。某些改良的免疫缺陷小鼠感染了登革病毒后可以表现出与人类登革出血热相似的症状。人源化小鼠模型支持登革病毒的复制并且可表现出登革热的部分症状。目前的模型各有优缺点,可分别为登革病毒感染的致病机理、免疫机制以及抗病毒药物和疫苗的临床前研究服务。
- 蔡俊荣王裴周旋赵卫
- 关键词：动物模型登革病毒致病机理免疫机制
