赵卫
- 作品数：201 被引量：568H指数：12
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 高效包装重组慢病毒及其定量方法的建立被引量：1
- 2015年
- 目的高效包装不同启动子的重组慢病毒(LV),建立LV的定量方法。方法采用分子克隆方法获得p FUGW、p TY-EF1α-EGFP及p TY-CMV-EGFP 3种转移质粒,然后采用脂质体法与另两种包装质粒p SPAX2及p MD2.G共同转染293T细胞,制备含有不同启动子的LV。设计针对3’-LTR的探针和引物,建立LV的荧光定量PCR定量方法。结果获得了不同启动子的转移质粒,制备了3种不同启动子的LV,应用荧光定量PCR方法测定制备的病毒,载量能达到109copies/ml。结论成功构建了不同启动子的转移质粒,获得了三种LV,建立了针对LV的荧光定量PCR方法,为后续研究不同启动子在多种细胞系中驱动目的蛋白的表达奠定了基础。
- 张玲翁云层张云帅丽芳李婷婷王文敬李红卫赵卫黎诚耀
- 关键词：重组慢病毒绿色荧光蛋白荧光定量PCR
- 用于筛查转基因作物成分的质粒标准分子的研制被引量：4
- 2019年
- 为弥补传统标准物质的缺乏,构建了一种可用于筛查转基因作物成分的质粒标准分子。首先,通过PCR扩增获得454 bp的RBCL基因、236 bp的CaMV35S启动子以及200 bp的NOS终止子目的片段,经两次重叠延伸PCR扩增将上述3个片段连接成849 bp的重组子。随后,将该重组子克隆至pMD18-T载体,经PCR扩增、测序分析后成功获得阳性重组质粒pMD-RBCL-CaMV35S-NOS。进一步的替代性研究显示,该重组质粒DNA与标准物质基因组DNA的检测分析结果一致。因此,该重组质粒标准分子可作为阳性标准物质用于转基因作物成分的初步筛查检测。
- 肖维威张宝赵卫朱利吴清华
- 关键词：转基因作物重叠延伸PCR
- 2010年冬-2011年春广州地区儿童腺病毒的分子流行病学研究
- 张其威赵素慧朱冰王长兵朱利赵卫万成松
- 开设综合性实验课 注重学生能力培养被引量：6
- 1997年
- 开设综合性实验课 注重学生能力培养中国人民解放军第一军医大学龙北国，赵卫，别平华，罗军实验课教学的主要目标应是使学生了解学科研究的主要方法和手段，掌握基本技能和基本原理，尤为重要的是重视培养学生各种实际能力（如自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能...
- 龙北国赵卫别平华罗军
- 关键词：实验课
- 登革2型病毒04株5′和3′末端的序列分析被引量：1
- 2000年
- 目的 测定登革 2型病毒 0 4株 (D2 0 4)基因组 5′和 3′末端序列。方法 从D2 0 4感染的C6 / 36细胞中提取总RNA ,以该RNA为模板 ,利用RACE法 ,分别扩增D2 0 4株的 5′和 3′末端cDNA片段。将其分别与 pGEM T载体连接得到含有 5′端 5 35bp和 3′端 5 0 3bpcDNA的重组质粒 ,并测定上述cDNA插入片段的序列。将D2 0 4的 5′和 3′端非编码区的核苷酸序列与其它登革 2型毒株进行同源性比较。结果 D2 0 4株与JAM、NGC、S1、16 6 81和PDK 5 3株的同源性分别为98 96 % ,98 96 % ,93 75 % ,98 95 % ,97 92 %和 97 72 % ,97 80 % ,90 6 5 % ,94 2 6 % ,94 2 2 %。结论 D2 0 4株除与S1株的同源性略低外 ,其余株的同源性均在 94%以上。
- 杨敬杨佩英秦鄂德胡志君于曼欧武仝莉莉赵卫
- 关键词：登革热病毒基因
- 泰国、越南与香港人源H5N1禽流感病毒序列比对及进化特点分析被引量：6
- 2007年
- [目的]禽流感病毒不仅引起禽类感染和流行,而且可以打破种属屏障、引起人或其他哺乳动物感染和传播,欲对1997年香港和2004年泰国、越南直接感染人的H5N1禽流感病毒基因组序列进行比对及进化特点分析。[方法]利用Lasergene软件包中的EditSeq从14株禽流感病毒分离株截取HA、NA、M2基因序列并翻译成氨基酸,然后用ClustalX软件对截取的片断进行比较分析。[结果]①2004年泰国、越南人源H5N1毒株的HA切割位点上的氨基酸序列和1997年香港人源H5N1毒株一致;②2004年泰国、越南人源H5N1毒株和1997年香港人源H5N1毒株具有相同的受体结合位点;③泰国和越南人源H5N1毒株的NA茎部缺失了20个氨基酸而在HA上增加了一个潜在糖基化位点;④M2蛋白某些氨基酸位点发生改变,导致部分泰国和越南人源H5N1毒株对金刚烷胺产生耐药性。[结论]1997年香港和2004年泰国、越南直接感染人的H5N1禽流感病毒基因组序列发生了改变。
- 赖沛龙邹梦晨朱利卢扬柏刘杨安张玲卢翔宇赵卫
- 关键词：HANAM2耐药性
- pSFV1载体系统的改造
- 2001年
- 目的 获得具有多种稀有酶位点和CMVIE增强子 启动子及SV40晚期poly(A)加尾信号的pSFV1载体系统。方法 首先将含有多种稀有酶位点的人工接头插入到pSFV1的BamHⅠ和SmaⅠ位点 (获得的载体称为mpSFV1) ,然后在mpSFV1和辅助载体Helper2的SpeⅠ和SphⅠ位点分别插入SV40晚期poly(A)加尾信号和CMVIE增强子 启动子序列。以间接免疫荧光法检测构建的表达载体mpSFV1 A CMV表达登革 2型病毒PrME基因的效率 ,并用RT PCR法鉴定辅助载体Helper2 A CMV包装形成重组病毒的能力。结果 经PCR和酶切鉴定证明 ,接头、CMVIE增强子 启动子序列和SV40晚期poly(A)加尾信号序列均已导入pSFV1载体系统中 ;测序结果也与已知序列一致。间接免疫荧光法证明 ,PrME蛋白在BHK2 1细胞中获得了表达 ,同时 ,改造后的辅助载体也具有包装形成重组病毒的能力。结论 已将以RNA为基础的pSFV1载体系统构建成以DNA为基础的表达载体系统。
- 陈水平秦鄂德于曼赵卫范宝昌胡志君王鹏程杨佩英
- 关键词：启动子登革病毒
- 登革热对军事行动的影响及美军的对策
- 2003年
- 赵卫秦鄂德张文炳
- 关键词：登革热军事医学登革病毒美军疫苗
- 登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法被引量：3
- 2001年
- 目的 对带有登革 2型病毒 (DEN 2 )全长cDNA的质粒pDVWS5 0 1上E6 2、E2 0 3位点进行定点诱变。方法 设计 4对点诱变引物 ,运用OL PCR(overlapPCR)法 ,扩增出分别在E6 2或E2 0 3位带有点突变的 2条DNA片段 ,克隆至T载体 ,获T TB6 2、T TB2 0 3两个克隆。将T TB6 2用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切 ,T TB2 0 3用SphⅠ +NheⅠ酶切后 ,用T4连接酶分别连接至pDVWS5 0 1,获重组质粒TB6 2和TB2 0 3。对TB6 2和TB2 0 3进行序列测定。结果 成功得到分别在E6 2、E2 0 3位带有点突变的TB6 2、TB2 0 3克隆。结论 OL
- 赵卫胡志君杨佩英秦鄂德于曼陈水平王鹏程耿丽卿范宝昌
- 关键词：登革2型病毒CDNA克隆定点诱变登革热病毒
- 重组慢病毒载体介导不同启动子驱动的绿色荧光蛋白在多种(不同)细胞中的表达影响被引量：4
- 2015年
- 目的比较不同启动子的慢病毒转导细胞后,在不同细胞系中驱动绿色荧光蛋白表达的效率高低。方法采用3种不同启动子的转移质粒,与包装质粒共转染293T细胞,转染60 h后,收集慢病毒上清。用等量的三种慢病毒液转导5种细胞系(293A、MOLT-4、PC3、DU145及RM1),72 h后,荧光显微镜下观察转导效果;流式细胞仪计数转导效率。结果不同启动子(Ubiquitin,EF1α,CMV)在5种细胞系中驱动绿色荧光蛋白的表达及转导效率不同。在293A和PC3细胞中,CMV为最强启动子,转导率分别为(94.83±2.87)%和(20.90±3.15)%;但在MOLT-4和DU145细胞中,EF1α为最强启动子,转导率分别为(74.27±2.14)%和(25.13±4.95)%;在RM1细胞中,Ubiquitin为最强启动子,转导率为(16.77±0.38)%。结论在慢病毒载体介导基因表达研究中,要考虑选取合理的细胞和启动子以获得高效的转导效率。
- 张玲翁云层张云帅丽芳李婷婷王文敬李红卫赵卫黎诚耀
- 关键词：重组慢病毒绿色荧光蛋白
