王福乐
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导TIEG1基因乳腺癌靶向载体的构建及活性测定
- 2011年
- 目的:构建慢病毒介导的TIEG1基因乳腺癌特异性靶向载体,并鉴定其活性。方法:将乳腺癌特异性survivin启动子片段和TIEG1基因先后克隆进带有绿色荧光蛋白的慢病毒载体中,构建survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体,酶切及测序鉴定。包装纯化慢病毒颗粒,感染人脐静脉内皮细胞HUVEC和乳腺癌细胞SK-BR-3,观察绿色荧光蛋白的特异性表达。结果:成功构建带有肿瘤特异性survivin启动子驱动的TIEG1基因慢病毒表达载体。感染细胞后,乳腺癌SK-BR-3细胞可观察到绿色荧光表达,而人正常脐静脉内皮细胞基本无表达。半定量RT-PCR证实TIEG1基因在乳腺癌SK-BR-3细胞中过表达。结论:构建的survivin启动子驱动的慢病毒表达载体具有一定的肿瘤特异性,将为实现以慢病毒为载体的TIEG1基因肿瘤靶向治疗提供良好的实验基础。
- 蒋磊林飞燕王福乐叶爱芳吴建波
- 关键词：乳腺肿瘤SURVIVIN启动子慢病毒载体
- S100P基因慢病毒表达载体的构建及对结肠癌Caco-2细胞的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:通过构建S100P慢病毒表达载体,研究其对结肠癌Caco-2细胞的影响。方法:以DLD-1细胞cDNA为模版,PCR扩增S100P基因序列,然后将该序列克隆插入慢病毒载体中,构建S100P慢病毒表达载体,包装产生慢病毒颗粒。将慢病毒颗粒感染Caco-2细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)技术检测S100P的表达情况;MTT法检测细胞生长变化;细胞平板克隆培养检测其细胞克隆形成能力。结果:构建的慢病毒表达载体Lenti-S100P经酶切和测序鉴定结果正确;携带S100P基因的慢病毒颗粒感染Caco-2后,细胞中S100P基因和蛋白过表达,促进细胞克隆形成能力。结论:本研究成功构建S100P慢病毒表达载体,为深入研究S100P基因的相关功能提供了一定的实验基础。
- 王福乐林飞燕吴建波蒋磊
- 关键词：S100P慢病毒表达载体结肠肿瘤
