熊前程
- 作品数：5 被引量：59H指数：3
- 供职机构：河南工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 动物内源性多肽CGA-N46生物信息学分析被引量：8
- 2013年
- 抗菌肽是存在于动植物、昆虫、微生物等生物体内,具有抗菌活性的肽类物质。CGA-N46是一种抗真菌多肽。利用生物信息学工具分析CGA-N46,发现CGA-N46等电点为7.38,分子质量为5.363ku,为亲水蛋白,二级结构为α螺旋,有两个磷酸化位点,无糖基化位点、信号肽序列和跨膜区。通过对CGA-N46结构与性质的分析,推测其可能作用于细胞壁或某些生物分子,致使菌体死亡。
- 李瑞芳卢研博陈士华张慧茹王彬熊前程
- 关键词：生物信息学抗菌肽
- 抗真菌肽CGA-N46基因多顺反子表达载体的构建与鉴定
- 嗜铬粒蛋白A是存在于多种动物内分泌组织和神经内分泌细胞内嗜铬颗粒中的一种酸性糖蛋白，其N端衍生多肽CGA-N46且具较高抗白假丝酵母活性，是一种具有研发价值的新型肽类抗真菌药物。为提高CGA-N46基因工程表达量，本研究...
- 熊前程
- 关键词：大肠杆菌表达系统
- 文献传递
- 抗真菌肽CGA-N46基因多顺反子表达载体的构建与鉴定
- 2011年
- 目的:为提高抗真菌肽CGA-N46表达量,对该基因多顺反子表达进行研究。方法:以pEASY-Blunt为克隆载体,以"pET-30a rbs序列-起始密码子-CGA-N46编码序列-终止密码子"为外源片段,利用同尾酶Nhe I、Spe I和Xba I,构建了含有上述外源片段1、3、5、8拷贝的重组载体pT-CAN46、pT-3CAN46、pT-5CAN46和pT-8CAN46;将pEASY-Blunt上的外源基因片段亚克隆至pET-30a的rbs序列下游,构建了CGA-N46基因1、3、5、8顺反子的重组表达载体pET-CAN46、pET-3CAN46、pET-5CAN46和pET-8CAN46;利用感受态转化法转化大肠杆菌Rosetta,进行了表达研究。结果:在IPTG诱导下,CGA-N46基因1、3、5、8顺反子重组表达载体均能表达CGA-N46单体,各重组表达载体表达CGA-N46的量在总蛋白中的百分含量分别为3.4%、5.0%、12.4%、17.1%。结果表明随着CGA-N46基因顺反子个数的增加,外源蛋白表达量也越来越多。其中,8顺反子表达量最高,实现了CGA-N46的高效表达。结论:多顺反子表达可以克服融合表达和串联表达肽类蛋白的不足;创建的多顺反子表达载体构建方法简化了传统基因工程构建方法的步骤,为基因工程有效提高小肽表达量奠定了基础。
- 李瑞芳熊前程张宗武黄亮王彬
- 关键词：抗真菌肽
- 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究被引量：42
- 2011年
- 为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进。用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DB1342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5 kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响。结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DB1342的转化率为750 CFU/μgDNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/μg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg DNA。根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内。
- 李瑞芳薛雯雯黄亮熊前程王彬
- 关键词：枯草芽孢杆菌感受态细胞
- 嗜铬颗粒蛋白A研究进展被引量：9
- 2010年
- 嗜铬颗粒蛋白A(Chromogranin A,CGA)属于独特的酸性可溶性蛋白质家族,遍布于动物内分泌系统、神经系统和免疫系统,与其他激素和多肽共贮存、共分泌.在CGA上有许多碱性氨基酸对,成为潜在的激素原转化酶切割位点.很多切割产物已经被鉴定,其中有些具有生物学功能.近年的研究表明,在多种病理、生理状态下,CGA及其衍生片段在组织中含量升高,发挥抑制性生理功能或作为疾病诊断指标.嗜铬颗粒蛋白A的N端衍生片段在机体防御系统中的抗菌功能、在心血管系统中的抗血管收缩功能已被阐明,使其作为临床候选药物具有巨大潜力;CGA完整片段在内分泌肿瘤和神经内分泌肿瘤中含量升高,可作为内分泌肿瘤和神经内分泌肿瘤诊断指标,但其在肿瘤发生过程中的作用还未见报道.
- 李瑞芳熊前程
- 关键词：抗菌功能肿瘤诊断
