王彬
- 作品数:6 被引量:50H指数:2
- 供职机构:河南工业大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 抗真菌肽CGA-N46基因多顺反子表达载体的构建与鉴定
- 2011年
- 目的:为提高抗真菌肽CGA-N46表达量,对该基因多顺反子表达进行研究。方法:以pEASY-Blunt为克隆载体,以"pET-30a rbs序列-起始密码子-CGA-N46编码序列-终止密码子"为外源片段,利用同尾酶Nhe I、Spe I和Xba I,构建了含有上述外源片段1、3、5、8拷贝的重组载体pT-CAN46、pT-3CAN46、pT-5CAN46和pT-8CAN46;将pEASY-Blunt上的外源基因片段亚克隆至pET-30a的rbs序列下游,构建了CGA-N46基因1、3、5、8顺反子的重组表达载体pET-CAN46、pET-3CAN46、pET-5CAN46和pET-8CAN46;利用感受态转化法转化大肠杆菌Rosetta,进行了表达研究。结果:在IPTG诱导下,CGA-N46基因1、3、5、8顺反子重组表达载体均能表达CGA-N46单体,各重组表达载体表达CGA-N46的量在总蛋白中的百分含量分别为3.4%、5.0%、12.4%、17.1%。结果表明随着CGA-N46基因顺反子个数的增加,外源蛋白表达量也越来越多。其中,8顺反子表达量最高,实现了CGA-N46的高效表达。结论:多顺反子表达可以克服融合表达和串联表达肽类蛋白的不足;创建的多顺反子表达载体构建方法简化了传统基因工程构建方法的步骤,为基因工程有效提高小肽表达量奠定了基础。
- 李瑞芳熊前程张宗武黄亮王彬
- 关键词:抗真菌肽
- 一种燃气灶
- 本实用新型涉及一种燃气灶,其包括一种燃气灶火焰控制装置,所述燃气灶火焰控制装置固定于灶台上的锅架上,所述燃气灶火焰控制装置为平面连杆构件,所述平面连杆构件一端固定于锅架上,另一端固定一从动阀,燃气管穿过从动阀,所述燃气灶...
- 任宁周峰王彬易强刘畅
- 文献传递
- 抗坏血酸脂溶性改性对油脂回色影响
- 植物油在运输、储藏和食用过程中,随着时间的延长,油脂色泽发生显著加深,这一现象为油脂回色。原料品质、加工工艺和储藏条件等多种因素影响油脂回色,随着对回色的深入研究,已经证实油脂氧化是油脂回色的诱因,油脂中γ-生育酚的氧化...
- 王彬
- 关键词:酶固定化
- 动物内源性多肽CGA-N46生物信息学分析被引量:8
- 2013年
- 抗菌肽是存在于动植物、昆虫、微生物等生物体内,具有抗菌活性的肽类物质。CGA-N46是一种抗真菌多肽。利用生物信息学工具分析CGA-N46,发现CGA-N46等电点为7.38,分子质量为5.363ku,为亲水蛋白,二级结构为α螺旋,有两个磷酸化位点,无糖基化位点、信号肽序列和跨膜区。通过对CGA-N46结构与性质的分析,推测其可能作用于细胞壁或某些生物分子,致使菌体死亡。
- 李瑞芳卢研博陈士华张慧茹王彬熊前程
- 关键词:生物信息学抗菌肽
- 多肽CGA-N46基因工程表达条件优化和纯化
- CGA-N46是一种小分子短肽,具有较高的抗白假丝酵母活性,有望成为抗真菌药物。基因工程表达是制备CGA-N46的一种常用方法,但存在表达量低、难以纯化等问题。本文以构建好的枯草芽孢杆菌工程菌DB1342(p-3N46)...
- 王彬
- 关键词:多肽响应面纯化层析
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究被引量:42
- 2011年
- 为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进。用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DB1342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5 kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响。结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DB1342的转化率为750 CFU/μgDNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/μg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg DNA。根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内。
- 李瑞芳薛雯雯黄亮熊前程王彬
- 关键词:枯草芽孢杆菌感受态细胞