王俊梅
- 作品数：11 被引量：19H指数：4
- 供职机构：中山大学中山医学院组织胚胎学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省社会发展攻关项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学语言文字更多>>
- NT-3基因修饰雪旺细胞和NT-3受体基因修饰神经干细胞联合移植治疗大鼠全横断脊髓损伤的实验研究
- 本研究旨在探讨应用NT-3基因修饰雪旺细胞和NT-3受体基因修饰神经干细胞联合移植治疗大鼠全横断脊髓损伤，观察这种治疗策略能否更好地促进受损伤脊髓结构和功能的恢复，并分析其中可能的作用机制，为临床治疗急性脊髓损伤提供新策...
- 王俊梅
- 关键词：TRKC神经干细胞雪旺细胞脊髓损伤
- 文献传递
- 人神经营养素-3受体基因的扩增及其重组腺病毒载体的构建
- 2005年
- 【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C,tyrosineproteinkinaseC,TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA中扩增TrkC基因全长cDNA,定向克隆于穿梭质粒pShuttle中,获得一个带有CMV启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA(Adeno-XviralDNA)体外连接,形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno-TrkC)。【结果】TrkC基因RT-PCR扩增产物为2478bp。Adeno-TrkC经PCR鉴定为正确重组子。【结论】应用体外连接法已构建了人TrkC重组腺病毒表达载体,这为进一步应用NT-3进行基因治疗中枢神经损伤奠定了基础。
- 王俊梅曾园山刘然义吴立志薛刚黄嘉凌黄必军黄文林
- 关键词：基因克隆重组腺病毒
- 人神经营养素－3受体基因重组腺病毒在制备治疗神经损伤药物中的应用
- 本发明涉及一种用人神经营养素－3受体基因(人TrkC基因)重组的腺病毒表达载体(Ad－TrkC)的的生物活性作用及其在神经损伤修复中的应用。可将人Ad－TrkC用于促进受损伤的中枢神经元存活及其轴突再生，以及促进神经干细...
- 曾园山王俊梅
- 文献传递
- 人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体的表达和生物学活性检测
- 2006年
- 目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体(Adeno-TrkC)在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno_TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Westernblotting检测Adeno-TrkC感染的神经干细胞表达TrkC受体蛋白。在体外培养条件下,观察人神经营养素-3(NT-3)对感染了Adeno-TrkC的神经干细胞分化为神经元样细胞和星形胶质样细胞的影响。结果在Adeno-TrkC感染的293细胞和神经干细胞中检测到TrkCmRNA和TrkC受体蛋白,且表达产物和其配体NT-3结合后能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞,分化率达到55.2%,均高于其他对照组。结论Adeno_TrkC能在神经干细胞内表达TrkC受体蛋白,这种TrkC受体蛋白具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞活性的作用,这为进一步应用NT-3和TrkC联合进行基因治疗中枢神经损伤研究奠定了基础。
- 王俊梅曾园山黄文林熊轶王延华
- 关键词：TRKC重组腺病毒WESTERNBLOTTING
- 移植的干细胞源性神经网络与脊髓损伤后宿主神经网络整合的研究
- 为了促使脊髓全横断损伤后的神经网络重建,修复神经传导功能,本研究应用过表达神经营养素-3(NT-3)的雪旺细胞(SCs)和过表达NT-3受体(TrkC)的神经干细胞(NSCs)构建了一种具有突触传递功能的神经网络导管。然...
- 赖碧琴王俊梅曾园山
- 腺病毒介导SARS病毒SN基因表达及其诱导的体液免疫被引量：1
- 2005年
- 目的检测重组腺病毒Ad-SN在体内外的表达,初步探讨其在大鼠内诱导的体液免疫反应。方法Ad-SN感染Vero-E6细胞后用RT-PCR和WesternBlot法检测SN基因的表达;用WesternBlot法检测Ad-SN在大鼠皮下组织中的表达。Ad-SN皮下免疫大鼠,用ELISA法测定血清中抗SARS-CoVIgG水平。结果在Ad-SN感染的Vero-E6细胞中存在SN基因的转录,其mRNA量呈剂量依赖性;在Ad-SN感染的细胞、其培养上清及Ad-SN注射部位组织中均能检测到SN的表达。在Ad-SN免疫大鼠血清中可检测到高滴度SARS冠状病毒抗体(IgG)。结论Ad-SN能表达分泌型SN蛋白,并在大鼠体内诱导SARS-CoV特异的体液免疫反应。
- 刘然义黄嘉凌吴立志黄必军柯妙拉张艳玲王俊梅黄文林
- 关键词：SARS冠状病毒腺病毒载体刺突蛋白体液免疫
- NT-3基因修饰及维甲酸预诱导的骨髓间充质干细胞在脊髓损伤处分化为神经元样细胞的研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨移植在脊髓损伤处的神经营养素-3(NT-3)基因修饰及维甲酸(RA)预诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的潜能。方法将MSCs、RA诱导的MSCs、LacZ基因修饰的MSCs、NT-3基因修饰的MSCs和NT-3基因修饰及RA预诱导的MSCs分别立即移植到脊髓全横断处(T10脊髓),术后67d取材和冷冻切片,用免疫荧光组织化学染色方法检测MSCs的分化潜能,计算各细胞移植组脊髓损伤处的MSCs分化为神经元样细胞的百分率。结果移植的MSCs在受损伤的脊髓内可分化为神经干细胞(nestin阳性)、神经胶质样细胞(GFAP阳性)和神经元样细胞(NF和MAP2阳性),有些还可以向含有某种神经递质和有形成突触潜能的神经元样细胞分化(ChAT、5-HT和PSD95阳性)。联合应用NT-3基因修饰和RA预诱导的MSCs能在受损伤的脊髓内更有效地提高MSCs向神经元样细胞分化的百分率。结论NT-3基因修饰和RA预诱导的MSCs能在脊髓损伤处更好地分化为神经元样细胞。
- 张巍曾园山张雪宝王俊梅闫清唐久余陈穗君
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经营养素-3维甲酸脊髓损伤重组腺病毒载体神经元样细胞
- 推进组织学与胚胎学双语教学培养高素质医学人材——双语教学改革阶段性成果简介被引量：4
- 2009年
- 经过两年多的组织学与胚胎学双语教学改革,我们在双语教学大纲编写、课程设置、教材建设、教学工作安排和学生考试等方面,已取得了阶段性的成果,达到了学校批准立项的教学改革专项(双语课程建设)研究课题预期目标,为我们进一步完善组织学与胚胎学双语教学改革打下了坚实的基础。
- 曾园山李朝红胡黎平丁英王俊梅
- 关键词：组织学与胚胎学双语教学教材建设
- 人神经营养素-3基因重组腺病毒载体的构建、表达和生物活性检测被引量：5
- 2005年
- 目的构建具有生物活性的人神经营养素_3(NT_3)基因重组腺病毒表达载体。方法从人脑组织mRNA中扩增NT_3基因全长cDNA,定向克隆于穿梭质粒pShuttle中,获得一个带有CMV启动子的质粒。再与腺病毒骨架DNA(Adeno-X viral DNA)体外连接,形成重组腺病毒质粒(pAd_NT_3)。用pAd_NT_3转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno_NT_3)。结果NT_3基因RT-PCR扩增产物约801 bp。Adeno_NT_3 PCR鉴定为正确重组子。RT_PCR、免疫细胞化学、ELISA及Western blot检测显示,Adeno_NT_3能在其转染的293细胞表达和分泌NT_3。这种NT_3能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞。结论应用体外连接法成功构建了人NT_3基因重组腺病毒表达载体,其表达产物具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞的活性作用。
- 王俊梅曾园山刘然义吴立志薛刚黄文林熊轶王延华
- 关键词：神经营养素-3重组腺病毒神经干细胞免疫细胞化学
- 结缔组织铺片脂肪组织油红染色在组织学实验教学中的应用被引量：4
- 2014年
- 目的在传统结缔组织铺片基础上开展脂肪组织油红染色方法在医学本科生组织学实验教学中的应用。方法学生先进行疏松结缔组织铺片,并施行脂肪组织油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,然后镜下观察。结果油红o染色把结缔组织中的脂肪细胞内脂滴保存下来并染上红色。脂肪组织中央的细胞脂滴均匀红染,充满胞浆,周边的脂肪细胞胞浆中油红染色很少,细胞呈空泡状,显示出脂肪细胞亚群存在。甲苯胺兰染色使得疏松结缔组织中肥大细胞染成紫红色,胞核染色浅,细胞数量多、成群分布。伊红可使得结缔组织内除脂肪细胞、肥大细胞意外的其他细胞的胞浆和胶原纤维染成淡红色。结论传统的组织学平铺片技术基础上引入脂肪油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,可增强学生动手能力,并能很好地了解输送结缔组织中细胞的不同表型和分布,丰富组织学内容,把教学、科研连接一起,达到提高实验教学质量的目的。
- 王俊梅平苏宁汪泓黄锦桃陈大堤李朝红
- 关键词：组织学实验教学脂肪组织
